简介：摘要一种用于动物细胞培养的新型微载体利用葡聚糖和环氧氯丙烷进行交联反应，得到葡聚糖凝胶，即微载体，并用精氨酸对微载体进行修饰，使微载体在细胞培养液中表面带上正电荷，进而吸附细胞，使细胞贴附在表面生长。由于精氨酸酸性羧酸酯基团，这个方案为细胞培养提供了与市售Cytodex1微载体相比具更低的表面pH，理论上表面pH值可以做到7.0左右，其结果是更适宜pH的微载体。将产物初步用于VERO细胞培养，得到了较好的结果。细胞在微载体上生长良好，和目前广泛使用的Cytodex1微载体效果相仿。

简介：摘要GMP，英文全称GOODMANUFACTURINGPRACTICE，其中文意思是“药品生产质量管理规范”或“良好作业规范”。它是用于制药，食品和其他行业中较为普遍的强制性标准。本标准要求相关企业控制原材料质量，公司原有工作，设施设备，包装运输等。在标准的要求下，可以形成一个系统有利于改善企业环境，及时发现生产过程中的问题1。在制药企业中，制药设备是制药过程中必不可少的生产设备，制药设备GMP功能是制药生产过程中的控制和管理功能，因此，本文对这个论题的论述有着十分重要的现实意义。

简介：摘要一种用于动物细胞培养的新型微载体利用葡聚糖和环氧氯丙烷进行交联反应，得到葡聚糖凝胶，即微载体，并用精氨酸对微载体进行修饰，使微载体在细胞培养液中表面带上正电荷，进而吸附细胞，使细胞贴附在表面生长。由于精氨酸酸性羧酸酯基团，这个方案为细胞培养提供了与市售Cytodex1微载体相比具更低的表面pH，理论上表面pH值可以做到7.0左右，其结果是更适宜pH的微载体。将产物初步用于VERO细胞培养，得到了较好的结果。细胞在微载体上生长良好，和目前广泛使用的Cytodex1微载体效果相仿。

简介：目的比较α-MEM和高糖DMEM两种培养基对小鼠破骨细胞前体细胞系RAW264.7细胞分化的影响.方法（1）根据培养基和是否添加核因子κB受体激活蛋白配体（receptoractivatorfornuclearfactor-κBligand,RANKL）将细胞分为4组：α-MEM培养基组、添加RANKL的α-MEM培养基组、高糖DMEM培养基组、添加RANKL的高糖DMEM培养基组;（2）于培养第3天收集细胞,分别通过qPCR、免疫印迹实验观察分化相关标记物抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrateresistantacidphosphatase,TRAP）、活化的T细胞核因子（nuclearfactorofactivatedT-cells1,NFATc1）、核因子κB受体活化因子（receptoractivatorfornuclearfactor-κB,RANK）和组织蛋白酶（Cathepsin）K的mRNA及蛋白表达水平,并做TRAP染色观察各组成熟破骨细胞的形成情况,探讨添加RANKL后α-MEM培养基和高糖DMEM培养基对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响.结果（1）与添加RANKL的高糖DMEM培养基相比,添加RANKL的α-MEM培养基使RAW264.7细胞的分化相关标记物TRAP、NFATc1、RANK及cathepsinK的mRNA表达水平增加,TRAP、NFATc1及cathepsinK的蛋白表达水平增加;（2）在α-MEM培养基或高糖DMEM培养基中添加RANKL均可使RAW264.7细胞分化为成熟破骨细胞,但添加RANKL的α-MEM培养基处理的细胞组中形成的成熟破骨细胞更多.结论添加RANKL的α-MEM培养基有利于RAW264.7细胞向破骨细胞分化.

