简介：目的利用错配杂交和化学发光技术,建立一种检测MGMT基因启动子区过甲基化的定量分析方法.方法基因组DNA经过亚硫酸氢钠修饰,所有未甲基化的胞嘧啶都被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不发生变化.设计特异的PCR引物（不合CpG位点）,同时扩增含有CpG位点甲基化或非甲基化目的MGMT基因启动子区,用两条分别与甲基化及非甲基化CpG位点互补的寡核苷酸探针与扩增产物杂交,化学发光检测,通过两条探针的杂交信号强度之比确定样品DNA中MGMT甲基化的程度.结果检测混合样品中MGMT基因的甲基化水平与结果完全相符,并可用于肿瘤组织样品的MGMT甲基化定量检测.结论与现有方法相比,本法是一种检测快速、操作简便的MGMT基因甲基化的定量检测方法.

简介：摘要目的研究不明原因自然流产患者绒毛组织中H19启动子区域甲基化水平与正常早孕绒毛的差异，并分析其可能的发生机制。方法收集不明原因自然流产及正常早孕的绒毛组织各30例，对组织中H19基因启动区域甲基化水平进行检测及对照分析，并对两组绒毛组织中的三种甲基转移酶的表达水平进行对照分析。结果H19上游DMR中甲基化水平检测结果提示两组间绒毛组织中H19启动子区域甲基化水平存在差异，自然流产组中甲基化水平明显低于对照组，差异有显著性（P<0.01），自然流产组绒毛组织DNMT1mRNA及蛋白的表达量与正常早孕组无明显统计学差异（P>0.05），而自然流产组绒毛组织DNMT3a及DNMT3b的mRNA及蛋白的表达量明显低于正常早孕组，差异有显著性（P<0.01）。结论自然流产患者绒毛组织中H19DNA甲基化水平的明显下降，下调DNA甲基转移酶中DNMT3a与DNMT3b的表达可能是甲基化水平差异的重要机制之一。

简介：本研究通过对急性白血病病人及体外肿瘤细胞株的DNA甲基化及基因表达的实验,探讨死亡相关蛋白激酶（death-associatedproteinkinase,DAPK）基因在急性白血病中的表达情况及其启动子区域甲基化的状态,并分析两者之间的相关程度.应用RT-PCR检测DAPK基因在白血病细胞及正常骨髓细胞中的表达;用巢式甲基化特异性PCR（n-MSP）法检测急性白血病患者及细胞株DAPK基因启动子甲基化状况;从第二轮巢式MSP扩增出的随机产物中挑选2个随机引物,交予专业机构克隆后进行序列分析.结果表明：DAPK基因在10例正常对照者骨髓标本中均有表达,DAPKmRNA在急性白血病病人骨髓标本中表达平均值为0.61±0.40,低于正常对照者,差异有显著性（P＜0.05）,其中52.94％（9/17例）的急性淋巴细胞白血病病人骨髓标本DAPKmRNA表达降低或缺失,急性髓系白血病病人数据为41.18％（42/102）;细胞株U-937显示基因表达正常,HL-60表达缺失;102例急性髓系白血病病人骨髓标本中33例存在DAPK启动子区甲基化,甲基化率为32.4％（33/102）;17例急性淋巴细胞白血病病人骨髓标本中8例存在DAPK启动子区甲基化,甲基化率为47％（8/17）;7例正常人骨髓标本DAPK启动子区均为非甲基化;细胞株U-937DAPK启动子区非甲基化,HL-60DAPK启动子区甲基化.ALL组与AML组患者骨髓细胞DAPKmRNA表达与其启动子甲基化均呈显著负相关（ALL组r=-0.855,P＜0.05;AML组r=-0.343,P＜0.05）,提示两者有密切的关联.结论：急性白血病患者中DAPK基因启动区甲基化与其mRNA的异常表达或失表达有关.

