简介：五唇兰组织内含有大量的酚类、多糖以及此生代谢产物,DNA提取较为困难。为获得高质量的五唇兰基因组DNA,文中采用传统十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、常规十二烷基硫酸钠(SDS)法和改进的CTAB法对五唇兰基因组DNA的提取进行比较。结果表明:改进的CTAB法比传统CTAB法和常规SDS法都好,可以得到质量较好的DNA,电泳条带清晰,通过紫外分光光度计检测,A260/A280为2.0以上。

简介：植物叶片中含有的多糖、蛋白质和多酚等物质,很大程度会影响总DNA的提取质量。本研究以剑叶虾脊兰(Calanthedavidii)和银带虾脊兰(Calantheargenteo-striata)幼嫩叶片为材料,采用改良CTAB法提取总DNA,设置样品重量(0.05g,0.10g,0.20g)、清洗时间(10min,20min,30min)、水浴温度(25℃,60℃,45℃)、水浴时间(2h,1h,0.5h)4因素3水平正交试验,探究不同因素、不同处理对DNA得率和纯度的影响,以获取最佳提取条件。研究发现剑叶虾脊兰和银带虾脊兰DNA的最佳提取条件均为:样品重量0.2g、清洗时间30min、水浴温度60℃、水浴时间2h。该处理下剑叶虾脊兰DNA产率最高为490.5ng/μL,A260/A280均值为1.953;该处理下银带虾脊兰DNA产率最高为139.83ng/μL,A260/A280均值为1.967。各因素对剑叶虾脊兰DNA产率影响次序为:样品重量>清洗时间>水浴温度>水浴时间;各因素对银带虾脊兰DNA产率影响为:样品重量>水浴温度>清洗时间>水浴时间。本研究为虾脊兰属的分子生物学研究提供科学依据。

简介：本试验采用甜叶菊组培苗叶片为材料,以RAPD分子标记检验水浴温度与时间、取样重量以及优化步骤等三个DNA提取影响因素,进而以SRAP和MSAP分子标记技术对RAPD结果进行验证,以提高甜叶菊组培苗DNA提取效率。结果表明,水浴温度、时间为70℃30min(A2),取样量为0.1g(B2)时,提取到常规步骤9的上清液V(C4)即可满足常规分子标记要求,且提取时间可减少1~1.5h。

简介：为有效获得蚜茧蜂基因组DNA,并保留其虫体做形态鉴定。本文对常规试剂盒提取方法（柱离心法）进行改进,采用穿刺法提取7种蚜茧蜂的基因组DNA,同时以研磨法提取4种常见蚜茧蜂成虫基因组DNA做对照,比较两种方法提取的基因组DNA的纯度和产量,并通过线粒体COI基因序列扩增进行验证。结果表明：穿刺法能从单头蚜茧蜂中提取DNA而不影响形态鉴定。该方法提取的DNA产物产量在29~55ng/μL,提取物的OD260/OD280在1.51~1.91,可以稳定地进行线粒体COI基因序列扩增,PCR扩增条带清晰完整。

简介：采用改良CTAB法提取了降香黄檀（DalbergiaodoriferaT．Chen）新鲜叶片和硅胶干燥后放置3个月的叶片基因组DNA，并对影响RAPD反应的各因素进行了优化。结果显示新鲜的降香黄檀叶可以得到质量较高的DNA，硅胶保存后部分叶片所提的DNA有降解。优化后反应体系为：25μL反应体系中包括，模板的DNA20ng，TaqDNAPolymerase2．5U，Mg^2＋5mmol·L^-1，dNTP0．3mmol·L^-1，引物（S37）0．4μmol·L^-1。反应条件为94℃预变性4min；94℃,30s，36℃1min，72℃2min，40个循环；72℃延伸10min.

简介：以8份广西桑树种质资源为材料，比较了改良的CTAB法和植物基因组DNA试剂盒法（离心柱）提取桑树基因组DNA的效果。结果表明：两种方法都能得到桑树样品清晰的DNA电泳条带，DNA纯度高，改良的CTAB法提取的DNA浓度在308．70μg／mL～384．30μg／mL之间，平均值是331．45μg／mL；植物基因组DNA试剂盒法提取的DNA浓度在180．50μg／mL～305．60μg／mL，平均值是212．01μg／mL，改良的CTAB法提取的DNA产量较高，用SRAP引物组合Me2－Em8进行扩增两种方法提取的DNA，均获得了清晰的扩增图谱，各样品的扩增效果条带清晰、多态性强。这两种桑树基因组DNA提取方法都能满足桑树分子标记研究的需要。

