简介:目的探讨Toll样受体(TLR)2信号途径在RAW264.7细胞川崎病模型炎症反应中的作用及其分子机制。方法构建TLR2-干扰小RNA(siRNA),合成2对特异性针对TLR2基因的siRNA序列,并用于转染RAW264.7细胞。实时荧光聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测TLR2-siRNA对干酪乳杆菌细胞壁提取物(LCWE)诱导RAW264.7细胞p38促分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)、基质多属蛋白酶(MMP)-9表达的影响,乳胶增强免疫比浊定量法检测培养基中高敏C反应蛋白(hsCRP)水平的变化;检测p38MAPK抑制剂SB203580对LCWE诱导RAW264.7细胞MMP-9表达的影响。结果与对照组相比,LCWE刺激组p-p38MAPK、MMP-9的表达及hs-CRP水平都有明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05),与LCWE刺激组相比,TLR2-siRNA+LCWE刺激组的p-p38MAPK、MMP-9表达和hsCRP水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与LCWE刺激组相比,SB203580+LCWE刺激组的MMP-9表达减轻,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论TLR2-siRNA可以有效减轻LCWE刺激造成的p-p38MAPK、MMP-9、hs-CRP表达升高。p38MAPK抑制剂SB203580对LCWE诱导RAW264.7细胞MMP-9表达有抑制作用。TLR2参与了RAW264.7细胞川崎病模型中的炎症反应,其机制可能与p38MAPK途径有关。
简介:目的研究表皮生长因子受体(EGFR)靶向抑制剂ZD1839联合放疗对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞凋亡的影响及其机制。方法体外培养人NSCLC细胞株A549和HCC827,将2种细胞株均分为A组不作处理、B组给予ZD1839、C组给予放疗、D组给予ZD1839联合放疗,其中A549细胞株记为A1组、B1组、C1组、D1组,HCC827细胞株记为A2组、B2组、C2组、D2组。测定各组的细胞增殖抑制率、计算2Gy照射剂量下细胞存活分数(SF2值)、检测细胞凋亡和细胞周期情况以及EGFR、p-EGFR及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)水平。结果D1组细胞增殖抑制率高于B1组和C1组,SF2值低于C1组(P<0.05)。B1、C1和D1组G1/G0期比例和细胞凋亡率高于A1组,D1组高于B1和C1组(P<0.05)。B1、C1和D1组的S期和G2/M期比例以及EGFR、p-EGFR、p-Akt表达水平低于A1组,且D1组低于B1和C1组(P<0.05)。4组HCC827细胞上述观察指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论EGFR靶向制剂ZD1839联合放疗可将NSCLC细胞阻滞于G1/G0期,增强放射线诱导细胞凋亡,可能与抑制EGFR、p-EGFR和p-Akt有关。