学科分类
/ 25
500 个结果
  • 简介:目前,生产转基因动物难度很大,成功率很低,这是因为制备转基因动物主要方法是向受精卵原核中注射DNA。这种方法有其弱点,首先作为外源基因受体细胞受精卵数量有限;其次外源基因整合表达筛选工作不能在细胞水平上进行,只能在子代动物出生后,即在个体水平上进行选择,这就增加了工作量,而且周期长,成功率低,成本大,在大动物上实施起来尤其困难。这就要求我们找到一种更为有效而又简捷转基因动物制备方法。利

  • 标签: 精原干细胞 转基因动物 体内转染 外源基因 小鼠 曲细精管
  • 简介:目的:构建人角质细胞生长因子2(KGF-2)基因真核表达载体,探索KGF-2上皮细胞迁移功能。方法:以人乳腺cDNA文库为模板,PCR扩增KGF-2基因片段,将其插入pXJ-40-myc,经双酶切测序验证后,将重组质粒转染HEK-293T细胞,采用Western印迹检测重组蛋白;转染人肠上皮细胞FHC,采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果:PCR扩增获得627bpDNA产物,插入pXJ-40-myc载体,双酶切及测序结果证明重组质粒含有目的序列;转染HEK-293T细胞,Western印迹检测到相对分子质量约23×10^3目的蛋白;细胞划痕实验显示,转染Myc-KGF-2FHC细胞较未转染或转染空载体细胞迁移能力强。结论:构建了人KGF-2基因真核表达载体,并验证了其促进细胞迁移功能

  • 标签: 人角质细胞生长因子2基因 真核表达 细胞迁移
  • 简介:IbpA是小分子热激蛋白家族成员。IbpAIbpB协同作用,与其他伴侣蛋白一起在热激反应中保护底物蛋白,消除凝集,产生重折叠,回复活性。概述了IbpA在热激反应中作用、ibpA基因表达调控IbpA分子结构对其功能影响。

  • 标签: IbpA 小分子热激蛋白 热激反应
  • 简介:目的:建立适合于止痛透骨贴微生物限度检查方法。方法:参照《中国药典》2010版一部微生物限度检查法验证试验要求,采用中和-离心薄膜过滤法进行细菌数检查,采用平皿法进行霉菌酵母菌数检查,采用直接接种法进行控制菌检查。结果:5种验证菌株回收率均高于70%,控制菌检查经方法验证,可用直接接种法对金黄色葡萄球、铜绿假单胞菌、大肠菌群进行检查。结论:建立方法准确可靠,适用于止痛透骨贴微生物检查。

  • 标签: 止痛透骨贴 微生物限度检查 抑菌作用 方法学验证
  • 简介:虽然临床实验研究已经证实阻塞黄疸败血症密切相关,但至今其机制尚未完全阐明。阻塞黄疸最重要病理基础是肠黏膜屏障损伤导致内毒素血症。近年来研究表明,主要影响因素细胞紧密连接蛋白及其磷酸化有密切相关。

  • 标签: 阻塞性黄疸 肠黏膜屏障 紧密连接蛋白 磷酸化 内毒素血症
  • 简介:天冬氨酸蛋白酶是主要蛋白水解酶之一,广泛存在于细菌、真菌、动物植物中。近年来,对植物天冬氨酸蛋白酶结构及功能研究有了一些进展。本文简要总结了植物天冬氨酸蛋白酶结构,典型植物天冬氨酸蛋白酶加工产生成熟过程,植物天冬氨酸蛋白酶在植物生物胁迫、非生物胁迫、种子萌发、有性生殖过程及植物衰老等方面的功能

  • 标签: 天冬氨酸蛋白酶 结构与分类 加工机制 胁迫反应 有性生殖与衰老
  • 简介:目的:研究慢性心力衰竭患者血尿酸水平功能关系.方法:观察99例住院CHF患者及96例健康体检者血尿酸水平并进行比较.结果:随着心衰程度加重,血尿酸水平及高尿酸血症发生率均逐渐增高,病例各组间及治疗前后比较差异有显著(P〈0.05).结论:高尿酸血症在慢性心力衰竭患者中常见;对于慢性心力衰竭患者,心衰程度HUA水平明显相关,可反映心力衰竭患者病情程度.

