TILLING技术应用于家蚕化学诱导突变检测的体系优化

TILLING（TargetingInducedLocalLesionsInGenomes）即定向诱导基因组局部突变技术，是近年发展起来的一种高通量检测点突变的反向遗传学方法。本研究从PCR模板量及酶切体系中CELI的酶量两个方面对家蚕TILLING技术的检测体系进行了优化。结果表明：本实验在应用TILLING技术筛选家蚕突变体过程中，用于PCR扩增的家蚕基因组DNA模板最佳用量为20ng；CELI酶切的20μL反应体系中，加入的最适酶量为0．5μL（本实验室从芹菜中自提的CELI酶10倍稀释液）。本研究初步对TILLING技术应用于家蚕化学诱导突变检测体系进行了优化，为TILLING技术在家蚕功能基因组研究中的应用奠定了基础。