简介：

简介：中职学校开设很多专业,文言文教学要结合学生特点和专业要求进行分层次分专业教学,只有这样才能使中职的文言文教学取得最大效果.

简介：流行性感冒的所有已知的子类型A病毒在野水鸟被维持，这些病毒的自然水库。流行性感冒A病毒被孤立从许多有改变病态和死亡率的动物种类。更重要地，流行性感冒A病毒与潜在地致命的结果在人引起呼吸疾病。在人的本地或全球的爆发被过量住院和死亡典型地描绘。在1997，H5N1子类型的高度病原的鸟的流行性感冒病毒在传给人的香港出现了，导致由鸟的流行性感冒病毒感染的人的死亡的首先记录的盒子。在越南，印度尼西亚，和泰国在家禽在2003年7月开始的新爆发，和高度病原的鸟的H5N1流行性感冒病毒后来在整个亚洲并且进欧洲和非洲传播了。这些病毒继续与高死亡率感染人并且引起隐约可见的世界范围的担心流行。而且，H5N1病毒爆发在整个亚洲在家禽工业上有破坏效果。因为H5N1病毒爆发看起来从南部的中国发源，我们这里在中国检验H5N1流行性感冒病毒，与他们的生物性质上的一个重音。

简介：以pBRTM/HCV-3011模板,通过PCR法扩增ns5a、LISDR(左端序列)和RISDR(右端序列),分别经XhoⅠ/EcoRⅠ、XhoⅠ/HindⅢ和EcoRⅠ/HindⅢ双酶切,连入穿梭质粒pEGFP-N3中,构建重组质粒pEGFP-N3-ns5a和pEGFP-N3-ns5a-△ISDR.对重组质粒进行酶切分析和序列测定.将这2种重组质粒通过电穿孔法转染HeLa细胞,然后在G418选择压力下进行有限稀释法筛选,用RT-PCR和荧光显微镜鉴定.经酶切鉴定和基因测序证实,重组穿梭质粒已插入目的片段ns5a、LISDR和RISDR.RT-PCR和荧光显微镜检测到目的基因的表达.以上结果说明成功构建了真核表达载体pEGFP-N3-ns5a和pEGFP-N3-ns5a-△ISDR,目的基因在HeLa细胞中得到表达,为研究HCVNS5A中是否存在抗干扰素治疗的功能蛋白提供了实验材料.

简介：Thesurfaceglycoproteinhemagglutinin(HA)helpstheinfluenzaAvirustoevadethehostimmunesystembyantigenicvariationandisamajordrivingforceforviralevolution.Inthisstudy,theselectionpressureonHAofH5N1influenzaAviruswasanalyzedusingbioinformaticsalgorithms.Mostoftheidentifiedpositiveselection(PS)siteswerefoundtobewithinoradjacenttoepitopesites.SomeoftheidentifiedPSsitesareconsistentwithpreviousexperimentalstudies,providingfurthersupporttothebiologicalsignificanceofourfindings.ThehighestfrequencyofPSsiteswasobservedinrecentstrainsisolatedduring2005–2007.PhylogeneticanalysiswasalsoconductedonHAsequencesfromvarioushosts.Viraldriftisalmostsimilarinbothavianandhumanspecieswithaprogressivetrendovertheyears.OurstudyreportsnewmutationsinfunctionalregionsofHAthatmightprovidemarkersforvaccinedesignorcanbeusedtopredictisolatesofpandemicpotential.

简介：目的：分析结肠癌患者贫血与其肿瘤大体分型及临床病理分期的关系.方法：选取我院最近几年收治的结肠癌患者100例,按是否贫血分为贫血组及非贫血组,比较两组患者不同大体分型及临床病理分期的血常规与铁代谢指标.结果：非浸润型的红细胞、血红蛋白、血清铁和铁蛋白水平均明显高于浸润型（p〈0.05）.A、B期的红细胞、血红蛋白、血清铁和铁蛋白水平均明显高于C、D期（p〈0.05）.结论：结肠癌患者贫血与肿瘤大体分型及临床病理分期存在一定的关联,值得临床医务人员的重视.

