(浙江万里学院生物环境学院 浙江宁波 315100)
摘 要:以不同剂量的复合营养粉给小鼠连续灌胃30d,分别测定各项免疫指标。结果显示复合营养粉能促进小鼠的脾淋巴细胞增殖、转化作用,促进小鼠的抗体生成细胞增殖,提高小鼠的血清溶血素水平,促进小鼠的迟发型变态反应及其单核-巨噬细胞的吞噬功能,因此,可判定复合营养粉具有增强小鼠免疫力的作用。
关键词:复合营养粉;增强免疫力;小鼠
人体摄入的蛋白质不足会导致生理代谢紊乱、免疫功能下降、生长发育迟缓等相关疾病发生。人体蛋白质营养不良导致免疫力下降后出现的病症,采用补充蛋白质治疗后可以恢复[[1]]。牛磺酸可增强试验动物单核吞噬细胞的吞噬功能及提高体液免疫功能[[2]]。本实验探讨蛋白质粉与矿物质及多种维生素配伍对小鼠免疫功能的影响。
1 材料和方法
1.1样品及剂量设计 复合营养粉每100g含大豆分离蛋白16g、浓缩乳清蛋白11g、胶原蛋白粉11g、碳酸钙10g、牛磺酸4.8g、维生素C 1.6g、富铬酵母0.24g、维生素B1 0.09g、维生素A粉0.05g、维生素B6 0.04g、维生素D3粉0.02g、维生素B12粉0.0068g及部分辅料。人体推荐量为每人每日10g,设样品低、中、高剂量组0.835、1.67、5.01g/kg·BW(分别相当于人体推荐用量的5、10、30倍),设一个阴性对照组,每组10只动物。
1.2 实验动物与分组 SPF级健康昆明种雄性小鼠240只,体重为18g~22g,每40只小鼠为1组,共6组。免疫Ⅰ组,进行 ConA 诱导鼠脾淋巴细胞转化实验;免疫Ⅱ组,进行迟发型变态反应实验;免疫Ⅲ组,进行脏体比值测定,血清溶血素测定和抗体生成细胞数测定;免疫Ⅳ-Ⅵ组,分别进行碳实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验和NK细胞活性测定。
1.3 主要仪器与试剂 二氧化碳培养箱、紫外可见分光光度计、酶标仪等。绵羊红细胞 (SRBC)、Hank's 液(pH 7.2-7.4)、RPMI1640 培养液、小牛血清、ConA、吩嗦二甲酯硫酸盐、氧化型辅酶I等。
1.4 实验方法与数据统计 根据《保健食品检验与评价技术规范》-2003免疫功能检测方法及判定原则。应用SPSS统计软件进行方差分析统计处理。
2 试验结果
2.1 复合营养粉对小鼠体重的影响 不同免疫组的实验初期、实验中期、实验末期样品各剂量组的小鼠体重及实验期间小鼠的体重增长与阴性对照组间的比较,差异均无显著性(P>0.05),表明该样品对小鼠的体重增长无明显影响。
2.2 复合营养粉对小鼠免疫器官脏器/体重比值的影响
表1 免疫器官脏体比值(n=10)
剂量组/(g/kg.bw) | 胸腺/体重/% | 脾脏/体重/% |
5.01 | 0.208±0.016 | 0.392±0.049 |
1.67 | 0.214±0.019 | 0.393±0.023 |
0.835 | 0.215±0.013 | 0.406±0.050 |
阴性对照组 | 0.218±0.015 | 0.403±0.039 |
小鼠的胸腺/体重及脾脏/体重比值与阴性对照组比较,均无显著性差异(P>0.05),表明该样品对小鼠的免疫器官重量无明显影响。
2.3 复合营养粉对小鼠的细胞免疫、体液免疫的影响
表2 对小鼠细胞免疫、体液免疫的影响(n=10)
剂量组/(g/kg.bw) | 淋巴细胞增殖能力(OD值) | 耳壳增重(mg) | 溶血空斑数(1×10/104脾细胞) | 抗体积数 |
5.01 | 0.226±0.136* | 12.13±2.23** | 254.0±63.8** | 206.4±13.9* |
1.67 | 0.161±0.074 | 10.05±1.60 | 224.0±43.0* | 193.4±22.8 |
0.835 | 0.156±0.099 | 9.61±2.54 | 207.0±59.5 | 192.9±36.7 |
阴性对照组 | 0.097±0.039 | 8.83±1.30 | 159.0±39.3 | 176.1±24.3 |
注:与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01
高剂量组小鼠的淋巴细胞转化能力、耳壳增重与阴性对照组的差异具有显著性(P<0.05,P<0.01),表明该样品细胞免疫实验阳性。高、中剂量组小鼠的抗体生成细胞数与阴性对照组的差异具有显著性(P<0.01,P<0.05)。高剂量组的小鼠的抗体积数与阴性对照组的差异具有显著性(P<0.05)。表明该样品体液免疫实验结果阳性。
2.4复合营养粉对小鼠的单核-巨噬细胞吞噬功能、NK细胞活性的影响
表3 对小鼠的单核-巨噬细胞吞噬功能、NK细胞活性的影响(n=10)
剂量组/(g/kg.bw) | 吞噬指数a | 吞噬率/% | 吞噬指数 | NK细胞活性/% |
5.01 | 8.33±1.22* | 23.6±3.4* | 0.46±0.08** | 34.218.25 |
1.67 | 7.13±1.35 | 20.9±3.7 | 0.41±0.07 | 29.698.22 |
0.835 | 7.05±1.30 | 21.8±3.0 | 0.39±0.08 | 28.645.34 |
阴性对照组 | 6.79±0.90 | 20.0±2.1 | 0.34±0.05 | 26.087.72 |
注:与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01
高剂量组小鼠的吞噬指数a、腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率及吞噬指数与阴性对照组的差异具有显著性(P<0.05,P<0.01)。表明该样品对小鼠的单核-巨噬细胞吞噬功能实验结果阳性。样品各剂量组小鼠的NK细胞活性均高于阴性对照组,但各剂量组与阴性对照组的差异均无显著性(P>0.05),表明该样品对小鼠的NK细胞活性实验结果阴性。
3 结论
根据《保健食品检验与评价技术规范》,可判定复合营养粉对小鼠免疫功能有明显的增强作用。
参考文献
[[1]]林有坤.蛋白质营养不良症2例[J].广西医科大学学报,2001,18(1):44
[[2]]张秀珍,杜卫等.牛磺酸对小鼠免疫功能的影响[J].青岛医学院学报,1996,32(1):37-38