  • 标签: 心力衰竭 血尿酸
  • 简介:应用DNA聚合酶链式反应(PCR)技术,对p16抑癌基因(CDKN2)进行体外定点突变,在p16cDNA中引入第48位密码子CCG(Pro)→CTG(Leu)第74位密码子GAC(Asp)→AAC(Asn)突变,构建了p16-P48Lp16-D74N突变体。野生型突变型p16cDNA克隆于pcDNA3构建pCMV-p16、pCMV-p16P48LpCMV-p16D74N真核表达载体,导入纯合缺失p16基因的人肺癌细胞株H460,经RNA点杂交、RNA印迹细胞免疫化学染色,检测到P16表达。通过比较表达野生型突变型P16H460细胞在~3H-TdR掺入及细胞所在周期差异,证实P16表达抑制细胞进入S期,而P48LD74N突变体对细胞进入S期没有什么影响,提示P48LD74N突变导致P16蛋白功能丧失。

  • 标签: P16基因 体外定点突变 基因表达 细胞周期
  • 简介:溶栓疗法不仅已被常规地用于急性心肌梗死治疗,而且也已用于其它血栓病治疗中,如急性缺血性脑血栓、肺栓塞、急性周围动脉血栓等。尿激酶原是双链尿激酶单链前体,它主要激活纤维蛋白表面的纤溶蛋白原,所以具有选择溶栓作用。临床结果表明它是一种安全有效溶栓药物,t-PA、链激酶或尿激酶伍用均有协同作用。本文综述它了特性、结构功能,以及它药代动力学临床治疗效果。

  • 标签: 溶栓疗法 尿激酶原 结构与功能 药代动力学 临床效果
  • 简介:目的:调查我院儿科抗菌药物应用情况,提出针对改进策略。方法:对2013年度儿科收治住院患儿782例病历进行回顾分析。结果:应用抗生素698例,占89.26%,其中送检75例,占10.74%,送检中检出17例,占22.67%;联合用药632例,占90.54%,均为两联用药;头孢甲肟DUI=1.02;应用频率,头孢地嗪占48.38%,头孢甲肟占19.76%,阿奇霉素占15.0%,头孢米诺占11.75%用药更换73例,占10.46%,无效更换70例、药物过敏3例。结论:本院儿科住院患儿抗菌药物应用率较高,多为预防用药,检出率低,用药集中在四种药品之上,存在不合理用药情况,预防用药预见性、用药安全管理水平有待提高。

  • 标签: 儿科 抗菌药物 合理用药
  • 简介:研究寡核苷酸芯片重复性间隔臂(spacer)探针长度之间相关.设计12条不同长度带有不同spacer探针,749bp荧光标记靶序列杂交.扫描分析三次杂交结果,用Quantarray定量分析软件进行分析.随探针长度延长,杂交信号变异系数逐步降低.15mer探针杂交信号较弱,杂交不够稳定,重复性也相对较差.20mer、25mer、30mer探针变异系数逐渐降低.spacer为15时变异系数最小.说明选择spacer为poly(dT)1525mer30mer探针可以获得较好重复性.

  • 标签: 间隔臂 探针长度 寡核苷酸芯片 相关性 杂交重复性 变异系数
  • 简介:目的:研究针对出血性梗塞脑血管病患者早期诊断以及治疗对其康复预后作用.方法:150例初发脑血管病患者按照病因分为梗塞组出血组.均实施早期诊断治疗.对比结果以及相关监测指标变化.结果:梗塞组患者合并慢性病以及并发症比例均少于出血组(P〉0.05),梗塞组住院时间显著少于出血组(P〈0.05).两组患者治疗后日常生活活动(BI)肢体功能恢复(FM)评分均显著高于治疗前,梗塞组明显高于对照组(P〈0.05);两组治疗后病残程度(AS)评分均显著低于治疗前,梗塞组明显低于对照组(P〈0.05).结论:脑血管病患者实施早期诊断治疗,可以有效改善其临床症状,恢复患者正常机体功能.

