简介:摘要目的登革病毒(dengue virus,DENV)的NS5蛋白主要起RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)作用,本研究旨在通过构象型噬菌体展示肽库筛选潜在的抗病毒前体药物。方法以可溶性重组DENV-2 NS5蛋白为靶点,从构象型噬菌体展示肽库中筛选高特异性寡肽(oligopeptide,OP),并通过分子对接技术验证OP与RdRp之间的相互作用。将感染DENV-2的C6/36细胞暴露于不同浓度的OP中,并通过RT-qPCR检测病毒滴度,以此来评估OP的抗DENV-2作用。同时,将C6/36细胞暴露在较高浓度的OP中进行培养,并通过CCK-8法测定细胞活性以评估OP的细胞毒性。结果通过分子对接发现,OP可特异性结合于DENV NS5蛋白的RdRp结构域。在体外实验中发现,OP可以抑制DENV复制,且在细胞实验中未表现出细胞毒性。此外,基于RdRp结构域在单股正义链RNA(+ssRNA)病毒中的高度保守性,并利用分子对接技术初步发现,OP可能同样结合于多种+ssRNA病毒的RdRp活性空腔。结论OP可能具有广谱的+ssRNA病毒RdRp抑制能力,是一个潜在的广谱抗病毒前体药物。
简介:摘要:C++语言作为程序语言中的底层语言常常用于系统以及数据信息的基本处理。其广泛、开源的适应性,无论是Windows亦或是linux都可使用。尤其是在处理系统的建设方面起着至关重要的作用。架构的建设基于C++在栈道处理上面的优势,在面向各类对象的程序性编程时就有广谱实用性,这种实用性得益于其函数对于实现功能的简便化。出于这样的角度出发,我们可以从广义和具体函数两个角度出发,探讨C++作为底层语言所具备的广谱使用以及具体到某一程序开发商的强大功能。同时,这种语言的大力发展对于电子信息技术而言是有着突破性的帮助。
简介:摘要目的制备靶向甲型流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白的广谱抗体FHA3,并对其进行鉴定。方法依据单链抗体(single-chain antibody fragment,scFv)序列信息,PCR扩增FHA3重链和轻链可变区序列,连入抗体哺乳细胞表达载体pFRT-IgG1κ,构建重组表达质粒pFRT-IgG1κ-FHA3。利用瞬时高效表达系统ExpiCHO以及亲和纯化技术获取抗体蛋白FHA3。ELISA检测FHA3与甲型流感病毒HA的结合。假病毒感染宿主细胞试验检测抗体FHA3的体外中和活性。结果蛋白质电泳结果显示制备获取了高纯度FHA3。FHA3与甲型流感病毒H1N1 HA、H2N2 HA、H3N2 HA、H5N1 HA、H7N9 HA以及H9N2 HA均识别结合,且呈浓度依赖效应。FHA3具有较好的体外中和活性,在低浓度下(5 μg/ml)能有效阻断H5N1以及H7N9假病毒入侵靶细胞,在0.012 5 μg/ml浓度下能有效阻断H1N1假病毒入侵靶细胞。结论获得1株具有体外中和活性的靶向甲型流感病毒HA蛋白的广谱抗体。
简介:摘要人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)感染的长期不进展者(LTNP)体内分离到的广谱中和抗体(bNAbs),已被证明可以预防HIV-1感染并降低感染者体内的病毒载量,成为了指导HIV-1疫苗设计和被动免疫治疗的突破口。中和抗体的功能除了与靶向表位有关,其亲和力也极大的影响了抗体的活性。HIV-1 bNAbs通过体内的多轮亲和力成熟获得了较高亲和力,从而实现了广谱度和中和活性的增加。高亲和力HIV-1 bNAbs在治疗过程中能更好的协助机体免疫系统清除病原体,并且使用剂量更少,毒副作用也相对较低。在亲和力成熟的同时,HIV-1 bNAbs表现出了高水平的体细胞超突变(SHM)、插入缺失、较长的重链第三互补决定区等不寻常的特征。这些特征阻碍了通过有效疫苗诱导HIV-1 bNAbs在体内产生并发育成熟,因此了解抗体亲和力成熟过程中发生的突变及其要点,有助于理解中和抗体的活性与特征的关系,并为设计有效的HIV-1潜在免疫原提供参考。
简介:【摘要】目的:探讨尿路感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药特征分析。方法:选取2019年12月-2022年1月的医院尿路感染患者经过尿培养中分离到的细菌进行培养鉴定以及药物敏感性检测,对产 ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,使用双纸片法进行验证并使用统计学软件对产生与非产生 ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性进行分析。结果:送检尿样本分离1200株尿路感染菌株,其中大肠埃希菌580株(48.33%),肺炎克雷伯菌90株(7.50%),产ESBLs肺炎克雷伯菌(63.33%),产ESBLs大肠埃希菌(63.79%);产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌选用敏感度较高的头孢替坦、亚胺培南、美洛培南,且产ESBLs大肠埃希菌对阿米卡星和头孢比肟敏感性高于产ESBLs肺炎克雷伯菌(P
简介:【内容摘要】识读乐谱是基础音乐教育阶段学生学习音乐知识技能的必要内容之一。识谱能力的提高对学生感受、理解、表现及创造音乐有着重要的作用。但传统的识谱教学往往显得枯燥,学生不爱学,有畏难情绪。本文试图通过探索,让识谱教学在丰富、生动的音乐实践活动中进行,从而调动学生的识谱兴趣、切实提高学生的识谱能力。
简介:【摘要】“如何在音乐课堂教学中引导学生学会识谱,提高学生的识谱能力”是每个音乐教师面临的难题。新课程明确提出了识谱教学要在丰富、生动、具体的音乐实践活动中进行的理念,为此,本文从创设情境、游戏、节奏练习、先唱歌后识谱、运用肢体语言识谱、让唱谱成为常态等方面,阐述了提高学生识谱能力的方法。