简介：昆虫杆状病毒科(Baculoviridae)因包埋于多角体中的病毒粒子呈棒状而得名,迄今为止,用于基因工程的杆状病毒均属核型多角体病毒(nuclearpolyhedrosisvirus,NPV)。NPV是一类双链DNA病毒,它的DNA是90—230Kb的环状分子。利用NPV作为外源基因表达载体的设想最初是由Miller1981年提出。1983年

简介：腺病毒基因组约为35kb，分为7个血清型，采用其中较为安全的血清型2和5可作为载体。腺病毒做为载体有很多优点：它能感染广泛的细胞类型；能感染分裂细胞或不分裂细胞；腺病毒的疫苗已为人们使用．

简介：慢病毒载体（lentivirusvector,LV）是作为目前研究最多的外源性转基因载体之一,在基因转染方面有着许多独特的优势,例如,对细胞是否处于有丝分裂期没有特别的要求,基因转染效率高,可容纳较大基因片段等。本文就慢病毒载体系统的概述、肿瘤的基因治疗、转基因动物模型构建等方面进行综述。

简介：摘要昆虫杆状病毒表达载体系统是基于昆虫杆状病毒及其宿主细胞建立的真核表达体系，具有安全性高、重组蛋白表达水平高、能同时表达多个基因，可对重组蛋白进行正确折叠和翻译后修饰等优势，主要应用于预防性及治疗性疫苗和基因治疗药物的研发及生产。本文对该载体系统的关键技术及应用进展作一综述。

简介：近年来,自动售检票(AFC)系统在轨道交通中备受重视。自动售检票系统通过对客流和收益数据的收集为轨道交通企业各业务部门提供了辅助分析服务。本文介绍了无锡地铁防病毒系统的设计思路以及安全管理系统体系结构设计,从技术、管理和服务三个方面结合无锡地铁实际对其做了简单说明。

简介：病毒式营销是营销理念的重大变革，是一种低成本高效益的营销传播方式，本文就其常用传播载体进行简要的分析，并提出自己的建议，希望能起到抛砖引玉的作用。

简介：本文简要综述腺病毒载体的研究现状，包括各型载体的构成、优势与缺陷，及其相应的优化策略，并指出在我国人群中腺病毒载体作为疫苗和基因治疗的工具所应采取的优化措施。

简介：摘要：目的：本论文旨在综述腺相关病毒载体在基因治疗和免疫治疗领域的研究进展，探讨其在治疗和潜在应用方面的最新发展。方法：通过查阅相关文献，收集和整理了与腺相关病毒载体有关的研究成果，并结合国内外相关研究进行分析。结果：在基因治疗方面，腺相关病毒载体已被广泛应用于遗传性疾病、癌症和神经系统疾病等的治疗。不仅可以有效传递修复基因，还可以调节基因表达，并显示出良好的生物安全性和耐受性特性。另外，在免疫治疗方面，腺相关病毒载体可用于疫苗开发和免疫调节，提供了一种新的治疗策略。腺相关病毒载体的研究工作也包括载体优化、体内外评价和治疗效果验证等方面。结论：腺相关病毒载体在基因治疗和免疫治疗方面展现出了巨大的前景和潜力。通过持续的研究和优化，它们有望成为治疗遗传性疾病、肿瘤和其他复杂疾病的有效工具。然而，仍然需要进一步的研究来解决其在临床应用中可能存在的问题，并确保其安全性和有效性。

简介：目的:利用Adeasy-1系统,构建并鉴定CARP基因重组腺病毒载体.方法:PCR扩增含有CARP全长cDNA的片段,经测序验证无误后,亚克隆至pAdTrack-CMV穿梭质粒,再与pAdEasy-1质粒在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组产生腺病毒载体质粒.经过抗性筛选以及酶切鉴定得到阳性的重组质粒,再在293细胞中进行包装扩增,利用Adeasy系统上的绿色荧光蛋白标签鉴定病毒表达.结果:测序证实PCR产物为CARP全长cDNA;抗性筛选及酶切鉴定均表明重组腺病毒载体构建成功;转染293细胞3天后可见绿色荧光,回收病毒可以重复感染293细胞,证明病毒包装成功.

