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  • 简介:目的了解我院MRSA的流行状况。方法收集2005年1—6月65株社区感染MRSA及60株医院感染MRSA,应用多重PCR对MRSA染色体Dlec基因盒(staphylococcalcassettechromosomeSCCmec)分型及杀白细胞毒素(PVI。)基因检测,应用K—B纸片法进行药敏分析。结果125株MRSA的mecA基因阳性,其中SCCmecII型1株,SCCmecⅢ型120株,SCCmecⅣ型3株,未分型1株;未发现携带PVL基因的MRSA。携带SCCmecII型、SCCmecⅢ型的菌株均为多重耐药株,而携带SCCmecⅣ型的菌株除对8内酰胺类药物耐药外,对其他类别的抗菌药敏感。结论本院分离的MRSA以SCCmecⅢ型为主,发现SCCmecIV型CA-MRSA,但不携带PVL基因;携带SCCmecⅡ、SCCmecⅢ的临床分离株耐药严重。

  • 标签: 社区获得耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 杀白细胞毒素 葡萄球菌染色体mec基因盒
  • 简介:摘要:食品安全是一个越来越引起人们重视的问题,不仅影响到人们的生活、工作和健康,更是关系到国计民生的大事。在各种食物中毒中,细菌性食物中毒是食物中毒的主要因素。多重 PCR是通过在同一个 PCR反应体系中,引用多对引物,同时完成多个特异性目的基因片段的扩增方法,具有高效、系统、经济简易的优点。本文对多重 PCR技术在食品病原细菌检测中的应用进展进行了综述。

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  • 简介:  摘 要:近年来,人们在日常生活中经常会遇到食品卫生安全问题,各种食品安全事故频发,受到社会各界的广泛关注,在此环境下,国家不断加大对食品卫生安全问题的检查与惩处力度,其中多重 PCR检测技术得到比较广泛的应用实践,并取得良好的效果。基于此,本文以 PCR检测技术的含义与优势特点为切入点,对多重 PCR检测技术在食品微生物检测中的应用价值进行了细致分析,旨在为我国食品安全检测工作贡献一份力量。    关键词:多重 PCR检测技术 ;食品卫生安全 ;微生物检测     Abstract: in recent years, people often encounter food safety problems in their daily life, and various food safety accidents happen frequently, which are widely concerned by all walks of life. In this environment, the state continues to increase the inspection and punishment of food safety problems, in which multiple PCR detection technology has been widely used and achieved good results. Based on this, this paper takes the meaning and advantages of PCR detection technology as the starting point, and analyzes the application value of multiple PCR detection technology in food microbe detection in detail, in order to contribute to the work of food safety detection in China.

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  • 简介:摘要:目的:探讨常见肠道致病菌多重PCR检测的效果。方法:对常见的肠道致病菌(大肠杆菌、普通变形杆菌、副溶血性弧菌、单核细胞增生李斯特菌)通过运用PCR来进行检测,从而来对常见肠道致病菌多重PCR检测的效果进行分析。结果:多重PCR检测在常见肠道致病菌中的应用,不仅可以使致病菌目的基因片段不断扩增,而且还具备强大的特异性,能够有效的检测并且接种三个细菌。结论:对于常见肠道致病菌中,运用多重PCR检测技术能够使大肠杆菌、普通变形杆菌、副溶血性弧菌、单核细胞增生李斯特菌4种肠道致病菌进行快速、准确的检测,效果也是非常明显,在临床检测中非常值得推广与应用。

  • 标签: 常见肠道致病菌 多重PCR 检测效果
  • 简介:目的建立检测常见丝状真菌感染病原菌的PCR-RFLP和多重PCR方法。方法建立以PCR技术为基础的限制片段长度多态性(RFLP)方法,首先用真菌通用引物扩增丝状真菌的ITS区,然后用限制性核酸内切酶对PCR产物进行酶切。用4种丝状真菌的特异性引物建立多重PCR体系,用该体系检测单模板、双模板和三模板的扩增情况,并测定该体系的特异性和敏感性。结果用PCR-RFLP技术能够鉴别5种常见丝状真菌,多重PCR能够根据扩增片段的不同鉴别菌种,在合适的反应条件下,对单模板、双模板和三模板均能扩增出目的片段。结论PCR-RFLP和多重PCR技术能够快速鉴定丝状真菌感染病原菌,有临床应用的良好前景。

