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  • 简介:目的研究RNA干扰下调核因子E2相关因子2(Nrf2)对U251细胞自噬的影响.方法建立RNA干扰下调Nrf2表达的U251细胞系并在瞬时转染48h后,电镜观察细胞自噬相关结构的形态,Westernblot法、吖啶橙染色流式细胞术定量分析自噬水平的改变.结果与对照组相比,Si-Nrf2组Nrf2的蛋白水平明显下降(P<0.001),自噬泡结构增多,微管相关蛋白1轻链蛋白3BII型(LC3B-Ⅱ)的蛋白水平明显升高(P<0.001),酸性囊泡数量明显增多(P<0.05).结论RNA干扰下调Nrf2可以显著增强U251细胞的自噬水平.

  • 标签: 多形性胶质母细胞瘤 核因子E2相关因子2 自噬 RNA干扰
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  • 简介:为了探讨H7K(R22修饰的pH敏感脂质体对U87-MG细胞的靶向作用,本文选择香豆素-6(coumarin-6)为荧光探针构建了包载香豆素--6的H7K(R22修饰的pH敏感脂质体(coumarin--6--PSL--H7K(R22)。采用流式实验分别对H7K(R22在coumarin--6--PSL--H7K(R22中的比例以及coumarin-6--PSL--H7K(R22U87--MG细胞的摄取途径进行研究。采用CD技术对H7K(R22在pH7.4和pH6.8条件下的二级结构进行考察。实验结果显示,H7K(R22在coumarin--6--PSL--H7K(R22中占2.5%时,其靶向作用优于1%和3.5%。细胞摄取途径实验表明,coumarin--6--PSL--H7K(R22进入U87--MG细胞不受菲律平、甲基--β--CD和氯丙嗪等抑制剂的影响。H7K(R22在pH6.8时的二级结构多为β--turn。本研究结果表明,在H7K(R22修饰的pH敏感脂质体中,H7K(R22的最佳比例可确定为2.5%。H7K(R22修饰的pH敏感脂质体进入肿瘤细胞的途径主要通过低pH条件下H7K(R22所产生的穿膜肽样作用。H7K(R22在pH6.8条件下所出现的发卡样二级结构是其产生靶向和穿透作用的可能机制。

  • 标签: H7K(R2)2 pH敏感脂质体 细胞摄取途径 二级结构 U87-MG细胞
  • 简介:摘要目的研究miR-219a-5p通过调控高迁移率蛋白A2(HMGA2)对骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用实时定量PCR检测骨肉瘤U2OS细胞和正常成骨细胞hFOB1.19的miR-219a-5p mRNA表达水平。采用脂质体转染法将miR-219a-5p模拟物miR-219a-5p mimic(miR-219a-5p mimic组)以及阴性对照mimic NC(mimic NC组)转染U2OS细胞,通过实时定量PCR检测转染后细胞miR-219a-5p和HMGA2 mRNA的表达水平,蛋白质印迹法检测HMGA2蛋白水平,采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力、划痕实验检测细胞迁移能力、Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力,利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-219a-5p与HMGA2间的作用关系。结果实时定量PCR结果显示,骨肉瘤U2OS细胞中的miR-219a-5p表达水平(0.11±0.01)显著低于正常成骨细胞(1.00±0.06),差异具有统计学意义(t=26.83,P<0.001)。CCK-8法结果显示,mimic NC组和miR-219a-5p mimic组培养24 h后细胞吸光度值分别为0.52±0.02、0.42±0.02,48 h后分别为0.85±0.03、0.60±0.03,72 h后分别为1.12±0.02、0.72±0.02,miR-219a-5p mimic组细胞增殖活性显著低于mimic NC组,差异均具有统计学意义(t=6.97,P<0.001;t=16.65,P<0.001;t=26.78,P<0.001)。克隆形成实验结果显示,miR-219a-5p mimic组细胞克隆数为(157.00±15.39)个,明显低于mimic NC组的(294.00±15.51)个,差异具有统计学意义(t=9.70,P<0.001)。划痕实验结果显示,培养24 h后,miR-219a-5p mimic组细胞划痕面积百分比为(40.53±2.92)%,显著高于mimic NC组的(21.71±3.11)%,差异具有统计学意义(t=7.26,P=0.002)。Transwell小室侵袭实验结果显示,miR-219a-5p mimic组细胞的穿膜数量为(128.67±18.67)个,显著少于mimic NC组的(317.67±14.33)个,差异具有统计学意义(t=15.65,P<0.001)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,在含有MUT-HMGA2细胞中,与mimic NC组(4.40±0.28)相比,转染miR-219a-5p mimic(4.30±0.26)对荧光素酶活性无明显影响,差异无统计学意义(t=0.85,P=0.690)。在含有WT-HMGA2细胞中,相比于NC mimic组(4.50±0.25),miR-219a-5p mimic组(2.88±0.16)荧光素酶活性显著降低,差异具有统计学意义(t=19.15,P<0.001)。且过表达miR-219a-5p后,骨肉瘤U2OS细胞中的HMGA2 mRNA和蛋白表达(0.77±0.01;0.37±0.01)相比于mimic NC组(1.00±0.02;1.00±0.01)均下调,差异均具有统计学意义(t=16.38,P<0.001;t=42.02,P<0.001)。结论在骨肉瘤细胞中,miR-219a-5p可通过下调HMGA2的表达抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。