简介：摘要重组病毒载体疫苗的原理是将外源基因插入病毒基因组以构建重组病毒，免疫机体后在体内表达相应蛋白并诱导特异性免疫应答。该类疫苗具有载体种类多、插入片段长、能同时诱导体液免疫和细胞免疫等优势，能克服灭活疫苗的效力维持时间短和减毒活疫苗回复突变的弊端。此文综述了重组病毒载体疫苗的最新研究进展，为将来的研究提供参考。

简介：近几年在基因治疗的临床试验方面发生了几起病例死亡事件，对基因治疗临床试验的开展产生了巨大的负面影响。有关部门对基因治疗临床试验制定了更为严格的规定，但是一些接受基因治疗试验的患者的良好治疗效果进一步证实了基因治疗的可行性。这些信息告诉我们应该清楚地认识病毒载体和转基因技术对宿主细胞可能产生的多种不同影响。现已证实在转基因治疗中病毒有可能激活插入点附近的原癌基因，因此发现一种不整合人宿主基因或精确定点整合宿主基因的病毒载体显得尤为重要。

简介：摘要2019年底的新冠疫情加速了全球各研究机构对新冠疫苗的研发。正在进行临床试验的多种技术平台的新冠疫苗中，重组病毒载体类疫苗表现出较好的免疫原性优势和效力，但同时出现的疫苗安全性和载体预存抗体等问题也不容忽视。本文将概述重组载体疫苗的设计理念和发展历程，梳理当前不同重组病毒载体新冠疫苗的临床研究进展，并阐述其面临的主要挑战和未来的发展方向，以期为重组载体类疫苗的研究提供借鉴。

简介：目的探讨腺相关病毒（AAV）载体转导碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）基因对肌腱愈合的影响，并观察腺病毒、AAV以及脂质体-质粒三种基因治疗载体应用于肌腱所产生的组织反应。方法取13只成年白色来亨鸡的双侧中趾趾深屈肌腱（26根），随机分为实验组和对照组，每组13根，实验组肌腱完全切断后注射AAV2-bFGF并以改良Kessler法修复，对照组不注射AAV2-bFGF，仪以改良Kessler法修复。第4周末行免疫组织化学染色，第8周末测定趾屈曲功。将6只成年新西兰白兔的趾深屈肌腱（36根）分成三组，每组12根，分别注射10μL的腺病毒、AAV2和脂质体-质粒载体，术后第3、7、14天分别取肌腱，进行石蜡切片、HE染色。结果AAV2-bFGF可以在术后4周显著地提高肌腱bFGF的表达，而且不增加趾屈曲阻力（粘连形成）。所测屈曲功第8周末实验组为（0．052±0．031）J，对照组为（0．049±0．035）J，两组间差异无统计学意义（t=0．1266，P=0．8984）。脂质体-质粒载体组肌腱组织反应重于腺病毒载体组，AAV2载体组肌腱组织反应最轻，在腱外膜处有组织反应，而腱内膜区域几乎无组织反应。结论用AAV2载体转bFGF基因至肌腱能有效增加愈合肌腱的bFGF。在三种所研究的载体中，腺病毒和AAV2载体引起的组织反应比脂质体-质粒载体轻。AAV2引起的组织反应最轻。AAV2可能会成为肌腱的转基因良好载体。

简介：慢病毒载体是近年来受到广泛关注的一种逆转录病毒载体,能稳定且高效地转染分裂细胞和非分裂细胞,已成功应用于临床,并逐渐应用于其他生物医学领域。本文从慢病毒载体的分子构造、遗传毒性、细胞工程应用及转基因动物模型应用方面就慢病毒载体的研究作一综述。

简介：在目前的疫苗研究中，对新疫苗免疫效果的要求越来越高。减毒或无毒的病毒疫苗载体能够激发高效持久的系统和黏膜免疫，并且具有较高的安全性，为研究新疫苗提供了一条途径。RNA病毒作为疫苗载体，在可操作性和免疫效果方面有着显著的优势，近年来已成为疫苗研究领域的热点。综述了几种RNA病毒载体目前的研究状况及其在疫苗载体方面的应用。