  • 标签: 丝状真菌 PCR-RFLP 多重PCR 分子鉴定
  • 简介:目的:研究膀胱肿瘤尿路脱落细胞的微卫星状态及其临床病理关系。方法:35例膀胱肿瘤尿液脱落细胞应用多重荧光PCR检测尿路的微卫星状态。结果:35例尿液样本:膀胱肿瘤组15例,有6例MSI-H,8例MSI-L,1例MSS,诊断阳性敏感度达93.33%;膀胱癌术后复查组6例,血尿及尿路上皮轻度异型组7例,正常体检组7例中,在血尿及轻度异型组发现1例MSI-L,其余均为MSS,阴性特异率达95%。结论:尿路脱落细胞的微卫星检测可作为膀胱肿瘤诊断和监测复发的有效非侵袭性检测方法。

  • 标签: 尿路脱落细胞 微卫星不稳定 多重荧光PCR
  • 简介:目的快速准确地检测副溶血性弧菌(VP)和伤寒沙门氏菌(ST).方法:根据VP的tdh基因和ST的H1-d基因顺序设计二对引物,通过聚合酶链反应检测食品或其它待检样品中的VP和ST,将扩增产物电泳.结果:分别出现与已知阳性对照细菌条带大小一致的202和458bp的tdh和H1-d基因片断的条带,判定该样品中相应细菌为阳性.结论:本法特异性强、灵敏度高,能在24小时内出结果,可适用于食品或其它样品中VP和ST的快速检验.

  • 标签: 副溶血性弧菌 伤寒沙门氏菌 聚合酶链反应
  • 简介:摘要:本文使用多重PCR对食源性致病菌进行快速检测,通过实验分析了食源性致病菌的检测效果。多重PCR在食源性致病菌检测中的运用包括敏感性结果分析和特异性结果分析。敏感性结果分析可以评估PCR方法对目标致病菌的检测能力,通常通过使用不同浓度的菌株DNA来进行实验,并根据PCR反应结果确定其敏感性范围。特异性结果分析则用于评估引物的特异性,通过阳性和阴性对照样品的PCR结果来确定引物对目标致病菌序列的特异性。

  • 标签: 多重PCR 食源性致病菌 快速检测
  • 简介:目的传统的方法分离培养军团菌,时间长,价格贵,培养较困难,本文建立多重PCR方法,快速检测空调冷却塔水中军团菌属和嗜肺军团菌种。方法利用军团菌属保守基因片段16SrRNA和嗜肺军团型菌巨噬细胞感染增强因子(mip)基因序列的特异性引物,对空调冷却塔水样中分离的疑似军团菌株进行特异性扩增,并且为了增强敏感性,运用递减温度PCR扩增。结果:PCR扩增的阳性结果与生化培养和血清学鉴定为军团菌的菌株结果—致。结论:与传统的分离培养方法相比,多重PCR方法检测军团菌,快速敏感,成本低,具有较好的特异性。

  • 标签: 军团菌 检测 多聚酶链反应(PCR) PCR快速检测 冷却塔 空调
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  • 简介:本研究探讨了多重PCR技术在SARS病毒检测中的应用.根据香港中文大学在GenBank上公开发表的SARS病毒基因组cDNA序列,人工合成克隆特异性靶基因DNA片段,以此片段作为阳性样品,根据世界卫生组织推荐的进行单PCR多重PCR检测分析.以单PCR法获得了121bp、182bp及302bp的靶基因片段3条;以二重PCR法获得了121bp+182bp、121bp+302bp与182b+302bp的靶基因片段组合;以二重PCR法获得了121bp+182bp+302bp的靶基因片段组合.结果表明:多重PCR技术可成功应用于SARS病毒的检测.

  • 标签: SARS病毒 多重PCR检测 CDNA序列 特异性靶基因 非典型肺炎
  • 简介:摘要目的探究多重PCR检测用于小儿肺炎细菌性病原检验中的效果。方法选取我院在2017年7月至2018年7月收治的160例肺炎患儿进行研究,选取的患儿均进行多重PCR检测检测其呼吸道的分泌物,统计患儿肺炎细菌性病原的特异性和敏感性,同时与细菌培养的阳性率进行对比。结果多重PCR检测的阳性率明显低于细菌培养(P<0.05);多重PCR检测对各种不同细菌的特异性和敏感性明显高于细菌培养(P<0.05)。结论根据本文研究结果显示,多重PCR检测对小儿肺炎细菌性病原的特异性和敏感性较高,对肺炎的检出率较高,值得在临床上进一步采用和推广。