简介：摘要目的对微载体悬浮培养Vero细胞的生产工艺进行研究。方法通过调整生物反应器关键参数（转数）来研究并优化微载体悬浮培养Vero细胞工艺。结果优化工艺后可更好的应用于生产。结论优化后的工艺可以适用于生物反应器载体悬浮培养Vero细胞的生产。

简介：目的：分离、培养、纯化家猫的骨髓间充质干细胞，并对获得细胞的表面标志物进行鉴定，为进一步利用骨髓间充质干细胞的细胞移植实验奠定基础。方法：采用全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化家猫骨髓间充质干细胞，通过多次更换培养液获得较纯化的骨髓间充质干细胞，倒置相差显微镜下对细胞形态进行观察；根据第1、3、5、7、9代细胞的镜下增殖情况绘制出生长曲线；通过流式细胞仪检测细胞表面标志抗原CD34、CD44和CD90的表达率。结果：在倒置相差显微镜下观察，分离培养的骨髓间充质干细胞贴壁呈梭形或纺锤形；原代细胞生长丛集成片，5～7d达到融合，进行传代；培养到第三代以后，细胞出现相对均匀的梭形扁平外观，迅速增殖的细胞呈涡流样排列；第3、5代骨髓间充质干细胞增殖能力强于第7、9代；采用流式细胞仪分析结果显示细胞的CD34、CD44和CD90阳性率分别为17．5％、97．9％和91％，这与骨髓间充质干细胞表面抗原的表达一致。结论：分离培乔的细胞具有骨髓间充质干细胞特性，成分相对单一，第3、5代细胞纯度高，增殖能力强，适用于进一步的实验研究.

简介：建立一种简便、快捷的人胎盘绒毛膜间充质干细胞（humanplacentalchorionic-derivedmesenchymalstemcells,hpcMSCs）分离培养方法。用手持电动匀浆器处理人绒毛膜,经酶消化后接种培养,用倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8测定细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞表面标记,成脂、成骨诱导分化试剂盒鉴定细胞的分化潜能。获得的人胎盘绒毛膜间充质干细胞为成纤维细胞样细胞,呈平行排列或漩涡状生长,高表达CD73、CD105、CD90,而CD34、CD45、CD14、CD19、HLA-DR呈阴性,生长曲线为＂S＂型,经成骨或成脂诱导后,茜素红染色或油红O染色呈阳性。符合国际细胞治疗学会认可的间充质干细胞标准。建立了人胎盘绒毛膜间充质干细胞的分离培养新方法,结合了组织块法和酶消化法的优点,为绒毛膜间充质干细胞的应用提供基础。

简介：

简介：摘要目的通过低黏附培养板培养法建立人膀胱癌T24细胞三维培养模型，为膀胱癌治疗药物早期开发提供灵敏度高的体外筛选模型。方法采用1000个/孔-8000个/孔的密度将T24细胞接种至低黏附培养板中培养5天，或5000个/孔接种量培养12天，观察细胞球形态并考察不同细胞接种数量和不同培养时间对细胞球体积的影响。采用Westernblot比较二维培养及三维培养的T24细胞中缺氧诱导因子-1α（Hif-1α）的表达变化。采用不同浓度的顺铂及丝裂霉素处理细胞，比较二维及三维培养的T24细胞对药物敏感性差异。结果采用低黏附培养法T24细胞能形成形状较为规则的三维细胞球，且细胞球体积随着细胞接密度及培养时间的增加而增大；三维培养的T24细胞中Hif-1α的表达高于二维培养的T24细胞，且随着三维培养时间的增加而增加。三维培养方式下，丝裂霉素及顺铂的IC50值分为1.39μg/mL及18.29μg/mL，远高于二维培养条件下的0.10μg/mL及2.42μg/mL。结论采用低黏附培养板培养法建立的T24细胞三维培养模型具有操作简便、快速，预测准确率高的优点，是理想的膀胱癌治疗药物早期开发体外活性筛选模型。

简介：背景：人尿源性干细胞研究较少，目前尚无稳定高效的培养方法。目的：比较3种培养基对人尿源性干细胞生长和增殖的影响，优化其培养方法。方法：离心、提纯尿液获取人尿源性干细胞，利用贴壁法分别在角质细胞无血清培养基、祖细胞培养基以及尿源性细胞培养基(角质细胞无血清培养基和祖细胞培养基以等比例混合而成)进行培养，观察细胞生长状态，MTT法检测细胞增殖情况，绘制生长曲线。结果与结论：3种培养基均能够培养出尿源性干细胞，尿源性干细胞在角质细胞无血清培养基中缓慢生长，在祖细胞培养基中生长较快，在尿源性细胞培养基中生长最好。结果表明，尿源性细胞培养基为人尿源性干细胞最佳生长培养基，能够快速、高效的培养出人尿源性干细胞。