简介：为探讨庙台槭不同组织DNA的高效提取方法,分别以叶片和果实为材料,以完全随机区组试验设计,设置不同浓度的β-巯基乙醇和不同浓度的PVP作为预处理,采用试剂盒法提取基因组DNA,提取后对基因组DNA进行浓度、分光光度值的测定以及PCR扩增,综合各项指标选择出效果最好的预处理方法,并进一步以CTAB法进行验证,之后应用于不同个体庙台槭的DNA提取中。结果发现:以庙台槭果实为材料,不需要预处理,提取的DNA即可满足下游实验需要;以叶片为材料,用0.5%β-巯基乙醇和1%PVP预处理能有效提高提取的DNA浓度和质量,经验证发现该预处理方法适用于CTAB法,且能够极显著地提高DNA提取的浓度和质量;进一步应用于所有132个庙台槭个体的总DNA提取,获得的DNA均能满足后续实验要求。本研究为进一步研究庙台槭遗传多样性等工作提供帮助,同时也能够为槭属其他植物的相关研究提供参考。

简介：模板DNA的质量直接影响PCR扩增的结果,而不同提取方法及其缓冲液的成份与浓度对提取DNA的质量有重要影响.本文以5个栽培大豆品种的叶片为材料,比较分析了SDS与CTAB两种提取方法以及不同浓度CTAB提取缓冲液对所提取的DNA质量的影响,并通过PCR进行检验.实验结果表明:用1%(W/V)、2%(W/V)浓度的CTAB提取缓冲液和1.25%(W/V)SDS提取缓冲液所提取的大豆叶片DNA的质量较好,均能满足PCR扩增模板的需求,其中以1.25%(W/V)SDS提取得到的大豆叶片DNA质量最好,以其为模板扩增的效果最佳,而4%浓度的CTAB不适宜提取大豆叶片DNA.

简介：目前关于落叶木本果树DNA提取的材料多数为植物的叶片,叶片具有试材广泛、容易研磨、DNA产量高、质量好等优点,但也会受到季节、病虫害的影响且不耐贮藏。落叶果树枝条具有取材容易、DNA含量丰富的特点而适合在休眠季节用于提取DNA,进而加速果树分子生物学研究进程。本研究探讨了CTAB法、SDS法对休眠季节不同时期取材的葡萄、桃、樱桃、杏、苹果、银杏、柿子、枣8种落叶果树的一年生枝条DNA提取效果。结果表明:除葡萄外其他多数材料在整个休眠时期均能提出高质量的DNA,所提DNA电泳带纹清晰、亮度高,DNA产率高、质量优,可用于有关分子生物学的后续试验(RAPD分析);再DNA提取方法方面,从DNA产量和质量上来看,SDS法总体上要优于CTAB法。最后对提取中出现中存在过多的酚类、多糖和其他次生物质去除方法进行了讨论。

简介：本文通过两种方法提取红刺玫的基因组DNA，结果表明最适合的方法为磁珠法提取。以红刺玫基因组DNA为模板，优化SSR反应体系并确定反应条件，从22对SSR引物中筛选出扩增性强和稳定性好的有用引物12对；以有用引物进一步对红刺玫月季植物进行SSR，5对引物具有多态性，百分率为67～100％。该研究结果为红刺玫和月季亲缘关系分析、杂交亲本选择、以及杂交品系的鉴定奠定基础。

简介：随着不同转基因生物(GMO)制品的不断商业化,转基因成分检测技术也需不断更新。由于甘蔗红糖为甘蔗汁经高温熬煮浓缩而成,红糖中残留的DNA降解严重、含量低、片段短,且蛋白及糖分杂质含量高,所以甘蔗红糖DNA是比较难以收集并进行分子检测的。为了在转基因甘蔗红糖商业化前建立起转基因甘蔗红糖DNA的提取及分子鉴定技术,本研究以转基因甘蔗和非转基因甘蔗为材料,模仿传统的红糖制作工艺,分别获得了转基因甘蔗红糖与非转基因甘蔗红糖。通过对DNA提取方法进行改进,设计不同扩增片段长度的引物,并对传统PCR与荧光定量PCR进行比较,建立了稳定的甘蔗红糖DNA的提取方法及外源基因分子鉴定技术该技术对转基因甘蔗红糖与非转基因甘蔗红糖进行准确鉴别,为今后转基因甘蔗红糖的商业化所需的转基因食品鉴定提供技术支持,也为后面更为重要的转基因甘蔗白糖DNA的提取及分子鉴定提供借鉴。

简介：以槐米为原料,分别采用纤维素酶法、果胶酶法、复合酶法、超声复合酶法提取多糖,用苯酚-硫酸法测定槐米多糖含量,通过正交试验对提取条件进行优化,并对提取率进行比较。结果表明,在最佳提取条件下提取率分别为纤维素酶法6.10%,果胶酶法6.29%,复合酶法6.54%,超声复合酶法7.42%,超声复合酶法提取率最高。