  • 标签: 小儿肺炎 多重PCR 细菌性病原 检测
  • 简介:摘要:由于多重PCR技术是一种现代化新型技术手段合理运用的全新产物,能够被广泛地应用到各个领域当中,更是极大层面上地为之后病原微生物检测的应用效能以及优势体现,提供了更为完善的基础引导以及帮助,减少了在日常生活中一些不合理问题出现的可能性。基于此,本文更是从多重PCR技术、多重PCR技术在病原微生物检测中的价值、多重PCR技术在病原微生物检测中的应用方法研究,三个角度展开了更为深入的研究以及分析,主要也是为了能够带动之后相关技术手段的有效与全面发展。

  • 标签: 多重PCR技术 病原微生物检测 应用进展
  • 简介:摘要目的开发一次试验即可明确是否有肺炎支原体感染及所感染的肺炎支原体是否耐药的检测试剂。材料与方法本试剂盒以PAGE纯化的引物、HPLC纯化的Taqman水解探针以及基因工程表达的热启动Taq酶作为主要扩增体系组分。结果初步的临床实验结果证明,该试剂组分对痰液样本内肺炎支原体的检测灵敏度是94.93%,特异度是97.17%。结论该试剂相关性能达到了国内临床诊断试剂所要求的主要性能指标。

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  • 简介:摘要目的建立一种快速诊断MRSA菌及细菌毒力评估的新方法。方法根据金黄色葡萄球菌上述基因序列设计引物,采用多重PCR法扩增20株金黄色葡萄球菌,2%琼脂糖凝胶电泳分析产物,确认细菌携带基因。结果多重PCR法结果中,spa基因扩增产物大小为170bp×n,mecA基因扩增产物大小为162bp,pvl基因扩增产物大小为80bp。结论多重PCR法可以快速检测金黄金葡萄球菌spa基因、mecA基因和pvl基因,可以用快速诊断MRSA菌和评估细菌毒力。

  • 标签: 金黄色葡萄球菌 多重PCR spa mecA pvl
  • 简介:[目的]全球转基因植物及其产品的数量和种类越来越多,迫切需要可同时精准高效检测多个转化载体的检测方法。[方法]针对RF1、MS8、Topas19/2、Oxy235和RF3等5个转基因油菜品系的侧翼序列及油菜内源基因cruciferinA(CruA)序列设计多重聚合酶链式反应特异性引物,通过对转基因油菜、转基因大豆、转基因玉米、转基因水稻、转基因棉花等不同作物进行PCR扩增来测试所选择的引物特异性,优化多重PCR反应引物的浓度,用所建立的检测体系对不同混合比例的转基因油菜进行多重PCR扩增来测试所建立的检测方法的灵敏度。[结果]通过测试,仅在含有目标样品中检测出阳性结果,灵敏度达0.05%,表明所建立的6重PCR检测方法可同时精准检测RF1、MS8、Topas19/2、Oxy235和RF3等5种转基因油菜转化载体。[结论]所建立的6重转基因油菜转化体特异性PCR检测方法通量高、特异性好、灵敏度高,符合有关转基因产品检测的要求,可作为转基因油菜检测的有效方法。

  • 标签: 多重PCR 转基因油菜 转化载体特异性
  • 简介:摘要:随着科学技术的进步和发展,我国病原微生物检测领域也取得了显著的成果,尤其是多重PCR技术的应用,大大提高了病原微生物检测的效率,节省了人力、物力。本文主要阐释了多重PCR技术的概念原理以及在病原微生物检测中的实际运用等问题,希望给相关的病原体微生物检测领域人员提供一定的借鉴价值。

  • 标签: 多重PCR技术 病原体微生物检测
  • 简介:【摘要】目的:分析微流控多重PCR芯片快速监测多种重要病原菌的方法。方法:选取我院2021年5月至2022年6月收治的患者200例,采集标本,选择微流控多重PCR芯片技术开展临床微生物检测,对检测结果进行观察分析。结果:本次共收集粪便标本120例,分别检出41株沙门菌,25株副溶血性弧菌,11株肠出血性大肠杆菌O157:H7,检出率分别为34.17%、20.83%、9.17%。本次共收集脓液标本80例,分别检出15株金黄色葡萄球菌,11株化脓性链球菌,检出率分别为18.75%、13.75%。微流控多重PCR芯片快速检测技术的特异性、敏感度较好。结论:在对多种重要病原菌进行检测时,采用微流控多重PCR芯片快速检测能进行精确定量,具有较高的特异性和敏感度,值得推广。

  • 标签: 微流控 多重PCR 芯片 快速监测 病原菌