简介：摘要目的研究分析红细胞冷凝集对血液分析仪检测的影响和处理方法。方法对20例红细胞冷凝集标本在3种不同条件下使用全自动血细胞分析仪XE-5000进行检测①普通室温（20℃）；②37℃水浴30min后；③25℃条件下，37℃水浴30min后。测定3种不同条件下红细胞﹑血红蛋白﹑红细胞各项参数﹑白细胞﹑血小板的值。结果20℃条件下，20例标本红细胞、白细胞和血小板均有异常报警；37℃水浴30min后，其中15例标本无异常报警，5例标本红细胞、白细胞和血小板均有异常报警；25℃条件下37℃水浴30min，20例标本均无异常报警。3种条件下检测结果中，血红蛋白（HGB）、白细胞（WBC）和血小板（PLT）差异无统计学意义（P>0.05）；红细胞（RBC）、红细胞压积（HCT）、红细胞平均红细胞体积（MCV）、红细胞平均血红蛋白含量（MCH）和红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）差异有统计学意义（P<0.05）。结论红细胞冷凝集对WBC、HGB和PLT检测结果基本无影响。对RBC、HCT、MCV、MCH和MCHC检测结果有影响，在日常工作中，应引起重视，并对红细胞冷凝集标本进行科学处理。

简介：摘要目的探讨去白细胞输血和未去白细胞输血的临床效果。方法将近年来在我院接受去白细胞输血治疗的55例患者作为观察组，同期接受未去白细胞输血治疗的55例患者作为对照组，比较分析两组患者输血后各指标变化及不良反应发生情况。结果两组输血后3d天门冬氨酸氨基转移酶（GOT）、丙氨酸氨基转移酶（GPT）、乳酸脱氢酶（LDH）水平改善程度显著大于对照组（P<0.05），两组总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆红素（TB）水平比较无统计学意义（P﹥0.05）；对照组输血后CO2水平有所升高，输血不良反应发生率显著高于观察组（P<0.05）。结论去白细胞输血治疗可有效减少患者组织受损，安全性更高。

简介：摘要循环肿瘤细胞（circulatingtumorcell，）简称CTC，通常把进入人体外周血的肿瘤细胞称为循环肿瘤细胞。1869年，澳大利亚籍医生Ashworth首次提出循环肿瘤细胞的概念。1976年Nowell将CTC的定义修正为来源于原发肿瘤或转移肿瘤，获得脱离基底膜的能力并入侵通过组织基质进入血管的肿瘤细胞。目前CTC是指存在于外周血中的各类肿瘤细胞的统称。大量研究表明，CTC以不同形态存在于外周血中，既有游离的单个CTC，也有聚集成团的细胞团（CTM，CirculatingTumorMicroemboli）。肿瘤细胞在进入外周血循环的过程中会发生上皮-间质转变（EMT，EpithelialMesenchymalTransition），故CTC存在不同类型，包括上皮细胞表型、间质细胞表型和上皮细胞与间质细胞混合表型。CTM和间质细胞表型CTC具有更强的转移潜能。

简介：摘要目的对细胞块在细胞学诊断中的应用价值进行探讨。方法将2013年—2017年期间临床送检1200胸、腹水离心，其中离心后有沉淀的标本85例，将沉淀做成细胞石蜡块进行检测。结果细胞块切片细胞分布均匀，可保持脱落细胞实际形态结构。结论在浆膜腔积液细胞学的病理检查中细胞块技术的应用具有较高的诊断价值。