简介：摘要目的探讨Ｆａｓ蛋白、ＦａｓｍＲＮＡ的表达及Ｆａｓ基因的甲基化状态在非小细胞肺癌发生发展中的相互关系及临床意义。方法经手术治疗的非小细胞肺癌患者４２例（鳞癌１６例，腺癌２６例），收集肺癌组织、癌旁组织及正常肺组织。采用免疫组化Ｓ－Ｐ染色方法、逆转录聚合酶链式反应、重亚硫酸盐修饰及甲基化特异性聚合酶链式反应分别检测非小细胞肺癌患者癌组织、癌旁组织及正常肺组织中Ｆａｓ蛋白、ＦａｓｍＲＮＡ的表达情况及Ｆａｓ基因甲基化状态，并分析其在非小细胞肺癌形成过程中的相互关系。结果非小细胞肺癌组织的Ｆａｓ蛋白阳性表达率为３５．７１％，ＦａｓｍＲＮＡ阳性表达率为４５．２４％，明显低于其在癌旁组织及正常肺组织中的表达率（Ｆａｓ蛋白阳性表达率分别为６９．０４％和８５．７１％，ＦａｓｍＲＮＡ阳性表达率分别为７６．１９％和９０．４８％）。非小细胞肺癌组织Ｆａｓ基因甲基化率６４．２９％明显高于其在癌旁组织及正常肺组织中的甲基化率（分别为３０．９５％和２１．４３％）。非小细胞肺癌Ｆａｓ蛋白、ＦａｓｍＲＮＡ分别与Ｆａｓ基因甲基化呈显著负相关（Ｆａｓ蛋白ｒ＝#０．４７１，Ｐ＜０．０１；ＦａｓｍＲＮＡｒ＝#０．４６９，Ｐ＜０．０１）。结论与癌旁组织及正常肺组织相比，非小细胞肺癌组织中存在显著的Ｆａｓ基因高甲基化，ＦａｓｍＲＮＡ及Ｆａｓ蛋白表达下调。非小细胞肺癌Ｆａｓ表达与Ｆａｓ基因甲基化显著负相关。结果提示，Ｆａｓ基因高甲基化可能导致Ｆａｓ基因失活，从而影响肿瘤细胞的凋亡，导致肿瘤细胞异常增殖及免疫逃逸。

简介：为了明确苹果三倍体杂种后代中基因组DNA甲基化水平及模式的变化特征，本文以‘金冠’ב四倍体嘎拉’苹果的6l份三倍体后代为试验材料，采用MSAP分子标记技术对其进行了分析。结果表明：（1）61份三倍体杂种后代的总甲基化率在10．74％～28．86％之间，全甲基化率在7．87％～24．22％之间，半甲基化率在2．10％～11．84％之间。与母本相比，总甲基化和全甲基化呈上升趋势，半甲基化呈下降趋势；与父本相比，均呈下降趋势。（2）在苹果三倍体杂种的基因组加倍和重组过程中，发生了大量过或超甲基化和去甲基化变异，少量发生了次甲基化现象，极少部分的甲基化状态介于双亲之间。（3）共获得4条DNA甲基化差异片段，有3条能够在苹果基因组中检测到，且同源性较高，分别位于第1条和第12条染色体的叠连群上，但是具体功能没有描述。研究结果表明，苹果三倍体杂种后代的DNA甲基化水平与倍性相关性不大，在其形成过程中发生了大量的过或超甲基化变异，为苹果三倍体育种中表观遗传变异的研究提供了依据。

简介：目的系统评价去甲基化药物治疗中高危骨髓增生异常综合征（MDS）的有效性和安全性。方法计算机检索PubMed、EMbase、TheCochraneLibrary（2013年第3期）、webofScience、CNKI、VIP、WanFangData和CBM数据库，查找去甲基化药物治疗MDS的随机对照试验（RCT），检索时限均为从建库至2013年3月。南2位研究者按照纳入与排除标准筛选文献、提取资料和评价纳入研究的方法学质量后，采用RevMan5．1软件进行Meta分析。结果共纳人4个研究，816例患者。Meta分析结果显示：与最佳支持治疗方案相比，去甲基药物治疗方案对于中高危MDS患者在完全缓解率[OR=19．14，95％CI（5．33，68．7），P〈0．00001]、部分缓解率[OR=20．63，95％CI（5．76，73．93），P〈0．00001]、血液学缓解率[OR=3．58，95％CI（2．40，5．34），P〈0．00001]、Ⅲ／Ⅳ级粒细胞减少症发生率[OR=3．82，95％CI（2．67，5．47），P〈0．00001]、Ⅲ／Ⅳ级血小板减少症发生率[OR=3．98，95％CI（2．55，6．23），P〈0．00001]及病死率[OR=0．52，95％CI（0．35，0．77），P〈0．00001]方面更优，其差异均有统计学意义。部分患者会出现Ⅲ／Ⅳ级血细胞减少症及可耐受的非血液学不良反应。结论现有证据表明，去甲基化药物治疗MDS疗效明显，可延长疾病转化为白血病时间，降低病死率和提高患者生存质量。

