简介:摘要:21世纪是生物的世纪,生物工程是分子遗传学、微生物学、细胞生物学、生物化学等各学科的结合,基因工程是生物工程的灵魂、核心。基因工程(英语:Genetic engineering)又称基因拼接技术和DNA重组技术,它是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术,是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。基因工程具有广泛性、可复制性,可以把来自不同生物的基因同有自主复制能力的载体DNA在体外人工连接,构成新的重组的DNA,然后送到受体生物中去表达,从而产生遗传物质的转移和重新组合。基因工程在医学上已得到广泛应用,其应用领域不断被拓宽,基因工程与我们的生命、生活息息相关。
简介:摘要:“基因工程”是生物技术的核心内容之一,是生命科学领域的一门重要的专业课。在日常教学中,该课程存在课时有限,教学效率有待提高。本文通过将番茄钟教学法引入课堂教学,激发学生积极性,从而达到提高课堂效率的目的。本文着重探讨了将番茄钟教学法运用到《基因工程》教学课堂中的设计与实施,有望为相关课程教学改革提供借鉴。
简介:摘要:基因工程近些年来一直都属于生物学科之中的热门研究领域,在研究者不懈的努力下,基因工程可谓硕果累累、前景可观。高中生物教材里的基因工程专题内容也同时引入了一些前沿研究成果,新技术、新概念的介绍很多,使广大师生倍感兴奋。
简介:摘要目的构建人降钙素原(hPCT)原核表达载体,低成本、快速、高浓度、高纯度获取hPCT纯化蛋白,为临床实验室检测制备质控品和参考物质奠定基础。方法将GenBank提供的hPCT编码序列经大肠杆菌密码子优化后,人工合成DNA片段克隆至pET-28a(+)原核表达载体以构建重组hPCT表达质粒。转化至大肠杆菌E. coli BL21感受态中,优化诱导表达条件、诱导质粒表达并对重组蛋白进行His融合标签纯化。结果成功构建重组hPCT原核表达质粒,优化异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达浓度及诱导温度,最适IPTG浓度为0.2 mmol/L,最佳诱导温度为37 ℃。纯化后hPCT蛋白可通过临床检测,且稀释倍数与检测浓度间呈现良好线性关系,回归方程为y=-0.0085x+112.63,R2值为0.9975。结论成功构建重组hPCT的高效表达系统,重组hPCT蛋白纯度大、浓度高、生产周期短,有成为候选室间质量评价参考物质的潜力。
简介:摘要目的探讨和比较人CD55(hCD55)转基因猪外周血单个核细胞(PBMC)表面表达的hCD55对兔补体和人补体依赖的细胞毒(CDC)的抑制效果。方法选择来自同一品系的3头α1,3-半乳糖转移酶基因敲除猪(GTKO)。其中两头猪转入了hCD55基因。根据三头猪PBMC表面hCD55表达水平,分为GTKO、hCD55低表达(GTKO/hCD55Low)和hCD55高表达(GTKO/hCD55High)猪。将3头猪的PBMC分别与灭活补体的混合人血清(20例份)孵育后,流式细胞仪检测兔补体或人补体依赖的细胞毒以及猪PBMC的抗体(IgM和IgG)结合水平。结果3头猪PBMC与人血清异种抗体的结合无明显差异。兔补体和人补体对GTKO猪PBMC的细胞毒均较高,分别为98.97%±0.50%和82.73%±3.20%。与GTKO组相比,低表达hCD55对兔补体依赖的细胞毒无明显抑制作用97.07%±2.25%比98.9%±0.50%,P=0.2267),而高表达hCD55对兔补体依赖的细胞毒有轻度的抑制作用(81.70%±5.86%比98.9%±0.50%,P=0.0355)。不同的是,低表达hCD55对人补体依赖的细胞毒有显著的抑制作用(23.83%±3.53%比82.73%±3.20%,P<0.0001);高表达hCD55对人补体依赖的细胞毒较低表达hCD55有进一步抑制作用(2.79%±0.45%比82.73%±3.20%,P=0.009),使之达到阴性对照组水平。低表达或高表达hCD55对人补体介导CDC的抑制作用均优于对兔补体介导CDC的抑制作用。结论相较于传统使用兔补体的CDC技术,使用商品化标准人补体的CDC技术评价GTKO/hCD55基因工程猪细胞表面hCD55对受者补体激活的调节作用具有明显优势。本研究对在异种移植走向临床后,建立能有效评估hCD55功能的CDC实验体系提供了实验依据。
简介:摘要:为了了解且末县羊棘球蚴(包虫)病基因工程亚单位疫苗的免疫效果,本研究对新疆巴州且末县4个牧区乡镇某羊场的试验组和对照组(不免)的200只肉羊通过免疫应激反应观察,羊棘球蚴抗体 ELISA 检测,病原学剖检的方法进行疫苗安全评估和免疫效果评估。试验结果显示:①疫苗安全评估显示:试验组在第一次注射疫苗后,有7只羊具有一般副反应,第二次注射疫苗,只有2只肉羊表现为一般副反应;②疫苗免疫效果评价显示:试验组第30天,第二次免疫15天,第280天,转阳性率分别为84.5%,97.5%,95.5%。对照组第30天,第45天,第280天感染抗体阳性率分别为0.5%,0.75%,11%;③病原学剖检结果显示:发现试验组有2只羊的脏器有棘球蚴包囊,感染率为1%;对照组有21只羊的脏器发现棘球蚴包囊,感染率为10.5%。
简介:摘 要:目的 探究共享快递包装的设计准则,达到快递运输安全性和绿色环保性的目标。方法 以国内外快递包装的发展现状存在的问题进行分析,解决共享快递亟待解决的问题。结果 设计出共享快递的流程模型和包装箱,基于人机工程学方面进行改良,实现了快递包裹的可持续和绿色环保的理念。结论 通过研究和分析得出共享快递流程模型和包装设计,同时兼顾快递运输安全性和绿色环保性,符合快递行业未来的发展趋势和潮流。