腹泻新病原艰难梭菌DNA提取方法的比较研究

目的：比较提取高质量艰难梭菌基因组总DNA的方法。方法：采用4种不同方法提取艰难梭菌基因组DNA，比较作为模板用于扩增艰难梭菌看家基因磷酸丙糖异构酶（tpi）基因的优缺点。结果：除沸水浴法，其他3种方法制备的艰难梭菌DNA均能成功用作PCR扩增的模板。CTAB／NaCl法进行提取可有效去除多糖成分，但操作要求较高。碱裂解法操作简便、省时、成本低经济可靠，提取的DNA量及纯度较合适；试剂盒抽提出的产物纯度和产量明显高于CTAB／NACL、碱裂解法（P〈0．05），但成本高。结论：四种方法各具优缺点，应根据实验室条件和实验要求进行选择。