简介:摘要目的明确多聚嘧啶序列结合蛋白(polypyrimidine tract binding protein, PTB)在正常人和骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)成骨分化中的作用及其机制。方法收集中国医学科学院整形外科医院收治的4例齿槽嵴裂患儿术后废弃骨髓血,原代分离培养人BMSCs并诱导分化为成骨细胞,RT-PCR和蛋白质印迹法检测PTB在诱导分化7 d和14 d的表达水平;应用shRNA技术对人BMSCs中PTB的表达进行敲减,茜素红染色和荧光定量PCR评价其对成骨分化的影响;体外分别应用浓度为10 ng/ml和40 ng/ml的肿瘤坏死因子α(TNF-α) 处理人BMSCs,荧光定量PCR和茜素红染色检测其对PTB表达及成骨分化能力的影响;流式细胞术检测人BMSCs经PTB敲减后细胞内活性氧(ROS)含量。10只6个月龄雌性SD大鼠采用随机数字表法随机分为卵巢切除骨质疏松模型组和假手术组,每组5只,荧光定量PCR检测其BMSCs中PTB的表达变化。各项定量数据以均值±标准差表示,2组间比较应用t检验,P<0.05为差异具有统计学意义。结果BMSCs成骨诱导分化7 d和14 d PTB表达显著升高,敲减PTB并成骨诱导14 d后,成骨标志基因RUNX2和ALP相对表达量显著下降,分别为对照组的0.74±0.15和0.29±0.18倍(t=3.490、P=0.039,t=7.983、P=0.004),且茜素红染色阳性的矿化结节形成减少。10 ng/ml TNF-α(t=3.528, P=0.039)和40 ng/ml TNF-α(t=4.306, P=0.023)均下调BMSCs中PTB表达,并抑制成骨分化。敲减PTB后BMSCs细胞内ROS含量(720.7±129.7)较对照组(1 204.0±300.1) 下降,差异具有统计学意义(t=4.872, P=0.040)。相比于假手术组(0.001 66±0.000 18),卵巢切除骨质疏松模型大鼠BMSCs中PTB的相对表达量(0.001 25±0.000 12)显著降低(t=3.217, P=0.032)。结论PTB的表达可促进BMSCs成骨分化,PTB敲减介导的ROS含量下调是其调控BMSCs成骨分化的一个重要机制。
简介:摘要:当今,我国经济发展十分迅速,随着建筑工程领域的不断创新与发展,安全问题越来越被重视,由于建筑工程多半为现场施工,因此应该更加注意施工安全问题。有助于全面提升企业的形象和社会地位。建筑工程施工比较复杂,一旦在施工过程当中出现了安全问题,将会影响整体施工的效率,同时还会给社会带来严重的负面影响,导致无法按时交工,影响整体施工计划。针对建筑工程施工现场的安全隐患问题,本文对现阶段建筑施工的安全管理影响因素进行分析,提出更加完整的监督管理策略,以及加强施工安全管理的有效措施,通过制定完整的安全管理体系、创新工作管库模式等方法为相关工作人员提供全面的参考。