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15 个结果
  • 简介:目的研究阻断CD40-CD40L共刺激信号通路对移植皮肤免疫排斥反应的影响。方法通过RT-PCR技术克隆了呈可溶性表达的CD40L分子胞外区(sCD40L),利用K14启动子构建了sCD40L皮肤特异性表达载体,并利用该载体制备了转基因小鼠。结果所克隆的CD40L胞外区片段其大小及序列符合预期;以哺乳动物表达载体PCI为骨架,通过DNA重组,获得了含K14启动子和sCD40L编码区的皮肤特异性表达载体K14-sCD40L;通过显微注射和胚胎移植,PCR筛选检测:49只G0代小鼠有1只小鼠扩增出特异性条带,阴性对照无条带。结论成功建立sCD40L转基因阳性小鼠。

  • 标签: 转基因小鼠 SCD40L 共刺激信号通路
  • 简介:目的观察转APP基因AD模型小鼠视网膜各层细胞超微结构的改变。方法实验采用C57BL/6J转APP基因小鼠6只,采用同背景10个月龄的C57BL/6J正常小鼠6只做为对照。灌注处死小鼠,完整取出右眼球分离视网膜,制作电镜标本观察视网膜各层细胞超微结构改变。结果与对照组相比,模型组视网膜各层细胞异常明显:膜盘排列结构模糊,局部间隙溶解、甚至消失;外核层细胞体干枯变形,染色质聚集浓缩;内核层可见固缩细胞;神经节细胞胞膜不完整,线粒体水肿,并可见染色质聚集。结论转APP基因AD模型小鼠视网膜各层神经细胞超微结构存在明显病理改变。

  • 标签: APP转基因小鼠 阿尔兹海默病 电镜 视网膜神经细胞
  • 简介:目的:构建血清白蛋白(hSA)与小鼠乳清酸蛋白(mWAP)调控序列的杂合基因座。方法与结果:在pBR322载体上连入预先无痕连接的3对同源臂,利用基于Red同源重组系统的缺口修复(gap-repair)技术,分别对8kb的mWAP基因座3′调控区、16kb的hSA基因组编码序列及13kb的mWAP基因座5′调控区进行连续3次基因抓捕,最终将全长37kb的乳蛋白杂合基因座构入pBR322载体;通过PCR扩增、限制性内切酶消化和序列测定验证,确定mWAP基因座中的编码序列被精确地置换为hSA的基因组编码序列。结论:构建了整合有mWAP-hSA杂合基因座的pBR322载体,为研究杂合基因座在乳腺中的表达效果及置换型基因座表达的可行性提供了数据。

  • 标签: 小鼠乳清酸蛋白 人血清白蛋白 缺口修复 细菌人工染色体
  • 简介:目的:观察DcR3基因小干扰RNA(siRNA)对结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤DcR3基因表达的影响。方法:建立结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤模型,瘤体注射脂质体与DcR3siRNA混合物,转染DcR3siRNA,免疫组织化学及RT-PCR检测观察DcR3基因的表达。结果:建立了结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤模型;治疗后,治疗组移植瘤明显减小,空白对照组、阴性对照组肿瘤体积显著大于治疗组(P〈0.01);各组肿瘤组织中DcR3基因均有不同程度的表达,治疗组表达程度明显低于阴性对照组及空白对照组(RT-PCRP〈0.05,免疫组化P〈0.01)。结论:结肠癌SW480细胞在裸鼠皮下有良好的成瘤性;脂质体与DcR3siRNA混合物可特异性抑制结肠癌裸鼠皮下移植瘤内DcR3基因的表达。

  • 标签: 结肠癌 SW480细胞 DcR3基因 小干扰RNA 裸鼠 脂质体
  • 简介:目的探讨制作兔VX2肝癌模型的新技术、新方法。方法将新西兰兔30只随机等分为3组,分别为嵌插组、改良嵌插组和经皮穿剌组。分别按不同方法建立肝癌模型,于建模后第1、2、3周分别进行CT扫描,评估肿瘤大小。3周后处死动物进行解剖,观察肝脏成瘤及转移情况,比较各组转移率,并行常规病理组织学检查。结果30只动物建模成功28只,成功率93%,经皮穿剌组有2只肝脏未见种植灶,嵌插组和改良嵌插组全部种植成功。改良嵌插组腹壁转移率显著低于嵌插组和经皮接种组。结论改良嵌插法3周内不会形成接种部位腹壁以及远处的转移,是一种理想的移植性肝癌模型建模方法。

