简介：摘要目的观察微小RNA(miRNA，miR)-98-5p靶向高迁移率族蛋白A2(HMGA2)对胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响并探讨其作用机制。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测GES-1、BGC-823、SGC-7901、MGC-803细胞(购自中国科学院上海细胞库和ATCC细胞库)中miR-98-5p的mRNA表达水平；构建绿色荧光蛋白(GFP)-NC和GFP-miR-98-5p慢病毒稳定细胞株，采用生物信息学和双荧光素酶报告基因验证miR-98-5p和HMGA2的靶向关系；采用蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中HMGA2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达；采用Transwell检测细胞的侵袭能力。组间比较采用t检验，计数资料采用率(%)表示，组间比较采用χ2检验。结果与GES-1细胞(1.94±0.16)比较，BGC-823(0.41±0.03)、SGC-7901(0.53±0.05)、MGC-803(0.50±0.04)细胞中miR-98-5p的mRNA相对表达水平下降，差异有统计学意义(t＝7.437、6.288、6.305，P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测显示，与GFP-NC细胞比较(1.77±0.12)，转染HMGA2-WT后GFP-miR-98-5p细胞(0.42±0.05)的相对荧光素酶活性下调(t＝6.701，P<0.05)，差异有统计学意义。Western blot结果显示，GFP-NC、GFP-miR-98-5p、GFP-miR-98-5p＋pcDNA和GFP-miR-98-5p＋HMGA2细胞中HMGA2的表达水平分别为2.15±0.17、0.44±0.05、0.46±0.04、2.30±0.19；Vimentin的表达水平分别为1.85±0.13、0.47±0.04、0.45±0.05、1.39±0.09；E-cadherin的表达水平分别为0.36±0.03、1.60±0.11、1.65±0.10、0.72±0.05。与GFP-NC细胞比较，miR-98-5p过表达细胞中HMGA2和Vimentin的表达下降，E-cadherin的表达增加(t＝8.032、7.981、8.692，P<0.05)，差异有统计学意义；Transwell结果显示，与GFP-NC细胞[(88.17±9.16)个]比较，GFP-miR-98-5p细胞[(33.34±5.53)个]的侵袭个数下降(t＝4.231，P<0.05)，差异有统计学意义；与GFP-miR-98-5p细胞[(34.66±5.39)个]比较，GFP-miR-98-5p＋HMGA2细胞[(62.51±7.03)个]的侵袭个数上调(t＝3.858，P<0.05)，差异有统计学意义。结论miR-98-5p在胃癌细胞中低表达，miR-98-5p过表达可通过靶向HMGA2抑制胃癌细胞的EMT，从而抑制肿瘤的侵袭和转移。

简介：摘要目的观察含有WW结构域的氧化还原酶(WWOX)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集南阳市中心医院2015年8月到2019年8月经手术切除的189例胃癌组织和癌旁组织作为研究对象，采用免疫组织化学分析WWOX蛋白的表达水平。采用过表达WWOX和对照质粒的慢病毒感染胃癌细胞SGC-7901，建立稳定细胞株，分为WWOX组和对照组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)分析两组细胞的增殖情况；采用Transwell分析两组细胞的迁移和侵袭水平。采用蛋白质印迹法(Western blot)分析两组细胞的细胞核增殖抗原(Ki-67)、黏着斑激酶(FAK)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和迁移侵袭抑制蛋白(MIIP)蛋白的表达水平。计量数据比较采用t检验。结果胃癌组织中WWOX蛋白水平(89.33±7.12)较癌旁组织WWOX蛋白水平(190.32±13.09)明显下降，差异有统计学意义(t＝3.142，P<0.05)。WWOX组细胞增殖(0.91±0.39)较对照组细胞增殖(1.79±0.51)显著下降，差异均有统计学意义(t＝2.901，P<0.05)。WWOX组细胞EdU阳性率[(39.78±5.44)%]较对照组细胞EdU阳性率[(87.51±7.01)%]显著下降，差异均有统计学意义(t＝3.182，P<0.05)。WWOX组迁移和侵袭细胞数量[(55.19±4.11)、(34.11±3.71)个]较对照组细胞迁移数量[(103.49±5.10)、(83.16±4.81)个]明显下降，差异有统计学意义(t＝2.710、2.372，P<0.05)。与对照组细胞Ki-67、FAK和MMP-2表达水平(1.21±0.15、0.83±0.11和1.28±0.20)比较，WWOX组细胞Ki-67、FAK、MMP-2和MIIP蛋白表达水平(0.69±0.12、0.31±0.09和0.71±0.15)明显下降，差异有统计学意义(t＝2.900、2.515，P<0.05；t＝2.879，P<0.05)。结论WWOX蛋白在胃癌组织中低表达，通过抑制细胞、迁移和侵袭起抑癌基因的作用。