  • 标签: 骨肉瘤 微RNAs HMGA2蛋白 细胞增殖
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  • 简介:现阶段的2型糖尿病和古籍中记载的消渴不能完全等同,2型糖尿病的核心病在于脾肺功能损伤,导致机体不能正常利用水谷精微,2型糖尿病所有的证候和并发症都是由这个核心病引发的。2型糖尿病不仅是糖不能被机体正常利用,所有的水谷精微都存在利用障碍问题。2型糖尿病人从饮食中吸收来的营养物质在体内的分布是不均匀的,机体的各部分利用营养的能力也不一样。

  • 标签: 2型糖尿病 中医病机 水谷精微
  • 简介:摘要煎药近年来在临床的使用已非常普遍,科学合理地使用煎药,总结经验,进行必要的改进和完善,努力将传统煎药方法与现代科技有机的融合在一起,提高汤剂煎煮质量,使中药汤剂这一传统剂型更好地服务于临床。

  • 标签: YJ20/2+1型煎药机 使用方法 汤剂质量
  • 简介:由王保国教授和周建新教授主编的《实用呼吸治疗学》(第2版)已于2005年10月由人民卫生出版社出版。

  • 标签: 治疗学 呼吸机 出版
  • 简介:摘要应用二氧化碳激光治疗848例宫颈糜烂患者,宫颈糜烂是慢性子宫颈炎中最常见的一种。应用二氧化碳治疗宫颈疾病,收效较好。我院应用二氧化碳激光治疗慢性宫颈炎848例。效果良好,报道如下。

  • 标签: CO2宫颈糜烂
  • 简介:摘要目的应用无血清培养基分离U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞,并鉴定相关肿瘤标志物表达。方法体外培养人骨肉瘤U2OS细胞株和U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞,免疫荧光检测U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞球中CD105表达。采用免疫印迹法检测人骨肉瘤U2OS细胞株和U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞Nanog和Oct4蛋白表达。采用半定量PCR检测人骨肉瘤U2OS细胞株和U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞SOX2、Nanog和Oct4mRNA的表达。结果荧光显微镜下可见,U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞球中部分细胞CD105呈阳性表达。免疫印迹检测结果显示人骨肉瘤U2OS细胞株的Nanog和Oct4蛋白相对表达量为0.853±0.404和0.603±0.153,均明显低于U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞0.973±0.305和0.827±0.322(均p<0.05)。半定量PCR检测结果显示U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞SOX2、Nanog和Oct4mRNA的相对表达量为0.190±0.027、0.178±0.025、0.170±0.021,均明显高于人骨肉瘤U2OS细胞株0.032±0.009、0.086±0.016、0.019±0.006(均p<0.05)。结论人骨肉瘤U2OS细胞株中存在肿瘤干细胞,无血清培养可用于分离培养人骨肉瘤肿瘤干细胞。

