简介：侵袭性真菌感染,由于其高发病率和死亡率,对人类健康造成严重威胁。针对侵袭性真菌自身生长繁殖的生物学过程,人们开发了不同的抗真菌药物对其进行阻断、干扰,从而达到杀菌抑菌的目的。我们简要介绍临床常见抗真菌药物的种类、作用机制、耐药机制以及应对耐药的方法。

简介：幽门螺杆菌(HP)的发现使慢性胃炎和消化性溃疡发病学和防治学面临着一场革命,HP与胃癌关系也十分密切。随着对HP研究的不断深入,从分子水平对HP的致病机理有了更深的了解。常规的治疗方法如抗生素虽然可以暂时控制HP的感染,但是由于易产生耐药性等许多新的问题,因此迫切需要研究新的防治策略。利用HP抗原与佐剂联合使用或用减毒的沙门氏菌来表达HP的抗原,进行口服免疫防治HP的感染是目前研究的热点。动物模型试验结果证明这种策略是行之有效的

简介：英国桑德兰大学科学家领导的研究团队开发出致命超级病菌早期检测术。可在未来一年内用于临床实践。

简介：目的：融合表达结核分枝杆菌Rv3881c突变子抗原，以便与其他已知的免疫显性抗原联合使用，有效增加结核分枝杆菌感染血清学检验的敏感性和特异性。方法：将克隆的来源干结核分枝杆菌H37Rv株的Rv3881c突变体基因插入原核表达载体pET24b，并在大肠杆菌BL21中获得高效表达；由于重组的Rv3881c突变子抗原片段同C端的6xHis标签融合表达，使用Ni-柱进行快速纯化。结果：Western印迹表明，重组的Rv3881c突变子抗原同选取的6例结核病阳性临床血清标本均能发生明显的反应。结论：重组Rv3881c突变体具有较好的特异性，提示该抗原可能成为检测结核的有效抗原之一。

简介：避开化疗诱导多药耐药性的常规方法，建立烷基磷脂类化合物（十六烷基磷酸胆碱，HePC)诱导人上皮性肿瘤细胞系产生交叉耐药。旨在以新的角度认识肿瘤多药耐药性，揭示新的调控机制。利用抑制消减杂交技术，对文库进行克隆分析，在获得的可分析的78个克隆中，27%没有同源基因片段或同源性很低，暂定为“新基因”；14%具有染色体明确定位，认为是化疗敏感肿瘤KB细胞所特有的cDNA片段；19%在人类EST库文库MGC和CGAP中出现，可能是肿瘤细胞特有基因；发现与耐药相关的巳知功能基因高达40%。

简介：目的：在FUS-50L生物反应器中利用补料分批培养技术培养表达含重组质粒pET28a（＋）-GNLY的大肠杆菌BL21（DE3）pLysS株，生产重组颗粒溶素（GNLY）。方法：选取含pET28a（＋）-GNLY的BL21（DE3）pLysS菌株单个克隆分级培养，将制备的二级种子液接种于发酵罐中。在发酵过程中，控制溶氧为30%～50%，温度为37℃；在基础培养基内生长4h后，补加以甘油为碳源的补料，继续生长到11h；加入葡萄糖至终浓度为1%，30℃诱导表达6h；收集菌体，纯化制备目的蛋白。利用Western印迹检测重组蛋白的抗原性，用CFU方法检测其生物学活性。结果：发酵液中最终菌体密度达80g/L；纯化所得重组蛋白约占菌体总蛋白的5%，含量为60mg/L；经鉴定所获重组颗粒溶素有较好的免疫学活性和生物学活性。结论：用含重组质粒pET28a（＋）-GNLY的大肠杆菌BL21（DE3）pLysS表达系统，可得到具有生物活性的重组颗粒溶素，为大批量生产提供了条件。

简介：利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因进行体外定点突变,并构建了含突变基因的重组质粒pPIC3.5K-lip-D92P.将该质粒在毕赤酵母GS115菌株中表达.与野生型表达产物PEL-GS相比较,突变体表达产物PEL-D92P-GS最适作用温度为45℃,比野生型提高了5℃;其热稳定性与野生型相当;突变体在40℃下的表达量为109U/mL,约为野生型的29%.结果分析表明,Pro替代Asp92后,可能是由于Pro一级结构的特点,使酶结构更加稳定,在高温下更适于与底物结合.