简介：背景：脐带间充质干细胞可分化成胰岛β细胞用于移植治疗1型糖尿病，但需要进一步提高疗效，并研究其免疫调节机制。目的：观察3D培养的脐带间充质干细胞移植对1型糖尿病小鼠的疗效及免疫调节机制。方法：组织贴壁法分离脐带间充质干细胞并进行3D培养，扫描电镜观察细胞形态，流式细胞术检测细胞表面标志物；采用链脲佐菌素诱导1型糖尿病小鼠模型，2D干细胞移植组和3D干细胞移植组于造模7d后尾静脉注射脐带间充质干细胞(5×106/只)，对照组和模型组小鼠注射等体积生理盐水。移植后每周检测各组小鼠空腹血糖，连续4周；移植后30d，制备小鼠单个脾细胞悬液，流式细胞术检测T细胞亚群变化；移植后30d，ELISA试剂盒检测各组小鼠血清中细胞因子白细胞介素4，白细胞介素10，白细胞介素2，γ-干扰素水平。结果与结论：①3D培养体系下脐带间充质干细胞生长良好，高表达细胞表面标志物CD44，CD73、CD90和CD105；②细胞移植2-4周后，小鼠血糖水平显著下降，与模型组相比差异有显著性意义(P<0.05)；3D干细胞移植组血糖水平低于2D干细胞移植组，第4周差异有显著性意义(P<0.05)；③与模型组相比，干细胞移植组Th1细胞百分比下降，Th2细胞与Treg细胞百分比显著升高(P<0.01)；与2D干细胞移植组相比，3D干细胞移植组Th1细胞亚群百分比降低，Th2细胞亚群和Treg细胞百分比升高(P<0.05)；④与模型组相比，干细胞移植组白细胞介素2和γ-干扰素水平降低，而白细胞介素4和白细胞介素10水平明显升高；与2D干细胞移植组相比，3D干细胞移植组白细胞介素2水平降低，白细胞介素4和白细胞介素10水平升高(P<0.05)；⑤结果表明，3D培养的脐带间充质干细胞移植治疗1型糖尿病小鼠效果优于2D培养的脐带间充质干细胞，其机制可能与上调调节性T细胞，维护体内Th1/T

简介：摘要目的探讨不同浓度氧对高糖培养的大鼠肾成纤维细胞（NRK）血管内皮生长因子（VEGF）和色素上皮衍生因子（PEDF）表达的影响。方法按照常规方法体外培养NRK细胞，同步化后随机分为6组，包括正常对照组、高糖对照组、缺氧对照组、5%氧浓度组、12%氧浓度组、20%氧浓度组。采用半定量RT-PCR测定NRK细胞中VEGF和PEDF的表达变化情况。并用ELISA法检测培养液上清中VEGF与PEDF蛋白水平。结果①正常对照组中，VEGF和蛋白有弱表达，PEDF和蛋白有强表达；②高糖组的VEGF表达较正常对照组明显升高，PEDF表达明显下降，且呈时间依赖性；③缺氧对照组VEGF表达较高糖对照组明显升高，PEDF表达下降，且呈时间依赖性；④不同氧浓度组的VEGF表较达正常对照组均明显降低，PEDF表达明显上升，且呈剂量依赖性；⑤不同氧浓度组的VEGF表达较高糖对照组均明显降低，PEDF表达明显上升，且呈剂量依赖性；⑥在不同氧浓度组中，随着时间的延长，VEGF表达逐渐增加，而PEDF表达逐渐减少；比较P＜0.05，差异均具有统计学意义。结论缺氧会导致高糖培养的NRK细胞中VEGF和PEDF表达失衡，分析其可能是导致糖尿病肾病发病的主要因素之一。

简介：

简介：细胞增殖是高中生物的基础,是历年高考重点考查的知识点之一。该专题主要考查细胞分裂图和曲线图。笔者将历年复习此专题的策略总结如下,供同仁参考讨论。一、明确要求,把握方向《高中生物课程标准(2017年版)》和《考试大纲》是高考命题的依据之一。笔者在复习该专题时将涉及的每个知识点都按照表1细化,做到心中有数。

简介：一、教材分析本节是人教版高中生物必修一第五章《细胞的能量供应和利用》第二节。生命活动需要能量,如何获得能量并利用呢?这是本章的主题。糖类、脂肪等有机物中储存着化学能,却不能直接利用,能为生命活动直接能量的物质是——ATP。本节具体介绍了ATP的组成、特点,ATP与ADP的相互转化及ATP的作用,并将ATP形象地比喻成细胞内流通的能量“通货”。本节内容联系前面化合物“糖类、脂质”,并为后面细胞呼吸和光合作用的学习奠定了基础。二、教学目标(1)知识与技能:①简述ATP的组成和特点;②写出ATP的结构简式;③解释ATP在能量代谢中的作用。

简介：《西游记》中的孙悟空法力无边,只需要拔些毫毛轻轻一吹,就能立刻变出千百个分身。如今,类似的场景有望在现实中呈现。中国科学院神经科学研究所孙强团队的研究员于2018年1月24日下午在北京宣布,团队经过5年的不懈努力,突破了体细胞克隆猴的世界难题.