养元固本膏初步安全性评价

郭晶晶

无锡市惠山区中医医院 214100

养元固本膏可以起到调理脾胃和补肾的作用，同时还可以提高身体的抵抗力和免疫力以及补气血的效果，对人体健康是比较有利的。为明确长期用药的安全性，根据药物安全性评价试验要求依次进行急性毒性试验、最大耐受量试验、长期毒性试验，综合考察养元固本膏的安全性。

1. 材料与方法

1．1 受试药物：

养元固本膏。 给药当天低、中、高剂量每次称取所需受试药物用灭菌纯化水配制成一定浓度的混悬液，现配现用。

1．2实验动物

SPF级SD大鼠90只(雌雄各半)，5-6周、体重140--200 g，购自北京维通利华实验动物技术有 限公司，许可证号：SYXK（苏）2021-0056，伦理审核编号为 JN.No20220615S0120718。饲养于屏障级动物实验室，雌雄分笼、每笼4只。

1．3 急性毒性试验方法

1．3．1 预试验

取健康大鼠15只，随机分成3组，每组5只，禁食不禁水12 h，按不同浓度同体积1ml/100g体重大鼠一次灌胃给药，给药组的2个浓度梯度分别为 0.5g/ml和3g/ml，对照组按同途径同体积灌胃生理盐水。给药后严密观察并记录4h 内动物的反应情况，并连续观察一周，期间详细记录大鼠的毒理反应情况和死亡情况并随机选出4只，剖检观察病变。

1．3．2最大给药量试验

当预试验无法测得LD50时，进行最大给药量试验。取大鼠10只，随机分为2组，每组5只，分开饲养，雌性未产无孕，常规实验观察3d 后进行试验。试验前禁食不禁水12h，给药组按大鼠最大耐受体积 1ml/100g体重灌以3g/ml浓度的养元固本膏溶液，空白组灌以生理盐水，1日内灌胃2次，每次间隔8h。给药后4h内，每30min观察一次；给药后4-8h内，每1h观察一次；给药后8-24h内，每4h观察一次，连续观测14d。

1．4长期毒性试验方法

1．4．1动物分组与处理

取60只大鼠，随机分为高、中、低3个剂量组(养元固本膏30、10、5g/kg三个剂量组)和空白对照组，每组15只，分笼饲养，实验前预饲养观察4d。高、中、低剂量组分别按3g/ml、1g/ml、0.5g/ml灌胃给药，空白对照组按同途径灌以生理盐水，各组均按不同浓度同体积1ml/100g体重灌胃，每天灌胃时间点一致。实验期间，每天称重后，给药一次，连续灌胃30天。

1．4．2观察指标

针对给药动物，观察其反应与生长情况，对其进行血液学检查、血清生化指标检查、剖检和组织学检查，计算其脏器指数。

1．5 数据处理

运用SPSSl7．0统计软件对试验数据进行组间单因素方差显著性检验分析。

2. 结果

2．1急性毒性试验

灌胃后30min内，大鼠表现出轻微的精神沉郁，不愿走动，但很快恢复正常，试验期问，除大鼠高剂量组个别大鼠偶尔稀便，犬中、高剂量组动物给药第2周于药后约l～24h出现一过性或间歇性不成形软便、少量或大量稀便(高剂量组较明显)，具明显剂量一反应趋势，未见其它明显毒性反应及异常；但停药后两种动物上述粪便性状及排泄均恢复正常。一周内亦未见死亡情况，剖检各脏器均正常。

2．2长期毒性试验

2．2．1给药后反应

各组大鼠灌胃当天表现出不同程度的、短暂的精神沉郁，不愿活动，之后行为和饮食均正常，皮毛整洁，无呼吸困难现象，粪便排泄正常，无腹泻或便秘现象，用药组与对照组比较无异常变化，无中毒或死亡现象。

2．2．2大鼠体重的变化

整体来看，给药前D0、停药后第1d、7d、14d的各组大鼠体重同期比较均无显著性差异(P>0．05)；其中停药后第7d、14d中、高两剂量组大鼠重量略低于其他各组。

2．2．3血液学指标的变化

停药后第1 d ，各组大鼠的RBC、HGB、PCT差异不显著(P>0．05)，但中剂量给药组的WBC、HCT数值最低。在停药后第14 d(表3．3)，各组RBC、WBC、HCT、NL、AL、BL、ML、LM血液学指标差异不显著(P>0．05)，其中HGB空白组明显增高(P<0.05)。

2．2．4血清生化指标的变化

停药后第1 d，各组大鼠的AST、ALT、ALB、BUN、CHOL、CREA、TG、GLU均无显著性差异(P>0.05)，其中空白组ALP水平异常高于其他三组，差异显著(P<0.05)，而TP略低。停药后第14d，各组大鼠血清生化指标均无显著差异(P>0.05)。

2．2．5脏器指数的变化

在停药后第1d各组大鼠的心、肝、脾、。肾和睾丸／卵巢指数均无明显差异(P>O．05)，空白组大鼠肺指数略高于其他三组。停药后第14d，各组大鼠的主要脏器指数基本无显著差异(P>0.05)

2．2．6 肉眼观察和组织病理学变化

剖检各组大鼠，发现主要脏器如肝、肾和肺等的形态、外观、大少和质地均无明显的病理变化。组织学切片观察，脏器组织均结构清晰，形态完整。

3.讨论

3．1 养元固本膏的急性毒性

以预试验中的最大给药浓度及受试动物的最大耐受体积，在24 h内连续灌胃2次，一天累计给药总量为60 g/kg，连续观察7天亦未见明显毒性反应。说明本养元固本膏基本属无毒性物质。

3．2 养元固本膏的长期毒性

在本次长期毒性实验中，各组大鼠的采食量正常，并没有出现厌食、异食的情况；从各组大鼠的神经系统、运动系统、消化系统、眼耳等感觉器官方面观察，并没有发现异常情况，因此我们可初步判断养元固本膏对实验动物大鼠的毒性很低。在本次实验中各组大鼠的AST、ALT、ALP、TP、ALB、CHOL、BUN、GLU等水平变化在同时期并无明显差别。在停药后Dl和D14，剖检各组大鼠，所有脏器的外观及肝肾等组织切片均未见明显的病理变化，说明养元固本膏对肝肾等脏器没有明显的毒性作用。

4. 结论

通过急性毒性试验可知养元固本膏基本属无毒性物质，其最大耐受量是临床用药量的72倍。长期毒性试验中，高、中和低剂量组大鼠生长状况、血液学指标、血液生化指标和脏器重量变化等均在可控范围内波动，因而无明显毒副反应。 综上，得知养元固本膏在临床用药中基本是安全的。

无锡市卫健委科研项目：项 目 名 称：养元固本膏治疗肾阳虚型慢性腰痛临床疗效观察

项 目 编 号：M202146