简介:摘要目的探讨腺病毒介导的shRNA下调第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)表达对活化肝星状细胞(HSC)的纽蛋白(vinculin)、细丝蛋白A(filamin A)及皮层肌动蛋白(cortactin)的影响。方法体外培养活化大鼠肝星状细胞系HSC-T6,将携带靶向PTEN的RNA干扰序列[短发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)]的重组腺病毒Ad-shRNA/PTEN及对照空病毒Ad-GFP转染HSC;采用实时荧光定量PCR及Western blot技术检测各组HSC的PTEN mRNA及蛋白表达;借助激光扫描共聚焦显微镜,采用免疫荧光法检测各组HSC的vinculin、filamin A及cortactin表达变化,并利用Image-pro plus 6.0软件进行图像分析处理,计算所测蛋白荧光表达的积分光密度值(IOD)。实验分为3组:对照组(在腺病毒转染步骤以DMEM代替腺病毒液)、Ad-GFP组(转染仅表达绿色荧光蛋白的空病毒Ad-GFP)、Ad-shRNA/PTEN组(转染携带靶向PTEN的shRNA并表达绿色荧光蛋白的重组腺病毒Ad-shRNA/PTEN)。3组间均数比较采用单因素方差分析,组间比较采用LSD检验。结果靶向PTEN的shRNA成功转染并显著下调HSC的PTEN mRNA及蛋白表达(P < 0.05);HSC的vinculin主要表达于细胞质,Ad-shRNA/PTEN组HSC的vinculin荧光IOD (19 758.83±1520.60)较对照组(7 737.16±279.93)及Ad-GFP组(7 725.50±373.03)显著升高(P < 0.05),而对照组与Ad-GFP组之间HSC的vinculin荧光IOD差异无统计学意义(P > 0.05)。3组HSC的filamin A荧光IOD差异无统计学意义(P > 0.05),但3组HSC的filamin A亚细胞分布发生了变化,Ad-shRNA/PTEN组HSC的filamin A主要分布于细胞质,而对照组和Ad-GFP组HSC的filamin A主要位于细胞核,Ad-shRNA/PTEN组HSC的filamin A核质比(0.60±0.15)明显低于对照组(1.20±0.15)及Ad-GFP组(1.08±0.23),P < 0.05;而对照组与Ad-GFP组之间HSC的filamin A核质比差异无统计学意义(P > 0.05)。3组HSC的cortactin主要分布于细胞质,Ad-shRNA/PTEN组HSC的cortactin荧光IOD(54 688.50±2 095.53)较对照组(22 959.94±1 710.42 )及Ad-GFP组(22 547.11±1 588.72)显著升高(P < 0.05),而对照组与Ad-GFP组之间HSC的cortactin荧光IOD差异无统计学意义(P > 0.05)。结论PTEN表达下调使体外活化肝星状细胞的微丝结合蛋白vinculin及cortactin的表达上调,并使另一微丝结合蛋白filamin A的亚细胞分布发生改变即出现胞核向细胞质转位。
简介:摘要目的比较两种不同方法测定红细胞沉降率(erythroeytesodimentationrate,ESR)结果,探讨血沉检测架的临床价值。方法随机抽取98例住院或者门诊患者,同时用KJ828血沉检测架法和传统魏氏血沉测定法对患者的血沉结果进行测定,对两组结果进行比较和分析。结果当血沉<10mm/h时(t=0.677,p>0.05),两种方法测定结果无差异,但当血沉>10mm/h,后(t=2.432,p<0.02),两种检测结果存在显著性差异,手工法测定均值高于检测架法。结论血沉自动检测架法法对血沉结果<10mm/h数值标本测定结果与手工法接近,而在血沉结果>10mm/h的标本中存在差异性,血沉升高的标本要结合魏氏手工法结果进行报告。
简介:【摘要】目的:讨论基于家庭单元的延续性护理模式对老年心脏机械瓣置换患者术后使用华法林抗凝治疗的临床效果。方法:选取2022.1-2023.2在我院进行心脏机械瓣置换术并使用华法林抗凝治疗的老年患者56例,依据护理模式的不同将其随机分为对照组(28例,常规临床护理)和实验组(28例,基于家庭单元的延续性护理模式)。对比两组患者的用药依从情况和患者在术后治疗及护理过程中的生活质量(SF-36)。结果:实验组患者的用药依从性和SF-36生活质量都远高于对照组(p<0.05)。结论:对进行了心脏机械瓣置换术的患者应用基于家庭单元的延续性护理模式,可以有效降低患者在使用华法林抗凝治疗过程中的并发症发生风险,有利于提高患者的生活质量。