  • 标签: 兔VX2肿瘤 模型 嵌插改良技术
  • 简介:【背景】美洲斑潜蝇是一种严重威胁瓜果蔬菜、烟草、棉花等经济作物和花卉生产的入侵性害虫。由于潜叶蝇类害虫体型较小、生活方式隐蔽、形态相似,本文针对其难以快速准确地进行形态鉴别的问题,以美洲斑潜蝇为研究对象,以菜田常见的4种潜叶蝇类害虫为参照,采用种特异性PCR方法(species-specificPCR,SS-PCR),研究其快速分子检测鉴定技术。【方法】调用GenBank中一段936bp的美洲斑潜蝇线粒体DNA(mtDNA)细胞色素氧化酶亚基Ⅰ基因(COⅠ)的序列(Gen-Bank登录号为EU219613),并根据此基因片段的碱基序列设计引物1对,其扩增片段大小为294bp。【结果】种特异性检验结果显示,该引物只对美洲斑潜蝇的COⅠ基因具有扩增能力,对其他种类如南美斑潜蝇、三叶斑潜蝇、葱斑潜蝇、豌豆潜叶蝇等没有扩增能力。该引物不仅对成虫具有良好的扩增效果,对蛹、幼虫以及单粒卵也具有同样的扩增效果,其最低检出阈值为1/3840头成虫。【结论与意义】SS-PCR技术体系可用于美洲斑潜蝇的鉴定识别与检测监测,对阻止其进一步扩散蔓延具有重要意义。

  • 标签: 美洲斑潜蝇 线粒体DNA细胞色素氧化酶亚基Ⅰ基因 快速鉴定 种特异性引物 分子检测
  • 简介:超临界水氧化(SCWO)技术是近年发展起来的处理有机难溶废物的安全高效的新技术。本文介绍了超临界水氧化技术的基本原理、动力学研究,并对限制SCWO技术大规模产业化进程的材料腐蚀问题进行了分析,对我国的SCWO技术研究发展方向提出了建议。

  • 标签: 超临界水氧化技术 反应机理 废物处置 材料腐蚀
  • 简介:胜利油田地处黄河下游,原水水质微污染情况较为严重,通过在水源地开展微生物水质修复技术研究,探索原水水质修复技术

  • 标签: 微污染 微生物 菌种 水质修复
  • 简介:为探索近红外光谱技术在大豆氨基酸测试中的应用,寻找一种快速的检测方法,以167份大豆[Glycinemax(L.)Merr.]种子为材料,采用傅里叶变换近红外光谱技术(FT-NIRS)对经高效液相色谱法(HPLC)分析的18种氨基酸含量进行模拟。结果显示:天冬氨酸(R2CV=0.85)、谷氨酸(R2CV=0.86)、丝氨酸(R2CV=0.82)、甘氨酸(R2CV=0.89)、酪氨酸(R2CV=0.83)、苯丙氨酸(R2CV=0.78)、异亮氨酸(R2CV=0.86)和色氨酸(R2CV=0.81)及15种氨基酸总和(R2CV=0.82)可利用FT-NIRS准确预测;苏氨酸、精氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和胱氨酸检测模型有一定的参考价值,可用来进行相对含量的估测;而对组氨酸、赖氨酸、脯氨酸和蛋氨酸的预测不准确。本研究进一步证明,利用FT-NIRS技术预测大豆主要氨基酸组分是稳定可行的。

  • 标签: 近红外光谱技术 大豆 氨基酸 高效液相色谱技术
  • 简介:为推动我国各类、各级院校生理学及相关专业青年教师和博硕士研究生掌握生理学实验和研究技术,中国生理学会定于2012年8月16—22日在山东省青岛市举办“生理学实验和研究技术培训班”。此次会议由中国生理学会继续教育工作委员会主办、青岛大学承办。培训班将介绍电生理、电化学、分子生物学及动物行为学实验方法,并提供动手操作机会。

  • 标签: 中国生理学会 技术培训班 生理学实验 硕士研究生 动物行为学 分子生物学
  • 简介:基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术是一种可用于检测大分子物质的“软电离”质谱分析技术,近年来在致病性真菌研究中的作用日显突出,该文对近几年该技术在病原真菌研究中的应用进展作一综述。