简介：摘要目的构建人巨细胞病毒(human cytomegalovirus, HCMV)转录的长链非编码RNA4.9(long non-coding RNA4.9, lncRNA4.9)干扰慢病毒载体。方法设计并合成3条以lncRNA4.9为靶点的干扰序列，构建穿梭质粒GV248和目的干扰序列的重组质粒，测序验证序列，将重组质粒与骨架质粒pHelper1.0、pHelper2.0共转染293T细胞，收集病毒颗粒并检测拷贝数。将干扰慢病毒载体转染THP-1细胞，观察荧光表达量，通过real-time RT-PCR法检测干扰效率。结果构建的3组慢病毒干扰载体(LV1、LV2、LV3)，LV2和LV3具有干扰效率，LV2组干扰效率最高。结论成功构建lncRNA4.9干扰慢病毒载体，为后续进一步研究lncRNA4.9的功能奠定了基础。

简介：目的利用逆病毒表达载体快速构建梯度过表达人MTA1稳转单克隆细胞系。方法利用噬菌斑原位杂交筛选人肺噬菌体文库，以阳性克隆为模板，RT-PCR获得人MTA1完整CDS序列。以逆病毒表达载体pMX为基础，经过多次酶切连接，构建逆病毒表达载体pMX—MTA1-flag—IRES—EGFP。将构建好的逆病毒载体系统，转染293-gag／pol细胞，包装出含该表达载体的逆病毒颗粒。以含病毒上清多次感染HCT116细胞，获得稳定转染MTA1的HCT116多克隆细胞系。将该多克隆细胞系按合适比例稀释后接种至10cm大皿，获得大量单克隆细胞系，以GFP为筛选标志，筛选不同荧光强度的单细胞克隆进行扩增并分析MTA1与GFP表达水平的线性关系。结果测序结果显示成功克隆出人MTA1表达序列。免疫荧光、WesternBlot结果证实成功构建出梯度过表达MTA1的稳转细胞系。相关性验证结果显示构建的非融合载体MTA1与GFP的表达呈明显的线性相关，相关系数r=0．932，P〈0．01。结论利用逆病毒表达系统，快速成功构建并筛选出MTA1与GFP非融合梯度过表达稳转单克隆细胞系，为MTA1基因功能研究提供了良好模型。该逆转录病毒平台可用于快速建立其他基因的稳转单克隆细胞系。

简介：目的：构建并制备能够有效表达EB病毒BHRF1基因的重组慢病毒载体,观察BHRF1表达对人胚肺成纤维细胞（KMB17）凋亡的影响。方法：采用RT-PCR法,从B95-8细胞扩增EBVBHRF1基因,克隆至pWPIGW慢病毒载体上,与pVSVG及pSPAX质粒共转染人胚肾293T细胞,包装出重组慢病毒。将纯化后的重组慢病毒直接感染293T和KMB17细胞,荧光显微镜、实时定量RT-PCR、免疫印迹等方法检测BHRF1在细胞中的表达水平。流式细胞仪检测BHRF1表达对凋亡诱导剂或无血清培养诱发KMB17细胞凋亡的影响。结果：重组慢病毒介导BHRF1在293T和KMB17细胞内获得表达,能有效地抑制KMB17细胞的凋亡。结论：成功构建了表达BHRF1基因的重组慢病毒载体。

简介：一、把准脉搏,改进未成年人思想道德建设的工作方法未成年人思想道德建设既牵扯到社会方方面面,同时也是一个涉及历史、触及未来的恒久课题。抓好未成年人思想道德建设,更需要我们形成一套与时代和社会发展同步并相互适应的工作方式方

简介：腺病毒（Adeno）基因组为线状双链DNA，长度大约36kb．适合于容纳较大片段外源基因。与逆转录病毒载体相比，腺病毒载体能有效地将外源基因转染到各种靶细胞中。其宿主范围广，感染性强，尤其能感染分化后的非分裂期细胞。在Adeno生活周期中，其基因不整合到宿主细胞DNA中，故无插入突变激活癌基因的危险，外源基因能游离地表达。商品化的腺病毒载体一般剔除了其基因组的E1区，经体外重组后，产生可复制缺陷型腺病毒。