简介：目的：了解皮肤性病患者不同病变类型中的HPV感染型别。方法：选择2014年6月~2015年6月我科门诊就诊者368例,分为4个组别：尖锐湿疣患者组242例,鲍温样丘疹病患者18例,男性冠状沟珍珠疹和女性假性湿疣70例,未见任何皮疹且醋酸白试验阴性的体检者38例。采用PCR-反向点杂交法检测皮损或外阴局部HPV-DNA亚型,并用SPSS11.0软件进行统计学分析。结果：（1）HPV-DNA的总检出率为72.9%,其中单一型别感染率57.1%,多重感染率15.8%;（2）268例HPV阳性标本中,高危型感染占51.9%,低危型和混合型的阳性率分别为33.2%、14.9%;（3）尖锐湿疣组和鲍温样丘疹病患者组HPV-DNA的阳性率分别为97.9%、88.9%,而男性珍珠疹和女性假性湿疣组以及要求体检人群的阳性率分别为14.3%和13.2%;从感染型别分析,尖锐湿疣主要是6、11、16、18、31、33、35、43和66亚型,鲍温样丘疹病患者主要是16亚型,男性珍珠疹和女性假性湿疣以及要求体检人群的感染型别主要是低危型感染,分别是6、42、43、81和6、42、83;（4）在被检测的18个高危HPV亚型中,最常见类型依次为HPVl6、18、58、56、33、52、68、31、39,未检测出HPV35、45、51、53、59、66、73和82亚型;在被检测的5个低危HPV-DNA亚型中依次为HPV6、11、42和43,未检测出81亚型。结论：HPV感染以单一型别感染为主,且以高危型为主,应该重视临床HPV感染亚型的检测,尤其是高危型HPV感染者的随访管理。

简介：

简介：根据我国流行的2型肾综合征出血热病毒（HFRSV）代表毒株汉滩型（HTNV）76-118株和汉城型（SEOV）R22株M节段的核苷酸序列,设计2型共同引物,建立了逆转录-聚合酶链反

简介：美国能源部阿贡国家实验室研究人员表示，通过与中国和新加坡的同行开展合作，他们成功获得了H5N1禽流感病毒中最重要的一种蛋白的晶体和特征结构，并发现如能阻断该蛋白中的两种亚单元的结合，将有望找到对付流感病毒的新药或疫苗。

简介：[目的]观察禽流感H5N1型病毒对沙鼠的致病性;[方法]在生物安全三级实验室,将禽流感H5N1型病毒通过滴鼻接种乙醚麻醉后沙鼠,观察14天,记录沙鼠的体温体重、临床症状、病理变化、病毒分离及抗体变化;[结果]沙鼠感染后发病主要表现在第2天至第6天,攻毒组沙鼠出现反应迟钝、皱毛、弓背、食欲下降、呼吸急促、打堆等症状,攻毒组沙鼠的体温降低和体重减轻,死亡率为44%,在第8天检出抗体,主要病理变化表现为肺出现严重淤血、水肿、出血,镜下可见肺间质充血,血管周围炎性细胞浸润,肝和胸腺淤血,肾出血,肾小管变形。

简介：目的观察H5N1型禽流感病毒对中国非人灵长类动物的易感性并建立动物模型.方法将病毒通过滴鼻接种实验猴,观察感染后动物的临床症状,采血、咽拭子及各器官组织进行血清学、病原学及病理学检查,记录抗体变化、病毒分离情况及病理学改变.结果感染后动物表现轻度食欲下降、一过性体温升高及外周血白细胞减少,肺组织病毒分离及RT-PCR阳性,病理检查感染急性期动物肺组织表现为间质性肺炎,肺泡间隔增宽,充血出血明显,肺泡受压变形,间质及肺泡内有大量炎细胞浸润,符合病毒性肺炎的改变,感染后14d动物血清IgG抗体水平较感染前升高4倍.结论H5N1病毒可感染非人灵长类动物,可以作为感染模型进行H5N1病毒的发病机制、疫苗评价、药物筛选等研究.

简介：为了研究禽流感H5N1病毒在各个器官的增殖和病理变化,在生物安全实验室,我们将禽流感H5N1病毒通过尾静脉接种BALB/C小鼠。结果小鼠在不经过适应的情况下,直接感染发病,甚至死亡。在观察的7天内,感染小鼠临床症状主要表现呼吸急促,体温、体重下降。尸检表现肺出血,心外膜坏死以及肝脏的坏死。组织病理检查表现心、肝、肺等多器官的病变。肺的病变伴有纤维化的弥漫性肺泡损伤;心肌外膜大量淋巴细胞浸润、坏死;肝细胞大量坏死,淋巴细胞浸润。心、肝的坏死病变在H5N1禽流感病毒相关的研究中未见报道。经过对各个组织器官的病毒载量的检测,未发现病毒在各个病变组织中的复制。免疫组化的检测,各个组织中也未检出阳性的细胞反应。因此,我们认为H5N1禽流感病毒感染小鼠引起多个器官组织的损伤,甚至死亡,不是病毒在器官的复制,而可能是病毒感染小鼠,产生炎症细胞因子的高度表达,损伤多个器官组织所致。