简介：目的探讨组蛋白赖氨酸去甲基化酶KDM5A在人牙髓细胞（hDPC）中的表达模式及成牙本质分化诱导对其表达量的影响。方法体外培养hDPC,实时荧光定量聚合酶链反应和Westernblot检测第1代至第8代（P1-P8代）hDPC中KDM5AmRNA和蛋白的表达量;免疫荧光检测KDM5A在hDPC中的分布;对P3代细胞进行成牙本质分化诱导,于第7天和第14天分别检测KDM5AmRNA和蛋白的表达水平。结果体外传代培养hDPC中可检测到KDM5A的表达,KDM5AmRNA和蛋白量均呈先增加后减少的趋势;hDPC细胞质及细胞核中均表达KDM5A;成牙本质向分化诱导7和14d,KDM5AmRNA和蛋白量高于未诱导组细胞,诱导14d表达量高于诱导7d（P〈0.05）。结论hDPC表达KDM5A,矿化诱导可提高KDM5A的表达。

简介：目的：探讨组蛋白去甲基化酶JMJD3对骨髓基质干细胞（bonemarrowstromalcells，BMSCs）体外多潜能性及成骨分化的生物学调控作用。方法：用离心和贴壁培养相结合方法分离培养大鼠四肢骨BMSCs，分别用含JMJD3-shRNA的绿色荧光蛋白（GFP）慢病毒干扰载体（实验组）及含无关序列的GFP慢病毒载体（对照组）转染BMSCs，Westernblot方法检测两组BMSCs中组蛋白H3第27位赖氨酸上三甲基化（H3K27me3）及干细胞多潜能转录因子Oct4、Nanog、Sox2的表达，并比较两组细胞的克隆形成率；实时定量RT-PCR、Westernblot、茜素红染色检测两组细胞的体外成骨分化能力。结果：与对照组相比，实验组BMSCs的H3K27me3表达水平升高，具有更强的克隆形成能力，且表达更强的Oct4、Nanog、Sox2等多潜能因子；体外成骨诱导7d后，实验组BMSCs中RUNX2等成骨分化基因表达下降，诱导14d后，钙结节形成较对照组少。结论：抑制JMJD3表达可增强BMSCs的干性特征，抑制其成骨分化。

简介：目的：探讨甲基化酶抑制剂5′-氮杂-2′-脱氧胞苷（5′-Aza-2′-deoxycytidine，5′-Aza-CdR）对结直肠癌细胞株HT-29和Lo-Vo中p16基因甲基化状态、mRNA及蛋白表达的影响。方法应用TaqMan探针为基础的实时定量PCR法、SYBRGreenPCR法及蛋白印迹实验（Westernblot）检测不同浓度5′-Aza-CdR处理前后HT-29和LoVo细胞中p16基因的甲基化状态、mRNA和蛋白表达。结果TaqMan探针为基础的实时定量PCR法检测HT-29和LoVo细胞中p16蛋白在药物作用后异常甲基化得到逆转；实时荧光定量PCR和WesternBlot检测到0．5、1．0、1．5μM5′-Aza-CdR处理后p16基因mRNA和蛋白均重新表达，具有统计学意义（P均＜0．05）。结论结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中p16启动子甲基化可能是导致该基因表达下调甚至失活的主要原因。5′-Aza-CdR能够较成功的逆转结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中p16基因的甲基化状态，并能恢复mRNA及蛋白重新表达。

简介：

简介：主要探讨了除草剂噻吩磺隆的合成工艺，以丙烯腈为原料经氯化反应得1，2-二氯丙腈，以巯基乙酸为原料在催化剂作用下跟甲醇反应生成巯基乙酸甲酯，1，2-二氯丙腈、巯基乙酸甲酯在甲醇钠作用下环合制得氨基噻吩，氨基噻吩经重氮化、氯磺化、氨化制得3-氨基磺酰基噻吩-2-甲酸甲酯，3-氨基磺酰基噻吩-2-甲酸甲酯跟光气反应生成异氰酸酯后与均三嗪缩合，经处理制得噻吩磺隆。实验结果表明，该工艺路线反应收率高，可达90%左右（以三嗪计），含量为96%，易于控制和处理且三废少。

简介：摘要目的对国标法<水质有机磷农药的测定气相色谱法>方法进行优化与改进，使其更灵敏、准确、实用。方法优化样品萃取方法，改用弱极性毛细管色谱柱（HP-5）代替填充柱、火焰光度检测器（FPD）检测。结果实验表明，农药混标在0.01～1.0μg／ml浓度范围内线性良好，最低检出质量浓度为0.01～0.10μg／L，相对标准偏差为3.5％-5.6％左右，平均回收率在81.6％-92.6％左右。结论该方法操作简便快速，结果准确可靠，重复性好，适用于水中敌敌畏、乐果、甲基对硫磷三种有机磷农药残留量测定。

