简介：荧光示踪技术是激发光通过激发荧光基团到达高能量状态，而后产生发射光，并利用生物荧光影像分析技术直接检测活体生物体内的细胞活动和基因行为。最常用的是绿色荧光蛋白（greenfluorescentprotein，GFP），随后发现的红色荧光蛋白（redfluorescentprotein，RFP）在灵敏度和信噪比方面均比GFP高，此外还有黄色荧光蛋白（yellowfluorescentprotein，YFP）等，这为基于GFP的体内研究提供了一个很好的互补工具。随着荧光蛋白在细胞生物学上的广泛应用，使活体细胞显像问题得以解决，并且获得了空前的发展。尤其是荧光蛋白可以对各种细胞过程进行显像示踪，这些蛋白可作为报告基因，独特的荧光光谱能在体内外对尚未明确的细胞过程进行示踪。比如肿瘤发生发展过程中的各个阶段在细胞水平有何异常？荧光蛋白的活体成像能观察各种肿瘤模型中肿瘤细胞的生长和发展，包括肿瘤最初的发生，肿瘤细胞随后的迁移和入侵，转移播种，生成血管以及肿瘤和宿主微环境间的相互作用等。荧光蛋白作为报告基因已被广泛应用于肿瘤各个阶段的研究中，本文就近些年来荧光示踪技术在肿瘤细胞发生和发展过程中的研究和应用作一综述。

简介：胶质瘤是最常见的颅内肿瘤,在国内其发病率占颅内肿瘤的35.26%～60.96%,平均44.69%[1]。虽然针对胶质瘤的外科手术及辅助治疗技术发展迅速,但患者预后仍然不佳。研究提示,胶质瘤切除程度与患者预后关系十分密切[2]。然而,其向周围正常组织浸润的生长模式,使肿瘤全切变得十分困难。

简介：目的探讨贝伐单抗（Avastin）对人胶质母细胞瘤移植瘤瘤体和血管生成的影响。方法免疫缺陷的RAG-KO小鼠,接种稳定表达荧光素酶的人胶质母细胞瘤U373-luc细胞7d后将合格的载瘤小鼠随机分成4组（每组6只）：对照组（给予PBS）,低剂量贝伐单抗组,常规剂量贝伐单抗组,高剂量贝伐单抗组。每隔3d记录各组小鼠重量,荧光成像系统每周2次测量颅内肿瘤体积随贝伐单抗治疗进程的改变。给药3周后,处死小鼠取材免疫组化检测肿瘤组织的CD31表达,计算微血管密度。小鼠处死前一天抽血测定血清血管内皮生长因子（VEGF）水平。结果与对照组相比,瘤体和血浆内VEGF水平显著下降,常规剂量和高剂量治疗组前两周肿瘤体积明显减少,血管密度减低,但3周起肿瘤体积反弹。常规剂量与高剂量治疗组之间各项指标未见明显差异。结论贝伐单抗对人胶质母细胞移植瘤瘤体和血管生成早期有明显抑制作用,可缩小肿瘤体积,减少血管密度,但随着治疗的延长,肿瘤生长反弹。接受高剂量和常规剂量贝伐单抗注射的载瘤小鼠均无明显不良反应。

简介：目的应用高分辨率磁共振(MRI)和三维体积分析软件(Surgiplan)测定人体海马及杏仁核的体积.方法选择健康成年日本人30名(男:女=16:14)作为研究对象.用TOSHIBA3.0T磁共振机对所有对象行MRI检查,层厚0.5mm,分别行T1、T2和质子加权的矢状、水平和冠状位扫描,在动态三维图象上勾画出海马、杏仁核轮廓图,输入Surgiplan工作站,用三维体积分析软件进行半自动分割分析,得出体积.结果海马平均体积:右侧(2895.0±300.2)mm3[男(3033.3±334.3)mm3,女(2687.5±298.4)mm3],左侧(2630.0±320.7)mm3[男(2683.3±323.5)mm3,女(2550.0±269.7)mm3].杏仁核平均体积:右侧(791.1±170.2)mm3[男(852.0±210.5)mm3,女(696.5±181.3)mm3],左侧(794.2±140.6)mm3[男(868.2±187.0)mm3,女(683.1±133.4)mm3].结论应用高分辨率磁共振分割分析技术和三维体积分析软件(Surgiplan)可以动态三维确认人体海马、杏仁核轮廓,进而准确测定其体积.

