简介：摘要目的构建细胞凋亡受体通路相关蛋白FasL表达的RNA干扰(RNAi)质粒,为研究FasL参与的细胞信号通路提供稳定转染细胞的RNA干扰质粒。方法选取FasL基因的19nt特异性序列,设计针对FasL的shRNA序列,应用基因重组技术克隆到pSilencer1.0-U6表达载体中,EcoRI和ApaI进行双酶切和DNA测序鉴定重组克隆,在脂质体的介导下包含FasL基因RNAi的重组载体转染脐静脉血管内皮细胞,转染48h后,收集细胞裂解液，Westernblotting分析对照组与转染组FasL蛋白的表达水平。结果双酶切证实shRNA正确插入pSilencer1.0-U6质粒,DNA测序证实插入的序列正确;FasL基因RNAi的载体转染血管内皮细胞成功;Westernblotting结果显示与空质粒对照组比转染组细胞FasL表达下调。结论成功构建人FasL基因RNA质粒,为研究FasL参与的细胞信号通路提供了稳定的转染细胞载体。

简介：摘要目的克隆编码人粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的重组原核表达质粒,为进一步研究其功能提供依据。方法PCR扩增人GM-CSF基因编码序列,定向克隆入融合蛋白原核表达载体PET32a+获得重组表达质粒,转化大肠杆菌后用IPTG进行诱导表达,PCR和Western-blot鉴定表达产物。结果重组质粒经PCR、限制性内切酶及DNA测序证实构建成功;且诱导后能在大肠杆菌中稳定表达PET-GMCSF嵌合蛋白。结论成功构建并表达了PET-GMCSF蛋白,为进一步研究GM-CSF功能奠定基础。

简介：摘要目的评价低频超声辐照造影剂SonoVue对增强型绿色荧光蛋白（EGFP)质粒在大鼠肝卵圆细胞增殖模型肝脏中表达的作用。方法造模成功雄性SD大鼠45只，随机分为5组，每组又分为3个亚组，每组3只，分别在1、3、7天麻醉处死取材，制作肝组织冰冻切片后立即在荧光显微镜下观察，采用ImageProPlus软件计算转染效率。结果A组、B组、C组切片中均可见少量散在的绿色荧光表达，D组、E组均可见较多绿色荧光蛋白表达，荧光强度增强，各组均在第3天表达最强；在第1、3、7天，A组、B组、C组之间差异统计均无统计学意义（P＞0.05）；D组、E组在3个时间点上与其他组之间差异统计均有统计学意义（P<0.05）。结论超声造影剂在低频超声照射下可以促进EGFP质粒在大鼠肝卵圆细胞增殖模型肝脏的转染，通过门静脉注射组（E组）转染效率高于其它组。

简介：摘要目的了解外源Smad7基因对大鼠肝纤维化模型病理组织学改变的影响。方法利用分子克隆技术构建鼠Smad7真核表达重组质粒，采用四氯化碳复合法制备大鼠肝纤维化模型，以脂质体为载体将构建的鼠Smad7重组质粒介导转染肝纤维化模型大鼠。运用VG染色和HE染色法观察组织病理学改变，运用免疫组化半定量检测Ⅲ型胶原纤维表达，观察外源Smad7基因对大鼠肝纤维化模型Ⅰ型胶原纤维表达的影响。结果Ⅰ型胶原纤维的表达治疗组与模型对照组和空质粒组比较，表达量下降，差异有统计学意义(P<0.05)。结论利用Smad7抑制TGF-β的信号转导，从而有效抑制延缓肝纤维化的发生、发展。

简介：摘要目的构建NR4A2真核细胞瞬时表达载体。方法设计带有酶切位点的NR4A2引物，采用PCR法从NR4A2基因载体中扩增目的基因，经限制性酶切后与目的载体连接，转化感受态细胞。挑取阳性克隆，分别采用PCR法和测序法进行验证。结果成功构建具有NR4A2表达序列的慢病毒质粒。

简介：摘要目的构建DNAJA1(DnaJheatshockproteinfamily(Hsp40)memberA1)基因过表达质粒，转染结肠癌细胞株，并对其是否转染成功进行鉴定。方法Real-time聚合酶链反应(PCR)及Westernblot检测6株结肠癌细胞及瞬时转染DNAJA1质粒的细胞中DNAJA1mRNA水平。采用全基因合成法合成DNAJA1编码区序列并克隆入pEGFP-C1载体末端，构建重组质粒pEGFP-C-DNAJA1并进行测序及凝胶电泳鉴定。结果6株结直肠癌细胞中，DNAJA1在HT29和HCT116中的mRNA和蛋白水平最较低，在LOVO和SW620细胞中较高。测序及凝胶电泳结果表明DNAJA1重组质粒构建成功。瞬时转染HT29和HCT116细胞后，与对照组相比，DNAJA1mRNA分别升高约50倍，蛋白表达也明显升高。结论成功构建DNAJA1基因过表达重组质粒，并有较高的转染水平，为进一步的研究提供了条件。

