简介:TA克隆构建含MOC1基因cDNA片段的重组质粒,作为TaqMan定量检测水稻分蘖基因MOC1mRNA的标准品,建立了检测方法。采用RT—PCR。的方法,从水稻分蘖芽总RNA中逆转录扩增总cDNA,PCR扩增MOC1基因中设计的目的片段,将纯化的目的片段与pMD19-TSimple载体连接,转化宿主菌JM-109,提取重组质粒DNA,PCR鉴定并测序分析。纯化质粒并检测260nm吸光值,确定重组质粒原液的拷贝浓度并以此制备荧光定量PCR梯度浓度标准品。对重组质粒进行实时荧光定量PCR实验。建立了MOC1基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法,特异性好,检测灵敏度达10^2拷贝,线性范围为10^2-10^7拷贝,阈值循环数与PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系(r=0.999),扩增效率高(E=92.8%)。成功建立了MOCI基因实时荧光PCR定量标准品,且TaqMan荧光定量RT—PCR的方法可对水稻分蘖基因MOC1mRNA的表达进行准确定量。
简介:消息:北京即将迎来候鸟迁飞的高峰期。从3月3日开始,北京市林业局将在郊区设立14个野生候鸟监测点,严防候鸟在迁徙过程中传播禽流感。北京地处亚热带与亚寒带的过渡区,是许多候鸟迁徙的必经通道。据统计,北京地区共有喜鹊、杜鹃、雨燕、小天鹅、黄鹂等410余种鸟类,占全国鸟类总种数的31.5%。春、秋两季,经北京南迁或北徙的夏候鸟和旅鸟多达353种。目前,候鸟迁徙数量逐渐增大,其中延庆野鸭湖近期已有上千只野鸭。专家预计,大量的候鸟将在3月中下旬迁入北京。据介绍,监测人员将在加强候鸟保护的基础上科学监测候鸟,每日填写记录表并上报监测结果。监测的主要任务是观察候鸟是否有异常情况,一旦发现有得病、死亡的候鸟,及时通知当地动物防疫部门进行处理。监测人员还将向群众宣传鸟类保护知识,共同爱护野生候鸟。此前,北京市林业局成立了严防候鸟传播禽流感领导小组,并对野生动物管理人员进行了强化培训,培训内容包括如何识别候鸟种类、野外监测、防治禽流感等内容。北京监测候鸟防禽流感$新华网