简介：原生质体转化法是丝状真菌转化的传统方法,但其过程繁琐且转化效率低.根癌农杆菌介导的转化方法原本是进行植物遗传转化的标准方法,但近年来发现该方法还可用于丝状真菌的转化.根癌农杆菌介导的丝状真菌转化具有操作简便、转化效率高、重复性好等优点,从而可以解决丝状真菌转化难的问题.在本文中,就其转化机制、特点和转化条件优化等方面的最新研究进展进行了综述.

简介：多基因共表达在多领域有重要的应用价值,大肠杆菌共表达系统包括多顺反子系统和双质粒系统,两者各有优缺点。多顺反子系统不需外界2种抗生素的同时存在,但操作较为复杂。通常认为,具有相同复制子的质粒是不相容的,但近来的实验表明,在双抗生素的选择压力下,不相容的双质粒系统也能稳定传代,且操作简单,周期较短。双质粒系统已经应用于生产、医学等各个领域。

简介：目的：从腾冲热海温泉中分离嗜热芽孢杆菌噬菌体，并初步分析其特征。方法：采用双层平板法分离纯化嗜热芽孢杆菌噬菌体，对分离得到的噬菌体进行电镜形态观察，按照感染复数（MOI）分别为0．01、0．1、1．0、10和100加入噬菌体纯培养液和宿主菌，55℃、160r／min培养8h后测定噬菌体滴度，并进行噬菌体的热稳定性和pH稳定性分析。结果：从腾冲热海温泉中分离得到的噬菌体为二十面体型；其感染宿主菌NHH4形成清晰的噬菌斑，最适MOI为1．0，最适感染温度为55℃，最适感染pH值为7．5。将这株噬菌体命名为TBIP1。结论：从腾冲热海温泉中分离得到的噬菌体TBIP1为典型的二十面体型，当MOI为1．0时，TBIP1感染其宿主菌产生的子代噬菌体滴度最高。

简介：促黄体激素释放激素(LRH)是动物下丘脑分泌的一种十肽,分子量为1180,通过调节脑垂体分泌LH和FSH以及直接作用于性腺发挥生理作用,在控制机体生长发育和性周期活动中具有重要作用。在畜牧业生产上,促黄体激素释放激素能有效诱导和加速排卵,促进发情,提高动物繁殖率,能有效治疗卵巢囊肿。目前生产普遍使用化学合成的LRH类似物,但成本高。如果能人工表达LRH,将会在畜牧业

简介：对双歧杆菌凝固型无糖酸奶的生产工艺进行了研究。采用接种双歧杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌3菌株进行发酵。确定最佳工艺条件为双歧杆菌发酵剂接种量5%、木糖醇6%于39℃条件下培养8h后,再接入接种比例为1:1、接种量为4%的保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌混合发酵剂,于42℃条件下培养3h。在此工艺条件下生产的酸奶风味纯正,凝乳状态良好,口感细腻,具有天然的奶香味。

简介：MDR1基因的表达量与肿瘤细胞的耐药性呈正相关且在多种肿瘤组织中都有过度表达。准确监测肿瘤病人MDR1基因表达情况对选择化疗方案和提高化疗效果有重要作用。在检测MDR1基因表达的方法中RT-PCR检测MDR1的过程中一般使用β肌动蛋白作为外参照,通过计算MDR1cDNA与β肌动蛋白cDNA的比值来表示MDR1基因的表达量。这样只能得到MDR1基因相对β肌动蛋白基因的表达量,而不能测出其绝对表达量。而且扩增

简介：目的确定地衣芽孢杆菌YTDY-01高产芽孢的培养基,为中试研究奠定基础.方法采用Plackett-Burman试验设计选取9种培养基原料,确定最佳原料,并通过单因素试验确定添加量.结果淀粉、豆粕、蛋白胨等原料对地衣芽孢杆菌YTDY-01产芽孢的影响显著（P〈0.05）,最佳添加量分别为淀粉0.5%、豆粕1%、蛋白胨1.5%,培养基优化后,芽孢数量可达78.3±6.4×108CFU/mL,显著高于初始培养基的芽孢数量（6.7×108CFU/mL）.

