简介:摘要目的构造乙脑病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)/寨卡病毒(Zika virus, ZIKV)嵌合株JEV/ZIKV包膜蛋白D393E突变的病毒感染性克隆并进行突变株的拯救,探讨D393E突变对病毒小鼠脑内神经毒力的影响情况。方法利用分子克隆和重叠延伸PCR技术构造含D393E突变的嵌合病毒质粒,并用线性化处理后的质粒片段进行转录,取得病毒RNA,电转染入细胞,获得突变株。用突变病毒、源病毒分别感染细胞和小鼠,对比两种病毒的复制效率、蚀斑特点以及脑内神经毒力差异。结果酶切结果证实:突变株JEV/ZIKV (D393E)感染性克隆成功地构建。病毒蚀斑实验:JEV/ZIKV (D393E)的蚀斑直径为0.7±0.2 mm,JEV/ZIKV蚀斑直径为1.3±0.2 mm。病毒小鼠脑内毒力检测:JEV/ZIKV (D393E)的LD50为31.51PFU,JEV/ZIKV的LD50为2.21PFU。结论ZIKV D393E突变使嵌合病毒对小鼠的脑内神经毒力减弱。
简介:摘要目的建立一种实时荧光逆转录重组酶介导的等温扩增(reverse transcription recombinase-aided amplification,RT-RAA)技术检测寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)的方法,以实现ZIKV的现场快速筛查及诊断。方法通过基因组序列比对,选择ZIKV保守序列设计RT-RAA特异性引物和探针,并用系列稀释的ZIKV重组质粒与毒株核酸验证方法的灵敏性与重复性,通过检测登革病毒、基孔肯雅病毒、西尼罗病毒等其他虫媒病毒验证方法的特异性。结果建立的RT-RAA方法可在39 ℃恒温条件下30 min内对ZIKV进行高效扩增,检测系列稀释的ZIKV重组质粒,其95%检测限可达到15拷贝/反应,特异性强,与登革病毒、基孔肯雅病毒、西尼罗病毒虫媒病毒无交叉反应,且重复性好。结论本研究建立的ZIKV的RT-RAA等温扩增方法,具有反应迅速,无需精密仪器,操作简单等优点,适合于应急快速检测。
简介:摘要目的结合微流控与荧光定量RT-PCR技术建立寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)、登革病毒(dengue virus,DENV)、黄热病毒(yellow fever virus,YFV)和基孔肯雅病毒(chikungunya virus,CHIKV)的快速核酸检测方法,以实现这4种病毒感染的快速诊断。方法以ZIKV的NS1基因、DENV和YFV的NS5基因以及CHIKV的E1基因作为靶序列设计4组特异性引物探针;用体外转录RNA评价方法的灵敏性;用其他病毒核酸评价方法的特异性;ZIKV、YFV、CHIKV检测方法采用模拟阳性样本,DENV检测方法采用临床患者标本进行验证,并与传统荧光定量RT-PCR检测方法进行比较。结果ZIKV、DENV、YFV、CHIKV4种方法的最低检出限分别是14.57拷贝/μl、94.27拷贝/μl、8.25拷贝/μl、223.19拷贝/μl;4种检测方法与其他病毒核酸无交叉反应;ZIKV、YFV、CHIKV模拟阳性样本检出率为100%,各浓度检测Ct值的变异系数均在2%左右;20份DENV临床患者标本检出率为100%,与传统荧光定量RT-PCR检测方法结果一致。结论本研究建立的ZIKV、DENV、YFV、CHIKV微流控荧光定量RT-PCR检测方法具有良好的灵敏性、特异性、稳定性,25 min内即可完成1次检测,可适用于现场实验室检测与早期诊断。
简介:摘要:万家寨水利枢纽工程控制着黄河流域面积 1224km2。这是黄河上的区域车站。根据黄河及上游水文站实测的历史洪水资料,分析了黄河的演变规律,探讨了黄河流域局部暴雨洪涝特征及黄河洪水预报模型,制定了西乡县防洪规划,为西乡县洪水管理工作提供了科学依据。
简介:摘要:虚拟健康卡 (即电子健康卡 )是基于电子健康档案、电子病历和三级信息平台,实现跨机构、跨地域信息互通共享以及开展医疗协同服务所必须依托的个人信息基础载体。本文基于国家居民健康卡整体技术架构,以无锡市第三人民医院居民健康卡注册管理系统为载体,介绍电子健康卡的生成与管理。
简介:摘要:随着气藏压力的降低,气井返排能力减弱,压裂效果变差。在气藏低压低渗的现状下,如何开展有效的压裂措施,提高压裂后产量,成为气藏开发的关键。利用灰色关联法分析气藏压裂效果影响因素,比较这些因素影响压裂效果的程度大小,从而确定影响压裂效果的主要因素,对改善压裂开发效果和提高单井产量具有重要意义。
简介:【摘要】目的:探究妇产科中布比卡因、利多卡因、芬太尼联合镇痛的应用价值。方法:选择 2018年 1月 -2019年 12月来我院接受治疗的 200例妇产科患者,随机将其分为实验组和对照组,每组各 100例。其中实验组给予布比卡因、利多卡因、芬太尼联合镇痛;对照组给予芬太尼镇痛。对比两组患者的镇痛起效时间、镇痛持续时间,治疗前后疼痛状况以及用药不良反应。结果:( 1)实验组患者的镇痛起效时间及持续时间均优于对照组,且差异存在统计学意义( P< 0.05)。( 2)治疗后实验组患者的 VAS评分明显低于对照组,且差异存在统计学意义( P< 0.05)。( 3)实验组的不良反应发生率为 7%,稍低于对照组的 10%,但两组无明显差异( P> 0.05)。结论:妇产科中应用布比卡因、利多卡因、芬太尼联合镇痛效果显著,可以明显改善患者的疼痛情况,而且药物镇痛起效时间短、镇痛持续时间长。
简介:摘要:本文以无锡市第三人民医院基于居民电子健康卡注册管理系统为载体,通过电子健康卡的应用与管理,在医疗服务活动中进行身份识别并对电子健康档案、电子病历信息进行整合利用,实现基于窗口、终端、移动诊疗平台的完整就医流程。