淋巴细胞亚群检测浅谈

陶毅森

平顶山市第一人民医院检验科 河南平顶山 467000

免疫系统是人机体执行免疫应答及免疫功能的一个重要系统。人体之所以能够在充满病毒、细菌及其他病原体的环境中正常生活，离不开一个正常的免疫系统。免疫系统由免疫器官和组织、免疫细胞及免疫分子组成。免疫细胞是指参与机体免疫应答的细胞，大致分为两类，一类能识别特异性抗原，一旦被激活则显示出特异性免疫应答的功能，主要指淋巴细胞亚群，包括T细胞，B细胞、NK细胞等，另一类主要是免疫辅助细胞，能够捕获异物，处理抗原，如中性粒细胞、树突状细胞、吞噬细胞等。我们这里所介绍的淋巴细胞亚群检测就属于对免疫细胞中的前一类进行检查和分析。

淋巴细胞亚群是人体发挥免疫功能的主角，主要包括B细胞、T细胞以及NK细胞。其中，B淋巴细胞是在我们的中枢免疫器官，也就是在骨髓中发育成熟，成熟的B淋巴细胞由骨髓释放，定居于外周淋巴器官的淋巴小结中，约占外周淋巴细胞总数的20%，主要参与体液免疫，也就是先天性免疫应答。T淋巴细胞，来源于骨髓中的淋巴样干细胞，在胸腺中发育成熟，约占外周淋巴细胞总数的50%-80%，T细胞具有高度的异质性，根据其表面标志和功能特征，T细胞可分为不同的亚群，如辅助性T细胞、杀伤性T细胞等，各亚群之间相互调节，共同发挥其免疫学功能。NK细胞即自然杀伤性细胞，来源于骨髓淋巴样干细胞，其分化、发育依赖于骨髓或胸腺微环境，主要分布于外周血和脾脏，在淋巴结和其他组织中也有少量存在。

淋巴细胞亚群检测就是利用流式细胞仪，根据各类淋巴细胞表面特异性抗原的不同，利用各种单克隆抗体与淋巴细胞表面的抗原结合，配合不同的多种荧光染料，通过流式细胞仪检测分析即可以把各种不同功能的淋巴亚群区分开来，进而得到各亚群的相对比例，通过已知数母的荧光标记微球即可以计算出各种亚群的绝对数目。这里主要阐述T淋巴细胞、B淋巴细胞及NK细胞的功能、细胞表面标志和临床意义。

1、T淋巴细胞表面标志（CD3+）：

于所有的T细胞表面表达，T细胞所共有的白细胞分化抗原。T细胞可介导适应性细胞免疫应答，在胸腺依赖抗原诱导的体液免疫应答中亦发挥重要作用。

（1）CD4+辅助性T细胞（CD4+Th细胞）：能够与MHCⅡ类分子β链的β2结构结合，具有辅佐或诱导免疫应答的功能，部分细胞也有杀伤和抑制功能；

① Th1细胞：主要分泌IL-2、IFN-Y、LT-α等细胞因子，主要效应是增强吞噬细胞介导的抗感染免疫，特别是抗胞内病原体的感染，另外还能特异性的杀伤病毒感染的靶细胞和肿瘤细胞，并能直接诱导靶细胞凋亡，促进炎症反应；

② Th2细胞：主要分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10等细胞因子，可促进B细胞的增值、分化和抗体生成，诱导和促进B细胞介导的体液免疫，对清除游离病原体起重要作用；

③ Th0细胞：兼具Th1和Th2的生物学活性。

④ Th17细胞：是由TH0细胞在IL-6和IL-23的刺激下分化而成的Th细胞，主要分泌IL-17、IL-22等促炎症因子。研究表明，IL-17与实验性自身免疫性脑炎(EAE)、哮喘、类风湿性关节炎(RA)等自身免疫性疾病相关。

（2）CD8+杀伤性T细胞（细胞毒性T细胞，Tc/CTL）：主要识别MHCⅠ类分子结合的内源性多肽抗原，具有杀伤靶细胞和抑制免疫功，Tc细胞识别抗原活化后释放胞内颗粒毒素、穿孔素perforin和颗粒酶granzyme杀伤靶细胞，Tc细胞在机体的抗肿瘤免疫、抗病毒感染、移植排斥反应和自身免疫疾病中均起重要作用。

2、B细胞表面标志：

CD19抗原是B淋巴细胞表面特异性标志，存在于从原始到成熟的B细胞，在B细胞活化后不消失，CD22只在成熟B细胞表达而在细胞激活后逐渐丢失。根据CD5的表达，将B细胞分为B1（CD5+）和B2（CD5-）两群。B细胞是机体的先天性免疫细胞，在抗原刺激下分化为抗体释放的效应细胞，反映机体体液免疫应答的能力。

3、NK细胞表面标志：

是一类独立的淋巴细胞群，不表达特异性抗原识别受体，无需抗原预先致敏即可直接杀伤某些靶细胞，包括病毒感染细胞和突变的肿瘤细胞。健康人外周血NK细胞占淋巴细胞总数的8%-15%。NK细胞表面有多种抗原CD2、CD16、CD56、CD69、CD94等等，均非其特有，目前多以CD3-CD16+CD56+作为其典型标志。

临床意义

1.CD3+细胞减少：见于恶性肿瘤；自身免疫性疾病；如系统性红斑狼疮，类风湿性关节炎；先天和获得性免疫缺陷病，如PID和艾滋病；接受放、化疗或使用肾上腺皮质激素等免疫抑制剂。

2.CD3+细胞增多：慢性活动性肝炎、重症肌无力等。

3.CD4+减少：

见于病毒性感染、恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、手术、创伤、烧伤、败血症、慢性免疫力低下者、应用免疫抑制剂等。

2、CD8+增多：

见于病毒感染、自身免疫病，如SLE、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤等。

3、CD4+/CD8+增高：

表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态，容易出现自体免疫反应，见于类风湿关节炎、1型糖尿病、系统性红斑狼疮、移植排斥反应等。

4、CD4+/CD8+降低：

称为“免疫抑制”状态，常见于

①艾滋病，免疫缺陷时比值常显著小于0.5；

②恶性肿瘤；

③再生障碍性贫血、某些白血病；

④某些病毒感染：如传染性单核细胞增大症，CD4+/CD8+降到1.0以下为倒置，是较为明显的异常，若移植后比值较移植前明显增加，则可能发生排斥反应。

5、NK细胞（CD3-CD16+和/或CD56+）

能够介导对某些肿瘤细胞和病毒感染细胞的细胞毒作用。

总结：

人类几乎所有疾病的发生和发展都与机体免疫状态和免疫功能的正常与否有很大关系，所以免疫状态是机体是否罹患疾病的重要参考目标，淋巴细胞亚群的测定是检测机体细胞免疫功能的重要指标。淋巴细胞亚群测定及各亚群绝对计数能精确定义区分细胞免疫的不同构成组分的数量和比例，评估病人的免疫状态，可辅助诊断及鉴别、了解发病机制，指导治疗及判断预后，特别对于感染性疾病、自身免疫性疾病、血液病和肿瘤等疾病具有指导意义。