简介：摘要目的探讨Cfap65基因敲除对小鼠精子发生的影响。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Cfap65基因敲除小鼠；使用PCR和Sanger测序方法进行小鼠基因型鉴定；依据小鼠基因型将小鼠分为Cfap65-/-组（n=3）与野生型组（n=3）；生育力试验评估小鼠生育力；使用HE染色、免疫荧光、透射电子显微镜观察小鼠附睾精子与睾丸精子形态；使用定量实时聚合酶链锁反应检测Cfap65 mRNA在小鼠心、肝、脾、肺、肾和睾丸组织中的表达。结果Cfap65-/-组小鼠表现为完全不育，附睾精子数量减少和活动率低下，形态观察可见精子出现短尾、卷尾和尾部缺失，头部畸形率也显著高于野生型小鼠（1.67%±0.44%比33.00%±1.53%），差异有统计学意义（P<0.001）。Cfap65基因敲除导致小鼠精子领结构异常。Cfap65高表达于成年小鼠的睾丸、肺中；Cfap65在小鼠睾丸中的表达从4周龄到6周龄有一个急剧的增加（901.90±33.19比2 144.00±22.92），差异有统计学意义（P<0.001）。结论Cfap65表达具有组织特异性，缺失后导致雄性小鼠精子发生障碍，这可能与精子领运输障碍有关。
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