  • 标签: 脑血管病 康复 预后
  • 简介:microRNA(miRNA)是一类长度为19-25个核苷酸非常保守非编码小RNA分子,在真核生物体内通过mRNA3'非翻译区序列不完全互补结合促使mRNA降解或抑制翻译,从而在转录后水平调控基因表达。miRNA在生物体内参与了细胞增殖凋亡、生长发育、代谢活化、DNA修复等一系列生物学过程,多种疾病尤其是肿瘤发生发展密切相关。对miRNA功能研究已发展到其分子机制层面,大量集中于其靶基因预测鉴定及调控相关表观遗传因子,为疾病诊断、治疗及预后提供了新线索。我们就miRNA合成、功能研究及miRNA在临床上应用前景做简要综述。

  • 标签: MICRORNA 生物学过程 功能研究 临床应用
  • 简介:利用同源模建方法模拟得到了肝细胞生长因子4个Kringle域三维结构。结果表明,HGFKringle纤溶酶原Kringle氨基酸序列具有较高同源,其功能区附近序列比较保守。HGFKringlel3与其它具有Lys结合功能Kringle相比,功能残基发生了变化,可能丧失了结合Lys功能,而24仍具有一定功能。根据Kringle1模建结构,推测该Kringle功能结构为一个通道,该通道底部一侧有部分疏水残基,同时两侧还分布着少量酸性或碱性残基,该通道可能具有结合特定肽链功能,从而与Kringle2一起实现HGF受体结合作用。

  • 标签: 肝细胞生长因子 KRINGLE 三维结构 结构与功能关系
  • 简介:目的:选择发酵系统中各可控因素最佳水平组合,从而减少各种干扰影响,以获得稳健赖氨酸产量。方法:利用田口法内外表Box性能规则优化赖氨酸发酵条件。结果:通过实验得知,转速、硫酸铵葡萄糖浓度对发酵影响较大;结果稳定最优发酵条件为初始葡萄糖浓度为80g/L、硫酸铵浓度为42g/L、转速为225r/min、初始pH值为6.7、接种量为8%。经实验验证,最优化发酵条件是低灵敏度,最优目标值比较稳健。在10L自动发酵罐上培养65h,L-赖氨酸盐酸盐产量为165.68g/L,比优化前提高了12.4%。结论:基于稳健设计所得最优发酵条件参数,可使目的产物产量稳定,便于生产操作。

  • 标签: 稳健性设计 信噪比 L-赖氨酸 发酵优化
  • 简介:母体胚胎亮氨酸拉链激酶(MELK)是蔗糖非发酵1/AMP活化蛋白激酶(Snfl/AMPK)家族中一个独特成员,是一种周期依赖激酶。家族其他成员不同,MELK并不参与代谢应激状态下细胞生存调控,而更多参与细胞周期、细胞增殖、肿瘤生成细胞凋亡等过程。MELK在人体多种肿瘤中表达升高,肿瘤预后密切相关。MELK在肿瘤干细胞中被异常激活,使肿瘤细胞获得生长、侵袭、迁移等能力,因此,MELK可以作为肿瘤治疗重要靶点。我们就MELK基因生物学功能、作用机制及其在肿瘤研究中进展做简要综述。

  • 标签: 母体胚胎亮氨酸拉链激酶 细胞周期 胚胎发育 肿瘤形成 靶向治疗
  • 简介:蓝靛果忍冬又名蓝靛果、黑瞎子果、山茄子等,果实出汁率高,是制作饮料极好原料,被誉为“饮料之王”.经深入研究发现蓝靛果中含有丰富Vp活性物质,如花青甙、芸香甙,儿茶酸等,具有很高药用价值.蓝靛果不但有较高抗氧化性、抗肿瘤作用,还可以治疗胃溃疡、预防心脑血管疾病等.

  • 标签: 蓝靛果忍冬 花色苷 类黄酮 抗肿瘤
  • 简介:高校电学实验设计在现代高校电学专业教学活动中发挥着十分重要作用,要充分发挥实验设计对于学生理论掌握积极作用,并保证学生对于相关电学原理准确掌握,就需要在加强对实验设计优化同时,注重采取措施对学生思维转向意识进行有效培养,提高学生思维灵活性,也为学生未来学习知识实践应用打下良好基础.基于此,本文将针对当前我国高校电学实验设计学生思维转向意识培养问题展开分析探讨.

  • 标签: 高校 电学实验设计 思维转向意识 培养
  • 简介:运动产生应力刺激在经过力学偶联、生化偶联、信号传递后到达骨效应细胞,引发骨重建对骨骼调控,而这种调控结果依据运动方式、强度部位不同表现出不同骨密度变化.骨重建是骨吸收作用成骨作用相互协同结果,其主要受成骨细胞破骨细胞调控.

  • 标签: 运动 骨密度 骨重建