简介：目的探讨长期饮酒对大鼠脑缺血模型血浆中降钙素基因相关肽(CGRP)含量的影响.方法方法选用180～200g雄性Wistar大鼠30只,以7.2%酒精喂养100天,制作长期饮酒模型,在缺血0h,1h,3h,6h分别取血,用放免法测定降钙素基因相关肽.结果饮水组缺血3h血浆CGRP含量明显下降,酒精组缺血1h时血浆中CGRP明显下降,于缺血3h仍维持在同一水平,两组于缺血6h时血浆CGRP逐渐升高,饮酒组血浆CGRP仍低于饮水组.结论脑梗死超早期伴有血浆CGRP的动态改变,长期饮酒可加重这些变化.

简介：目的探讨动脉瘤夹闭术中辅助应用吲哚菁绿荧光造影（ICG）对手术的影响。方法回顾分析动脉瘤夹闭术中辅助应用吲哚菁绿荧光造影及无造影辅助的共40例脑动脉瘤病例，比较两组患者术后脑缺血的发生率、预后情况以及术中造影对手术策略的影响。结果20例术中辅助应用吲哚菁绿荧光造影的患者术后GOS分级显著高于非造影组，术后脑缺血的发生率亦明显低于后者，同时对部分动脉瘤夹闭的术中策略调整起到了积极影响。结论术中辅助应用吲哚菁绿荧光造影具有实时、精细、可重复、安全性高等特点，是提高动脉瘤夹闭术成功率及改善手术效果的有效方法。

简介：目的探讨B超和吲哚菁绿血管造影（ICGA）在脑浅表动静脉畸形（AVMs）手术中的应用价值.方法回顾性分析自2009年1月至12月北京天坛医院神经外科血管组联合应用B超和ICGA辅助切除的16例脑浅表AVMs患者临床资料,同时分析2种术中辅助技术对AVMs定位、边界确定及血管类型鉴别的作用.结果术中联合应用ICGA和B超能有效帮助定位AVMs,确定其边界,帮助辨认供血动脉和引流静脉.16例脑浅表AVMs患者共行开颅手术16次,均全切病灶,手术后经DSA证实AVMs无残留.结论脑浅表AVMs手术中联合应用ICGA和B超能有效帮助准确切除病灶,判断有无畸形残留,具有较高的临床应用价值.

简介：目的定量研究细胞间粘附分子基因（ICAM-1mRNA）在不同病理类型颅咽管瘤的表达差异及意义。方法收集30例经手术治疗的颅咽管瘤标本，采用SYBR荧光实时定量PCR法检测ICAM-1mRNA在肿瘤组织的表达，并对表达结果行统计学分析。结果造釉细胞型颅咽管瘤ICAM-1mRNA表达量为（62．18±6．43）×10^3copies／μg，鳞状乳头型颅咽管瘤ICAM-1mRNA表达量为（1．13±0．17）×10^3copies／μg，造釉细胞型颅咽管瘤ICAM-1mRNA表达量显著性高于鳞状乳头型颅咽管瘤（P〈0．01）。结论两种病理类型颅咽管瘤ICAM-1mRNA表达存在显著性差异，此差异性可能与两种病理类型颅咽管瘤不同的肿瘤炎症有关。

简介：目的调查临床医师实际应用血锂测定情况。方法自制调查表，内容包括年龄、性别、诊断、病程、测量血锂次数、测量血锂时的碳酸锂剂量、测量血锂时应用锂盐治疗的时间、测量血锂的原因、血锂测量结果、测量血锂前后的血白细胞数，应用SPSS软件包对数据进行统计分析。结果每位患者血锂测量最少1次，最多6次。测量血锂的医嘱绝大多数为常规检查。绝大多数病例血锂浓度值在正常范围内，极少数病例超出正常值。随着治疗时间的延长，测量血锂的意义下降。结论血锂测量绝大多数为常规检查，随治疗时间的延长，测量血锂次数和人数逐渐减少，测量血锂的意义也下降。但愿结合临床观察，随时检查血锂浓度，以防和早期发现锂盐中毒。

