微生物高通量快速检测技术的优势有哪些？

 黄春红

 重庆市忠县人民医院  检验科   404300

微生物感染性疾病在临床上具有很高发病率，且类型多种多样，病情严重度不一，对人们生命健康安全产生重大威胁。不断出现的新型微生物和已知微生物的变异，促使临床检验更加注重寻找新型微生物检验方法。本文下面详细说一说微生物高通量快速检测技术的优势，以便为临床检测提供一些参考。

一、分子生物学技术

分子生物学属于新兴学科之一。生命科学的发展和进步，大大提高人们对微生物体的认知水平。分子生物学技术能够立足分子水平，将诊断依据提供给医师，且已经实现与其他学科技术的融合。通过对分子生物学技术的应用，能够突破微生物快速检测的限制，除了检测微生物生理特征和外部结构外，还能够进一步探索和开发细胞结构、核酸、分子结构，促进核酸杂交技术与聚合酶链反应的产生，大大提高微生物检测灵敏度、可靠性。现阶段已经被广泛应用于临床实践中。基因芯片是一种新兴分子生物学在微生物检测中应用的典型方法。此技术的优势是无需应用大量样品，可以迅速高效检测，不足是成本比较高、芯片灵敏度低、芯片特异性不足。然而，此技术能够检测出耐药性细菌的耐药基因，进而将抗耐药的抗生素研制出来，推动抗感染药物的进步与发展。

二、免疫学技术

这是临床一种常见检测技术，其原理是通过对抗原抗体特异性反应的运用，采用定量定性方式观察和分析组织细胞与特定抗原。想要获得良好观察效果，需将抗原抗体反应充分展示出来，一般在检测之前，利用抗原抗体与标记物结合法，将物质的酶或荧光有色反应标记出来，借助电光镜可对抗原抗体实施定量与定性分析操作。现阶段，很多病原微生物实验室都应用了免疫学技术，这种检测技术比较成熟，主要包括放射免疫分析、荧光免疫分析、化学发光免疫分析、含酶免疫分析等。

三、细菌毒素技术

细菌毒素是一种致病性毒素，主要由细菌导致，通常分为两种类型，即内毒素、外毒素，外毒素指分泌到菌体外的毒素；内毒素指包含在菌体内，破坏菌体后释放而出的毒素。毒素毒力大小对致病性强弱具有决定性影响，不同细菌的毒素存在很大差异。由此看来，借助细菌提取检测毒力大小，可以将细菌类型判断出来，并且检测结果具有高度准确性，有利于培养细菌。现阶段，国外已经上市毒素VT-1和VT-2试剂，菌体裂解后，只需要培养24小时此试剂和释放出的毒素，就可通过肉眼判断出毒素的凝集与否，简单方便快速。

四、生物传感器技术

这是一种全新检验技术，它将分子诊断技术与传感器技术结合起来，符合临床诊断未来发展趋势。生物传感器包括两个主要部分，换能器、分子识别器。生物传感器技术具有广阔的应用范围，主要包括筛选药物、检测食物、临床诊断、分子互相作用等，并且获得巨大成功，特别是其具有显著优势，如操作简单、检测准确、快速等，已经被应用于各大实验室中。临床上普遍应用的病毒微生物检测传感器就是DNA生物传感器，它可以对很多病毒和细菌进行监测，充分发挥检测微生物的作用。对比常规核酸检测，生物传感器在检测待测微生物方面的准确性更高，并且操作方便，在临床检验中推广难度小，同时能够促进其深入发展。

五、流式细胞术

流式细胞术是一种比较先进的方法，它是光学、细胞化学、免疫学、流体力学等艺术的综合，以功能水平为基础，深入分析细胞物理或化学性质。流式细胞术的优势是可以同时对上万个细胞进行分析，能够对临床中逐个、快速、多参数测定大量细菌需求进行满足。现阶段，此技术已经被应用于检测药品、监测水质等方面。因为流式细胞术可对微生物活性与功能状态进行检测，所以，相比致病菌，在有益菌中的应用更多，缺点是运行具有很高成本，同时提出液体样本要求，大大缩小临床应用范围，未来需要深入开发。

六、自动化培养鉴定技术

这是一种传统微生物检验技术，主要包括生化鉴定、涂片、染色等检测法，缺点是耗费大量时间，操作复杂繁琐，无法对当前临床治疗需求进行满足。想要解决以上问题，各种自动化培养仪和鉴定系统应运而生，有利于促进传统检验法的完善。首先，微生物鉴定专家系统。不同微生物具有不同酶系统，分解的物质存在差异，由此看来，间接检测微生物法可以对不同底物的不同代谢产物进行检测。通过对菌类特殊生化反应的利用，将具有不同工作原理的鉴定系统构建出来，促进不同微生物鉴定专家系统的形成。一般情况下，很多鉴定系统都通过利用底物后，反应液中色原性、PH或有无酶解变化出现等方法开展判断工作，主要步骤是在对应鉴定卡中注入待测细菌制成的悬液，系统定时对培养箱中悬液进行扫描，同时比较阳性阈值，借助计算机将数据分析出来，促进鉴定报告的生成；其次，血培养仪。以传统血液细菌培养法为基础，将双向增菌培养瓶添加其中，将转种过程省略，直接生成细菌菌落，当指标确定为感应产生的二氧化碳，促进检测灵敏性的提升，实现快速诊断目标；最后，培养分枝杆菌。以荧光标记检测系统为基础，借助持续不断发展，促进全新检测系统的形成，全力配合检测荧光、产生二氧化碳与改变气体压力，最终将生物学特性在短时间内检测出来，提高数据处置的有效性。

总而言之，现代医疗环境的改变和生物技术的迅速发展，更加突出快速精准诊疗重要性，同时提高临床对此方面关注度。临床具体实践中，新型微生物快速检测技术具有明显优势，主要包括高通量、操作便捷、成本很低等。以后还要实现更多突破，比如，提升检测精准率，缩短培养分离时间等。现阶段，大部分新型微生物检测技术正处于研发与评估时期，只有很少技术比较成熟。由此看来，有必要全力以赴研发和优化现有技术，争取早日获得临床方面肯定，并且以优异性能取得上市机会。