简介：摘要目的探讨甲磺司特在哮喘患者中的临床疗效。方法选择于2014年7月～2014年12月在我院治疗的40例哮喘患者，随机分为甲磺司特组和常规治疗组，每组20例，常规治疗组接受常规治疗，甲磺司特组在常规治疗组的基础上加用甲磺司特治疗，比较两组临床疗效。结果治疗结束后，甲磺司特组显效9例，有效9例，无效2例，总有效率为90.0%（18/20），常规治疗组显效4例，有效6例，无效10例，总有效率为50.0%（10/20），组间差异具统计学意义（P＜0.05）。结论甲磺司特能有效缓解支气管哮喘患者的临床症状，效果明显，长期使用明显改善肺功能，值得临床推广。

简介：采用密度泛函理论的B3LYP方法、从头算的MP2方法和自洽反应场极化连续模型（PCM）,在6-311＋＋G（2d,2p）基组水平上研究了N,N’-二甲基-S-异苯并呋喃在气相和溶液中发生S→N烷基重排反应的机理、溶剂效应和取代基效应.结果表明：该反应通过四元环机理和双位迁移机理生成产物,在气相和溶剂水中,双位迁移途径的能垒均比四元环途径低,反应主要通过双位迁移途径生成产物.在气相,苯环上发生-Cl,-NO2和-OCH3取代时,双位迁移途径的能垒在MP2/6-311＋＋G（2d,2p）水平上比没有取代时分别低4.18,7.61,4.96kJ/mol,反应的取代基效应不明显.而在溶剂水中,苯环上发生-Cl,-NO2和-OCH3取代时,双位迁移途径的能垒在PCM-MP2/6-311＋＋G（2d,2p）水平上比气相时分别低37.73,39.96和37.17kJ/mol,反应的溶剂化效应非常明显.理论研究结果与实验观察结果一致.

简介：目的：就卡络磺钠及酚妥拉明对肺结核咯血进行联合治疗的临床疗效。方法：选取2011年2月至2013年1月入院且每日咯血量大于100ml的患者90例，以每组45名患者随机分为观察组及对照组。观察组静脉滴注卡络磺钠，并持续泵入酚妥拉明；对照组则泵入垂体后叶素。通过统计和对比两组病例的治疗情况和效果评价该治疗方式的临床效果。结果：统计后发现观察组与对照组差异明显。临床显效率观察组大大优于对照组，且未见不良反应发生。结论：卡络磺钠配合酚妥拉明的施治方案对于肺结核咯血较单独泵入垂体后叶素疗效明显，副作用少，值得临床推广使用。

简介：研究了在碱性锌锰电池负极中添加新型表面活性剂十二烷基乙氧基磺基甜菜碱（DESB）对电池性能的影响，结果表明表面活性剂十二烷基乙氧基磺基甜菜碱能有效降低电池贮存后的内阻，减少电池高温贮存后的析气量，提高电池的贮存性能和安全性能，加入量为相当锌粉重量的0．1％时电池贮存性能最佳。

简介：建立一种利用高效液相色谱法检测熊胆口服液中牛磺熊去氧胆酸的测定方法。通过不同检测条件的改变，制定复方制剂的熊胆口服液中牛磺熊去氧胆酸高效液相法的检测条件，保证该药物的疗效。

简介：为了快速获得具有杀菌活性的先导化合物,按照苯环上取代基的性质,将18个N-取代苯基-2-羟基环己烷基磺酰胺分成8个大小不等的原料库（A）,分别与过量的2-乙氧基乙酰氯（B1）和4-氟苯甲酰氯（B2）反应,获得16个2-酰氧基环己烷基磺酰胺类组合库。通过气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）和红外光谱分析了组合库中36个化合物的结构和含量。以番茄灰霉病菌BotrytiscinereaPers.为供试靶标,菌丝生长速率法测试结果表明：当A的苯环上含有多个Cl或CF3等吸电子基团时,与B1反应生成的组合库的活性普遍较高,其中活性组合库A5B1、A6B1和A7B1的杀菌活性均高于对照药剂腐霉利;黄瓜离体叶片试验表明,活性组合库A6B1和A7B1的防效也与腐霉利相当。在组合库生物活性筛选中化合物的结构、含量和数量是影响筛选结果的3个因素,其中结构为主要因素。

简介：1案件简介某年4月28日赵某和尹某受雇他人,赵某用氧焊切割拆解废旧铁罐时发生爆炸,赵某全身燃烧,沙土灭火后送医院进行抢救治疗无效,19天后死亡,尹某当场死亡.

简介：纵观近几年的中考化学试题，计算反应后所得溶液中溶质质量分数的试题有所增加。此类试题能很好的将化学方程式的计算、质量守恒的计算及其溶液中溶质质量分数的计算融合在一起。综合程度较高，一道题能很好的考查学生几个方面的最为基础的计算能力。