简介：目的研究神经肽B（NPB）在大鼠脑组织中的定位,探讨NPB与睡眠的关系。方法采用免疫荧光法测定NPB在除嗅球、垂体及小脑以外大鼠脑组织中的表达。结果及结论NPB不仅表达于于下丘脑腹内侧核、背内侧核、弓状核、视交叉上核和未定带腹侧区及中脑的腹侧被盖区,中缝背核,黑质等区域,还见于基底前脑的VDB和HDB;内、外侧苍白球,尾状核;丘脑网状核;脑干的中缝隐核、中缝核、前被盖核、横纹肌核、旁正中网状核、巨细胞网状核。

简介：目的探讨术中吲哚菁绿(Indocyaninegreen,ICG)荧光血管造影在开颅手术治疗颅内动脉瘤中的作用。方法回顾性分析开颅手术治疗56例颅内动脉瘤的经验。术中共行ICG荧光血管造影145次。结果3例手术得益于ICG荧光血管造影,经及时调整动脉瘤夹的位置或切断动脉瘤顶部的细小供血血管后,获得理想疗效。术中1例病人出现ICG过敏。术后复查3D-CTA或DSA检查51例,显示2例存在与血流不相关的载瘤动脉轻度狭窄,余49例结果与术中ICG荧光血管造影结果一致。结论ICG荧光血管造影简便易行,具有理想的空间和时间分辨率,可以帮助提高颅内动脉瘤手术质量,有可能成为颅内动脉瘤手术中的重要检查手段。

简介：目的：应用ATP生物荧光法监测医务人员手机清洁度情况,观察酒精、湿巾清洁消毒手机的效果。方法：采用分层随机抽样法对医院180名医务人员的手机清洁情况进行ATP检测;随机用75%酒精对30部手机消毒,比较消毒后5min、10min、20min的消毒效果;随机抽取60部手机分为两组,比较普通湿巾和卫生湿巾清洁消毒手机的效果。结果：医务人员手机的清洁合格率为5.56%。特殊科室（重症监护室、感染科、血液净化科）医务人员手机ATP值明显低于内科和外科医务人员的手机。在使用手机前洗手或用一次性薄膜套袋保持手机清洁的效果优于其他清洁消毒的方法（P〈0.05）,酒精消毒手机ATP值明显低于未清洁消毒的手机ATP值（P〈0.05）;每日清洁消毒手机的清洁度明显优于每周清洁消毒手机（P〈0.001）。酒精消毒的起效时间在10min以上,消毒后10min、20minATP值为（271.40±157.76）RLU、（344.30±147.79）RLU,达到清洁的标准（ATP值〈500RLU）。普通湿巾、卫生湿巾清洁消毒手机后ATP值为（2129.90±1344.91）RLU和（444.75±228.47）RLU,卫生湿巾的清洁效果明显优于普通湿巾（P〈0.001）,且接近清洁合格标准。结论：医务人员手机污染严重,应养成使用手机的良好卫生习惯,接打手机前洗手,每天用75%酒精擦拭待干10min或卫生湿巾对手机进行清洁消毒,使用一次性套袋,以减少病原体污染,保持手机的清洁。

简介：目的决定心理卫生素质的作用。方法临场实验法。测定儿童心理卫生素质。结果探险心理卫生素质是内因。结论心理卫生素质促进心理发展。

简介：本文采用放免法测定了32倒正常人及32例手术和非手术高血压脑出血急性期患者血浆心钠素(ANF)含量。结果发现：高血压脑出血患者发病后入院当日血浆ANF含量显著高于对照组(p<0．01)；手术患者术前与术后1天、3天、及7天血浆ANF含量比较分别为无差异(p>0．05)、差异(p<0．05)及显著差异(p<0．01)；手术组患者与非手术组患者1天、3天及7天血浆ANF含量同步比较分别为无差异(p>0．05)、差异(p<0．05)及差异显著(p<0．01)；死亡患者入院当日血浆ANF含量高于存活组且显著高于对照组。研究结果提示：动态测定血浆ANF含量，可以作为观察高血压脑出血病情发展变化的一项指标，同时对判断高血压脑出血的预后亦有一定临床意义。