简介：摘要目的了解本地质粒介导的耐多药大肠埃希菌的CTXM-22、CTXM24基因分布情况。方法用Ｋ-Ｂ法进行耐药菌株的筛选。PCR扩增CTXM-22、CTXM24基因。琼脂糖凝胶电泳检测基因大小。基因测序仪检测碱基序列。结果71株大肠埃希菌中,有一株死亡。全敏6株，占8.57%,单耐16株，占22.86%,双耐18株，占26.71%,耐多药30株，占42.86%。耐多药质粒中携带有CTXM-229株,12.86%。CTXM2424株，占34.29%。两种质粒均有的6株,占20%.结论泸州地区耐多药大肠埃希菌存在质粒介导的CTXM-22、CTXM24基因。耐多药的大肠埃希菌对第三代头孢菌素的头孢唑肟敏感，对头孢他啶，头孢哌酮，头孢曲松，丁胺卡那霉素中度敏感。对亚胺培南，美罗培南敏感。

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简介：摘要目的评价3DTOFMRA和3DCEMRA诊断颈动脉狭窄的效能。方法117例临床疑诊颈动脉狭窄病人分别接受TOFMRA、CEMRA检查。狭窄评估采用NASCET标准。统计方法SPSS17.0统计软件进行PearsonX2及Kappa检验。结果以1级为判定点，两种检查狭窄评估颈总动脉、颈动脉球及颈外动脉无显著差异，颈内动脉及全部颈动脉有显著差异;3级为判定点，均无明显差异。结论尽管TOFMRA倾向于狭窄过评估，但二者对于三级以上狭窄评估一致，具有一定的临床应用价值。

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简介：摘要腹腔妊娠为指位于子宫、输卵管、卵巢及阔韧带以外的腹腔内妊娠，是一种较为罕见的异位妊娠，发生率低，发病率约1/15000-1/30000。本文主要分析了三例腹腔妊娠。

简介：摘要目的报道有剖宫产史者，一旦确诊妊娠应及时行B超检查，注意着床部位，以排除子宫切口妊娠可能，切忌盲目刮宫，以避免造成孕妇的生命安全。方法报道我科2010—2012年，子宫切口疤痕妊娠3例诊疗的经过。结果3例均有惊无险，经过积极抢救后转危为安。结论子宫切口疤痕妊娠早期诊断有一定的难度，一旦确诊应立即终止妊娠，一旦妊娠或人工流产常大出血、子宫破裂，严重威胁孕妇生命安全。

简介：摘要通过报道3例少见肠梗阻病例（成人肠套叠、血运性肠梗阻和腹内疝）结合文献，复习肠梗阻的手术适应症及手术的时机。

简介：摘要炭疽为一种由炭疽杆菌引起的动物传染病。通过接触受染的动物及污染的畜产品和从外周污染环境吸入而传染人类。经接触、食入、吸入等方式发生皮肤炭疽、肺炭疽和肠炭疽。近三十年未发生的皮肤炭疽出现。

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简介：摘要目的回顾分析救治的颈深部脓肿的治疗经历并总结临床经验。方法通过CT、B超诊断颈深部脓肿，通过颈侧切开行脓肿引流。结果3例患者经手术治疗，疗效明确，未发生严重并发症。结论影像学检查可以帮助诊断，颈侧切开脓肿引流可以有效救治颈深部脓肿，预防严重并发症的发生。

简介：摘要目的研究孕妇合并淋病的护理方法和消毒隔离。方法收治孕妇合并淋病患者3例，对患者实施心理护理、健康宣教、消毒隔离及全面治疗护理措施，并对护理过程、治疗效果进行分析总结。结果3例合并淋病的孕妇均未引起绒毛膜羊膜炎、胎膜早破、胎儿宫内感染、胎儿窘迫、产褥感染、新生儿淋菌性结膜炎、肺炎等并发症，均顺利分娩治愈出院。结论针对孕妇合并淋病的患者应做好心理护理及保密措施，取得患者及家属的配合，并做好健康宣教和消毒隔离措施，让患者和家属参与护理治疗具有良好的效果。

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