简介:为获得快速生长的泥鳅(Misgurnusanguillicaudatus),研究了泥鳅β-actin基因启动子介导的革胡子鲶(Clariasgariepinus)生长激素(growthhormone,GH)重组基因。采用PCR和RT-PCR技术克隆泥鳅β-actin基因近端启动子、3′-UTR及革胡子鲶GH基因编码区,构建一个长为2418bp的GH重组基因DPRK。首先,构建了以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因作为报告基因的重组表达载体pAF(pβ-actinpromoter-EGFP),然后转染DF1真核细胞,同时经酶切线性化后显微注射到斑马鱼(Daniorerio)和泥鳅的受精卵中,以评价泥鳅β-actin启动子的启动活性。其次,将重组基因DPRK显微注射到泥鳅受精卵中。结果显示:泥鳅β-actin启动子能在DF1细胞、斑马鱼和泥鳅的受精卵中启动绿色荧光蛋白的表达;泥鳅的荧光表达率(78.44%)显著高于斑马鱼(29.62%);泥鳅受精卵显微注射DPRK20d后,在mRNA水平检测到GH基因的表达。这表明泥鳅β-actin基因近端启动子具有显著的启动活性,且重组基因DPRK能在泥鳅体内表达,为下一步泥鳅的基因工程育种奠定了理论基础。
简介:<正>郑州市现有池塘4.5万亩,其中80%是以鲤鱼为主的集约化养殖模式,采用颗粒饲料投喂,亩产量在:2000kg/亩左右。近两年来,由于鲤鱼价格低落,50%以上养殖亏损,挫伤了农民养鱼积极性。调整养殖结构,引进名、特、优新品种,推广养殖,提高经济效益,已是业内人士的共识。然而,在新品种的推广中却存在以下难点:首先,一个新品种的养殖一般需经2~3年的试养后才具备大面积推广条件。由于我市引进新品种只是近1~2年的事,尚无技术成熟的品种可供选择,风险较大;其次,由于新品种的销售市场立足于本市,尽管价格可观,但销量偏小,难以形成养殖规模。因此,应因地制宜,根据自身承受风险的能力和市场需求选择品种。重点扶