简介：Thenon-classicalHLAclassIantigenHLA-GisanimmunemodulatorwhichinhibitsthefunctionsofTcells,NKcells,andtheDendriticcells(DC).Asaresult,HLA-Gexpressioninmalignantcellsmayprovidethemwithamechanismtoescapetheimmunesurveillance.Inmelanoma,HLA-Gantigenexpressionhasbeenfoundin30%ofsurgicallyremovedlesionsbutinlessthan1%ofestablishedcelllines.OnepossiblemechanismunderlyingthedifferentialHLAGexpressioninvivoandinvitroisthattheHLA-Ggeneisepigeneticallyrepressedinmelanomacellsinvitro.Totestthishypothesis,wetreatedtheHLA-GnegativemelanomacelllineOCM-1AwiththeDNAmethyltransferaseinhibitor5-aza-2'-deoxycytidine(5-AC)andanalyzedwhetherHLA-Gexpressioncanberestored.OurdatastronglysuggestthatHLA-GissilencedasaresultofCpGhypermethylationwithina5'regulatoryregionencompassing220bpupstreamofthestartcodon.Aftertreatment,HLA-GmRNAexpressionwasdramaticallyincreased.WesternblotandflowcytometryshowedthatHLA-Gproteinwasinduced.Interestingly,HLA-Gcellsurfaceexpressiononthe5-ACtreatedOCM-1AcellsismuchlessthanthatontheHLA-GpositiveJEG-3cellswhileasimilaramountoftotalHLA-Gwasobserved.Possiblemechanismsforthedifferencewereanalyzedinthestudysuchascellcold-treatment,peptideloadingandantigenprocessingmachinerycomponents(APM)aswellasβ2microglobulin(β2-m)expression.DatarevealedthattheAPMcomponentcalreticulinmightbeinvolvedinthelowerHLA-GsurfaceexpressiononOCM-1Acells.Takentogether,ourresultsindicatedthatDNAmethylationisanimportantepigeneticmechanismbywhichHLA-Gantigenexpressionismodulatedinmelanomacellsinvitro.Furthermore,tothefirsttime,wehypothesizedthatthedeficiencyofcalreticulinmightbeinvolvedinthelowHLA-Gsurfaceexpressiononthe5-ACtreatedOCM-lAcells.

简介：目的：应用重组杆状病毒表达系统制备由HA、NA、M1和M2蛋白组成的H5N1高致病性禽流感病毒样颗粒,为研究H5N1高致病性禽流感疫苗奠定基础。方法：构建能共表达A/chicken/Jilin/2003（H5N1）禽流感病毒血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）、A/PR/8/34（H1N1）流感病毒基质蛋白（M1）和离子通道蛋白（M2）的2个二元重组杆状病毒,共同感染HighFive细胞,同时表达HA、NA、M1和M2蛋白,使这4种蛋白在感染的细胞内自主组装成病毒样颗粒。经差速离心和蔗糖密度梯度超速离心收获病毒样颗粒,通过Western印迹鉴定病毒样颗粒的组成,透射电镜观察病毒样颗粒形态,血凝试验测定病毒样颗粒的活性。结果：HA、NA、M1、M2蛋白在昆虫细胞中共表达,并组装成病毒样颗粒;电镜观察到病毒样颗粒的形态与流感病毒一致,直径约80nm;血凝试验显示该病毒样颗粒具有凝集鸡红细胞的活性。结论：应用该方法可以制备流感病毒样颗粒,为H5N1流感疫苗研究提供了可行方案。

简介：目的比较了不同遗传背景小鼠对禽流感H5N1亚型病毒的致病敏感性,为H5N1禽流感模型制作和机理研究提供依据。方法近交系BALB/c、C57BL/6和封闭群ICR、NIHSwiss和KMSwiss共五个不同品系小鼠。每个品系实验动物30只,分接毒组20只,空白对照组10只,每组雌雄各半。病毒株为A/Goose/Guangdong/NH/2003（H5N1）,经测定TCID50为10-4.875/mL。接毒组通过鼻腔接种0.1mL病毒液,对照组接种正常鸡胚尿囊液。小鼠接毒后连续观察14d,观察记录临床症状、体温、体重变化,对在实验期间死亡和实验14d结束后仍然存活的小鼠均进行组织器官病理取材,进行RT-PCR病毒分离检测、HE染色及H5N1抗原特异性免疫组化染色。结果①临床症状：H5N1禽流感病毒能感染五个品系的小鼠,引起呼吸急促等症状和一过性体重、体温下降。②死亡情况：小鼠在接毒后第1天即出现死亡,死亡的高峰期集中在接毒后第3～6天。五个品系小鼠死亡率存在差异,BALB/c为70%,ICR为50%,NIHSwiss为40%,C57BL/6为25%,KMSwiss为10%;③病毒分离：各组接毒小鼠在死亡后均进行了病毒分离,死亡小鼠的肺脏均分离到病毒,其他脏器未分离到病毒。④病理变化：实验期间五个品系死亡小鼠肺脏病理改变相近。大体观：死亡小鼠肺部淤血,呈暗红色,体积增大,局部肺组织实变。镜下观：死亡小鼠的共同病理改变为间质性肺炎,具体表现为肺泡腔及间质出血、炎性细胞浸润;间质增生,肺泡隔增宽;肺泡腔中见纤维素性渗出,透明膜形成。⑤免疫组化结果：在死亡小鼠的气管上皮细胞和肺巨噬细胞可观察到H5N1禽流感病毒阳性表达。结论小鼠作为H5N1禽流感病毒模型具有普适性,不同品系小鼠感染鹅源H5N1禽流感病毒的临床症状、病程和病理变化与人禽流感病例相似。不同品系小鼠的死亡比例有明显差别,可以根据不同的实验目的,选择不同品系的小鼠制作H