简介：目的探讨绿色荧光蛋白(GFP)特异性发夹结构RNA(shRNA)对人类胶质瘤BT325细胞系GFP基因表达的抑制作用.方法设计并合成针对GFP基因的shRNA序列,与报告基因质粒pEGFP-N1共转染,选择最佳转染比例,荧光显微镜下观察GFP表达的效率和对GFP的抑制效应.结果质粒pSIREN-RetroQ-RNAi经双酶切得到6kb和100bp条带,结合测序验证,与实验设计的shRNA长度相符.质粒DNA与XP-1转染比例为1:25时GFP表达最强.BT325细胞干扰48h时GFP表达显著减少.结论BT325细胞系中存在RNA干扰现象,且干扰效果特异、稳定;本实验为研究基因功能提供了新的策略.

简介：目的观察IgG-ACA与重症肌无力患者的关系.方法应用酶联免疫吸附法,测定了94例重症肌无力(MG)患者和40例健康对照者血清中抗心磷脂抗体水平,(IgM-ACA和IgG-ACA).结果94例MG患者及40例健康对照者血清中IgM-ACA均为阴性;94例MG患者中30例IgG-ACA阳性(30/94,31.9%),40例健康对照者中仅2例阳性(2/40,5%),二者差异有非常显著性(P＜0.01).血清IgG-ACA水平与患者的年龄、性别、病型均无关(P＞0.05),而与胸腺病理密切相关(P＜0.01).30例胸腺瘤患者中,14例阳性(14/30,46.7%),64例不伴胸腺瘤的MG患者中,16例阳性(16/64,25%),二者相比,差异有非常显著性(P＜0.01).IgG-ACA阳性患者中,1/3滴度较高(至少为正常值的2倍).结论通过对IgG-ACA的测定,不仅对MG是否合并胸腺瘤起初步筛选作用,而且是MG患者并发凝血机制方面异常的一个警惕性标志.

简介：目的建立体外磷酸盐缓冲溶液（PBS）聚乳酸／羟基乙酸（PLGA）缓释卡氮芥（BCNU）微球药物浓度的高效液相色谱分析方法，并用此法研究缓释微球的体外释放动力学特征。方法采用依利特HypersilODS2C18色谱柱（5μm，4．6mm×150mm），以甲醇：水（50：50）为流动相，流速1．0ml／min，紫外光检测波长237nm。结果BCNU在0．005—0．35μmol／ml范围内呈线性（r=0．9992），最低检测下限为0．005μmol／ml。采用低、中、高浓度（0．03、0．1、0．3μmol／m1）的方法回收率分别为103．33％、101．43％和102．04％，日间及日内相对标准偏差（RSD）分别〈4％和〈1％。体外药物释放动力学研究表明，PLGA缓释BCNU时间可达3w以上。结论本法准确可靠，操作简便，适用于缓释BCNU微球的体外药物释放动力学研究。

简介：目的探讨术中生长激素（GH）水平在垂体GH腺瘤缓解及预后判断中的意义。方法回顾性分析106例经鼻蝶垂体腺瘤切除术的GH腺瘤病人的临床资料，其中采用常规GH测量方法34例（常规GH测量组），术中GH测量72例（术中GH测量组）。结果本组术后共缓解60例（56．60％），术中GH测量组缓解率明显高于常规GH测量组（P〈0．001）。两组间大腺瘤、非侵袭性腺瘤和侵袭性腺瘤的缓解率差异均有统计学意义（P〈0．05），而两组微腺瘤的缓解率差异无统计学意义（P〉O．05）。结论术中实时GH测定可提高手术疗效．对预后有重要预测价值．值得临床推广。