  • 标签: 骨肉瘤 骨肉瘤干细胞 无血清培养基 悬浮培养
  • 简介:目的观察犬脑栓塞前后血浆尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase-typeplasminogenactivator,u-PA)和尿激酶型纤溶酶原激活剂受体(urokinase-typeplasminogenactivatorreceptor,u-PAR)的变化。方法自体动脉血凝固制备栓子,使用介入方法建立犬脑栓塞模型。观察栓塞前和栓塞后2h、3h血浆u-PA和u-PAR的变化。结果栓塞前和栓塞后2h、3h血浆u-PA和u-PAR水平差异无统计学意义.P〉0.05。结论犬脑栓塞前和栓塞后3小时内血浆u-PA和u-PAR变化不明显。

  • 标签: 脑栓塞 尿激酶型纤溶酶原激活剂 尿激酶型纤溶酶原激活剂受体
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  • 简介:本文通过分析了CO2压缩在改造前的使用情况、存在的问题及其原因分析,然后根据分析制定改造方案。该改造取得了很好的效果,值得大力推广。

  • 标签: CO2压缩机 高压缸 齿轮箱 高速动平衡
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  • 简介:摘要 目的:创立一种高通量原位杂交技术以提高检测效率和减少试剂用量,以解决当前原位杂交技术临床应用费用高通量低的痛点。方法:将待检组织细胞样品制备成薄膜载片放入微孔板中,在定制的微孔板杂交仪中完成杂交反应。结果:通过对乳腺癌和肺癌 HER基因的检测证实了该方法经济高效结果可靠。结论:采用薄膜载片微孔板检测系统进行高通量原位杂交可以将12个载玻片的杂交仪的检测通量提高至192个,同时单个样本节省80%的试剂用量。

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  • 简介:受试者位于3000m高空,每人定额配给四种不同味道的食品:甜、咸、酸、苦,使用分类标准记录以味觉最低感受量、味觉强度及味觉嗜好程度为基础的嗜好基质,每周测定血糖水平。结果表明:糖和氯化钠的味觉最低感受量增加,而奎宁硫酸盐和柠檬酸的味觉最低感受量降低。鉴定表明味觉强度随每种溶液对数克分子浓度增加而增加,二者呈线性关系。

  • 标签: 味觉 嗜好 受试者 血糖水平 感受 人类
  • 简介:摘要目的探讨电子输尿管软镜联合U100Plus激光治疗上尿路2~3 cm结石的安全性及有效性。方法回顾性分析广州中医药大学金沙洲医院及广州医科大学附属第五医院2018年2月至2018年6月应用电子输尿管软镜结合U100Plus腔内激光碎石系统治疗66例上尿路2~3 cm结石的临床资料,记录术后1个月结石清除率,观察手术效果及围手术期并发症(Clavin-Dindo分级)情况。结果平均结石直径(2.3±0.3)cm,单次碎石成功率100%。平均碎石时间(56±24) min,平均术后住院时间(2.3±1.2)d。术后1个月结石清除率为87.9%。手术并发症发生率为9.09%(6例),其中Ⅰ级4例,3例术后体温>38.5℃,1例反复疼痛需镇痛;ⅢA级2例,术后1个月形成输尿管石街,再次手术清石。结论电子输尿管软镜联合U100Plus激光治疗上尿路2~3 cm结石,碎石效率高,并发症少,结石清除率高。

  • 标签: 输尿管软镜 U100Plus激光 结石 结石清除率