简介：以青稞麸皮为原料，采用单因素试验和正交试验设计，用β-葡聚糖检验试剂盒法测定提取样品中β-葡聚糖的含量。结果表明，青稞麸皮β-葡聚糖适宜采用水提＋碱提的提取方法进行提取，其最佳工艺条件为料液比1：10，提取温度55℃，水提时间2h，碱提pH值8．0，碱提时间1h，在此条件下青稞β-葡聚糖提取率为68．12％。

简介：在森林公安日常侦办的案件中,常能遇到很多疑似国家重点保护动物的残体。犯罪嫌疑人为逃避检查和法律制裁,往往对野生动物尸体进行剥皮、肢解,或是烹饪、加工等,使涉案动物丧失其宏观形态学特征,导致这些涉案生物检材无法用常规形态学检验的方法进行鉴定,使森林公安民警的办案受到一定影响。

简介：为开展柑橘种质资源抗病性鉴定和评价提供技术支持,采用Folin-Ciocalte法测定柑橘叶片多酚含量,以柑橘叶片多酚提取含量为指标,利用正交试验法分析乙醇浓度、液料比、提取温度、提取时间对提取工艺的影响。结果表明,柑橘叶片多酚的最佳提取工艺参数为液料比50∶1,乙醇浓度30%,提取温度40℃,提取时间30min。该工艺成本低、易操作,可用于柑橘叶片多酚的测定。

简介：以青稞为原料，采用微波辅助法提取β-葡聚糖。研究了微波功率、微波处理时间、pH值、粉碎粒度对其得率的影响，通过正交试验优化了提取工艺。结果表明，微波辅助提取青稞β-葡聚糖得率的最佳工艺条件为微波功率800W，微波处理时间160s，pH值10．5，粉碎粒度60目。该条件下，β-葡聚糖的得率为5．92％；各因素对微波辅助提取青稞β-葡聚糖得率的影响大小依次为微波功率〉pH值〉微波处理时间〉粉碎粒度。三氯乙酸法、Sevage法及木瓜蛋白酶法3种除蛋白方法中，木瓜蛋白酶法效果最佳，其蛋白质去除率可达88．6％，β-葡聚糖保留率可达91.3％。

简介：作为一个模式植物,烟草在植物分子生物学研究中发挥着重要的作用。总RNA的提取质量,对于基因表达、基因克隆、cDNA文库建立、RNA原位杂交以及转基因材料鉴定等分子生物学基础研究至关重要。尤其在进行基因克隆及cDNA文库时,只有高质量的RNA,才能保证cDNA第一链合成的完整性。由于烟草中糖类、蛋白质及次生代谢物的含量较高,因此,在应用TRIzolRNA提取试剂盒进行烟草总RNA提取时,所提取的RNA产物中的蛋白质及多糖等杂质含量偏高。因此,针对这一问题,我们对TRIzol法进行了改进,并获得了高质量的烟草总RNA。经琼脂糖电泳检测,利用该方法提取的烟草总RNA,条带清晰、无拖尾现象,28S与18S的比例约为2:1。紫外吸收值的测定表明,所提取的烟草总RNA的A260/A280的值基本达到了1.9以上,说明所提取的RNA的质量较高,可广泛应用于基因的克隆及基因的表达研究。

简介：本试验主要研究沙棘果榨汁后的沉淀物中黄酮的最佳提取工艺。采用乙醇回流浸提的方法提取沙棘果泥中的黄酮,使用分光光度计对沙棘果泥中的黄酮含量进行测定。利用正交试验考察提取温度、提取时间以及料液比对黄酮提取率的影响,最终确定提取黄酮的最佳工艺。结果表明：最佳提取条件为提取温度75℃、提取时间2h、料液比1∶45。

简介：试验目的初探从分蘖葱头中总黄酮的提取分离方法。采用醇冷浸,有机溶剂萃取再以DiaionHp20及硅胶柱层析方法(Ⅰ)与SephadaxLH-20法(Ⅱ),比较结果:2种方法均可选用,但Ⅱ法省时方便。

简介：在刑事犯罪案件现场,鞋印是最为常见的痕迹之一.根据现场勘查的要求是先上后下,上下就是指地面,地面上除了有犯罪嫌疑人留下的鞋印,也有被害人、发现人等相关人的鞋印,有时还有救护人、围观人的鞋印,鉴别起来非常麻烦.鉴别现场鞋印先要拍照片,再将进入过现场的人的鞋子提取送检,这一过程费时费力.目前,光滑地面上的灰尘足迹一般的提取方法是先拍照,后静电吸附,再翻拍.这样下来,现场勘查往往需要很多静电复印纸,吸附后,静电复印纸不能卷,不能叠,在现场需要很大的地方平摊开来,还要用较长时间在现场翻拍.但往往在现场拍了很多鞋印,经鉴别后,很多鞋印并不是犯罪嫌疑人的,浪费了大量的人力物力.