  • 标签: 基质辅助激光解析电离 质谱 真菌
  • 简介:由中国生理学会主办、青海大学医学院承办、成都泰盟软件有限公司协办的“中国生理学会新型生理学实验技术平台实验室主任培训班”于2012年7月17-22日在青海大学医学院如期举办。来自全国各地40多个单位的80多名生理学教学与科研工作者参加了此次学习。培训班学习内容经过精心设计安排,主要分为两个阶段,第一阶段是理论课,内容非常丰富,培训班荣幸的邀请到了南京大学生命科学学院王建军教授和北京大学医学部管又飞教授前来授课,为提升培训班的层次和水平增添了靓丽的色彩,深受老师们的热烈欢迎。王建军教授的报告讲座:“下丘脑对前庭核和小脑运动控制的调节作用”,充分反映了我国生理学家在小脑研究方面的新进展,科学性强,条理清晰,深入浅出,深受代表们的热烈欢迎。管又飞教授的报告讲座:“前列腺素E2受体与血压调节”,将科研理论用通俗易懂的语言讲给大家,使非从事此项研究的人也一样能够听得很明白。

  • 标签: 中国生理学会 实验室主任 生理学实验 技术平台 培训班 科研工作者
  • 简介:由中国生理学会继续教育工作委员会主办、山东生理学会和青岛大学承办的2012年中国生理学会“生理学实验和研究技术培训班”于2012年8月16-22日在山东省青岛市青岛大学国家生理学重点(培育)学科举行。来自全国14所高等院校的34位学员参加了此次培训。此外,青岛大学医学院一些相关专业的教师、研究生和本科生也参加了此次培训。本次培训包括:在体伏安法技术、膜片钳技术、在体电生理技术、常用分子生物学技术、激光扫描共聚焦显微镜及流式细胞技术、动物行为学技术等,内容涵盖了电生理、电化学、分子生物学及细胞形态及功能学等多个领域。培训由理论授课和实验操作两部分组成。首先由青岛大学生理学科的部分老师根据自己的研究专长向学员们介绍了各种实验技术的应用范围、实验原理及相关技术参数,并结合自身的科研内容具体讲解了实验的操作流程。随后,学员们根据自己的兴趣爱好和科研需要,分别选择不同的实验技术进行了动手操作。经过几天紧张、充分的学习交流和实践,学员们对各种常用的生理学实验和研究技术有了一定的了解并能初步运用到自身的科学研究中。

  • 标签: 中国生理学会 技术培训班 生理学实验 激光扫描共聚焦显微镜 分子生物学技术 电生理技术
  • 简介:由中国生理学会循环生理专业委员会和四川泸州医学院联合主办的第二届“细胞膜片钳实验技术培训班”于2012年7月8日至13日在四川泸州医学院心血管医学研究所成功举办。来自全国28个医学院、研究所和医院等50多位学员参加了培训班。本次培训班聘请了国内外在细胞膜片钳实验研究领域的知名专家、教授授课,其中包括中国生理学会循环生理专业委员会主任委员曾晓荣教授、日本德岛大学井上勋教授以及东乐科技有限公司技术总监刘振伟博士,同时还有教学与实验经验丰富的培训人员指导学员亲自进行实验操作,体验实验过程,熟悉方法和步骤。本次培训班的主要内容包括:膜片钳技术在医学领域的应用和发展趋势;离子通道的分类、结构和功能;Axon膜片钳放大器基本原理及参数设置和应用;pClamp膜片钳数据采集分析软件的使用:FundamentalsofElectrophysiology;细胞的分离准备;微管电极的制作以及电流的记录等内容。本次培训包括三天的集中授课和两天的实验操作,共计42学时,让学员对从细胞的分离准备到最终上机操作的细胞膜片钳实验的具体步骤有了感性认识。培训过程不仅包括对细胞膜片钳技术的系统理论指导,还包括对学员在实践过程中遇到的具体问题的解答。学员们普遍对此次培训班的成功举办表示满意。大家一致认为,通过此次培训,对膜片钳技术的理论知识有了系统的学习,对膜片钳实验技术操作有了更深入的了解,对相关软件的操作也有了较为熟悉的掌握。来自全国各地的学员在学习的过程中也借此契机进行了较多的学术交流,深入了了解,也为今后进一步的交流奠定了良好的基础。

  • 标签: 中国生理学会 技术培训班 膜片钳技术 专业委员会 实验操作 医学院