简介：[目的]建立禽流感H5N1病毒感染恒河猴的动物模型,探讨禽流感在哺乳类动物的发病机制。[方法]通过“环甲膜穿刺术”经气管注射鸡胚培养的禽流感H5N1病毒(AF148678;ACGoose/Guangdong/11961H5N1)感染恒河猴,观察恒河猴染毒后出现的临床体征,用显微计数法检测外周血白细胞的动态变化,用ELISA检测禽流感病毒特异性抗体变化规律,用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞及其亚群的动态变化。在染毒后第1天、第3天、第10天和第14天分别剖杀染毒组恒河猴1只,HE染色观察主要组织器官的病理变化,用病毒分离、免疫组化和RT-PCR三种方法分析禽流感病毒侵袭机体的特点。[结果]临床症状和体征:急性起病,表现为发热,呼吸困难,精神状态下降,活动度明显减少,食欲下降,咳嗽,紫绀等,肺部听诊双肺可闻及干、湿音。1、病理特点:以肺部损伤为主,伴多器官病变。肺部的病变主要表现为弥漫性肺泡损伤,先后经历渗出期、增生期和纤维化期;在肝脏、肾脏和中枢神经系统中也观察到变性、坏死等病理变化。2、病毒侵袭机体的特点:病毒只在呼吸系统中复制,不在呼吸道以外的组织器官中复制;肺内支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞和肺巨噬细胞是...

简介：目的比较不同免疫状态的小鼠对禽流感病毒的易感性,并探讨可能的原因。方法四种免疫状态的小鼠,无菌BALB/c小鼠,SPF级BALB/c小鼠,SCID小鼠和nude小鼠,以10TCID50的禽流感病毒50μL感染小鼠,观察小鼠的体重变化,存活率,各组织脏器的病毒分布,肺组织的细胞因子变化和肺组织病理病变。结果四种小鼠均能感染禽流感病毒,其中,无菌小鼠对禽流感病毒H5N1的易感性最低,存活率最高。并且病毒在无菌鼠体内病毒的复制水平最低,细胞因子TNF-α,IL-12,MIP2,GATA3,IFN-a/β在感染后表达水平最低,其中第7天最低。结论无菌小鼠能感染禽流感病毒,但是相比较SPF级BALB/c小鼠,SCID小鼠和nude小鼠,其易感性最低,可能与病毒在组织内的低复制和细胞因子的低表达均有关。

简介：InFebruary2006,twooutbreaksofhighlypathogenicavianinfluenzaAvirussubtypeH5N1occurredinchickensintwoneighboringdistricts(firstinNandurbarandsecondinJalgaon)ofMaharashtra,India,inaspanof12days.Inthepresentstudy,theneuraminidase(NA)geneofthetwoIndianH5N1isolateswastakenintoconsiderationtofindifthetwostrainsaregeneticallysimilar.PhylogeneticanalysisoftheNAgeneshowedthattheH5N1strainsisolatedfromthetwooutbreakswerenotoriginatedfromthesamesource.ThefirstIndianisolate(Nandubar/7972/06)wasclusteredclosesttoanisolatefromchickeninVietnamin2004,whereasthesecondIndianisolate(Jalgaon/8824/06)showedresemblancetostrainsisolatedfromswaninItalyandIranin2006.Moreover,aminoacidsequenceanalysisshowedvaryinghotspotsforsubstitutionsbetweenthesetwoIndianisolates,andthreesubstitutionswerefoundatfunctionaldomainsites.Secondarystructurechangesduetothesesubstitutionswerealsoreported.ThisstudyrevealsthattheH5N1strainsisolatedfromchickensduring2006birdfluoutbreaksintwoneighboringdistrictsofMaharashtra,Indiaaregeneticallydifferent.

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