简介：采用聚合酶链反应从炭疽芽孢杆菌减毒株ＹＢ１中扩增其保护性抗原（ＰＡ）的编码区基因，将其克隆至ｐＧＥＭ－Ｔ载体中，并分步测定其序列。序列测定表明，该基因长２２０５ｂｐ，编码７３５个氨基酸残基，与文献报道的标准菌株Ｓｔｅｒｎｅ株的ＰＡ序列只有４个碱基的差异。

简介：目的：比较并评价涂片抗酸染色法（涂片法）、L-J培养法和基因芯片法在分枝杆菌检测中的应用价值。方法：对241例需查抗酸杆菌的临床标本,采用涂片法、L-J培养法和基因芯片法检测分枝杆菌,3种方法检测结果存在分歧的标本再进行DNA测序,以培养鉴定结果阳性或DNA测序得到分枝杆菌序列为确诊标准。结果：241例标本,涂片法、L-J培养法和基因芯片法的检测阳性率依次为18.7%、12.0%、15.8%,经卡方检验三者阳性率的差异没有统计学意义（P〉0.05）;检测灵敏度依次为85.4%、70.7%、93.0%,经卡方检验三种方法的灵敏度总体来说有差别（χ2=7.24,P〈0.05）,涂片法与L-J培养法以及涂片法与基因芯片法的灵敏度差异没有统计学差异,基因芯片法的灵敏度高于涂片法（χ2=6.61,P〈0.05）;检测特异性依次为95.6%、100.0%、100.0%。38例基因芯片检测阳性患者中有28例为结核分枝杆菌,10例为非结核分枝杆菌。结论：与涂片法及培养法相比较,基因芯片法能够鉴别分枝杆菌菌种,同时具有快速、可靠、准确度高的特点,在分枝杆菌感染的早期诊断和抗菌治疗上具有重要的临床价值。

简介：胆盐水解酶的特性及生理功能已成为研究热点。我们探讨了国内外关于双歧杆菌中胆盐水解酶的生化特性、降胆固醇机理及其生理作用几个方面的研究进展,以期对研究双歧杆菌胆盐水解酶,以及双歧杆菌及其制品的开发利用有一定的指导意义。

简介：目的：利用Mini—Tn5转座系统在葡糖杆菌中表达山梨糖脱氢酶（SDH）。方法：分离得到从山梨醇产糖的快生型小菌Y25K2，利用PCR方法扩增并分析快生型小菌的16SrDNA；构建pUT-mini—Tn5-Tet转座载体，将SDH基因（sdh）插入该载体，利用接合转移，将sdh整合至快生型小菌Y25K2的染色体，通过Western印迹检测SDH的表达。结果：16SrDNA鉴定结果初步表明快生型小菌为葡糖杆菌；构建得到pUT-mini—Tn5-Tet-sdh，将sdh整合至快生型菌Y25K2基因组，并检测到其在快生型小菌Y25K2中的表达。结论：利用Mini—Tn5转座系统在葡糖杆菌中表达了山梨糖脱氢酶。

简介：目的：通过在大肠杆菌中分段表达禽流感病毒聚合酶酸性蛋白（PA蛋白）,探索PA基因中可能影响表达的区域。方法：构建分段缺失的PA蛋白突变体,用IPTG在大肠杆菌RosettaGamiB（DE3）中诱导表达,比较各突变体的表达效率。结果：N端缺失长度在143～408个氨基酸残基之间的9个突变体在大肠杆菌中的表达水平较高;而突变体PA/K（Δ1-40aa）、PA/M（Δ1-56aa）、PA/N（Δ41-56aa）和PA/P（Δ57-75aa）的表达水平很低;全长PA蛋白和缺失N端20个氨基酸残基的突变体PA/L则检测不到表达。结论：PA基因的61～225bp和325～426bp可能是影响PA蛋白表达的2个重要区域,为下一步表达全长PA蛋白奠定了基础。

简介：引起人泌尿道感染的大肠杆菌(UPEC)的α-溶血素分泌系统属于Ⅰ型分泌系统，能够分泌一种RTX毒素蛋白-α-溶血素。近年来α-溶血素分泌系统的应用日益广泛，特别是在减毒活载体疫苗中呈递外源抗原。本文分析了大肠杆菌α-溶血素分泌系统的遗传特性，详细介绍了其基因的表达调控，为构建更加有效的分泌型载体提供了理论基础。