半枝莲中总黄酮提取工艺研究

董伊雪,王诗媛,赵佳乐,王文浩,国雅馨,侯敏娜*

 陕西国际商贸学院, 陕西咸阳 712046

摘  要：以总黄酮的提取率作为评价指标，通过乙醇体积分数、液料比和提取时间三个因素优选最佳半枝莲中总黄酮提取工艺参数。结果表明，乙醇体积分数65%，液料比35:1ml/g，提取时间50min，为最佳。本实验提取工艺方法简便，工艺可行性强，为半枝莲药材开发及临床应用提供参考和实验基础。

关键词：半枝莲；总黄酮；提取工艺

半枝莲为唇形科植物半枝莲（Scutellaria barbata D. Don）的干燥全草，主要生长于浙江、江苏、安徽、河南、四川等地，始见于《外科正宗》，具有清热解毒，化瘀利尿。用于疔疮肿毒，咽喉肿痛，跌扑伤痛，水肿，黄疸，蛇虫咬伤的作用。目前已从半枝莲中分离得到萜类、黄酮类、多糖类以及挥发油类等化学成分，本实验对半枝莲中总黄酮提取工艺参数优选研究，以扩展其临床应用、

1 实验材料

紫外检测器（北京网元鼎信科技有限公司）；高效液相色谱仪（岛津）；电子天平（上海金友试验设备有限公司）；微型高速粉碎机（姜堰市银河仪器厂）；恒温水浴锅（上海金友试验设备有限公司，恒温水浴锅）。

半枝莲，经本校中药实验室的雷国莲教授鉴定其为唇形科半枝莲(Scutellaria barbata D. Don）的干燥全草。

2实验方法与结果

2.1原料预处理

分别将半枝莲与白花蛇舌草干燥药材粉碎，过50目筛，装入自封袋备用。半枝莲药材粉末→按照因素水平表设计条件超声处理→过滤，收集滤液，即为所得半枝莲黄酮提取液。

2.2标准曲线制备

精密称取芦丁对照品20.0mg，甲醇溶解定容至100ml量瓶中，制成0.2 mg/ml

 

芦丁对照品溶液。

精密移取 0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 ml的芦丁标准溶液（0.2 mg/ml）分别置于10 ml具塞比色管中，加入70%乙醇溶液使溶液总体积为3.0 ml。摇匀后依次加入 5% NaNO2溶液0.7 ml，10% Al（NO）3溶液0.7 ml，10% NaOH溶液5.0 ml，最后以 70%乙醇定容至刻 度并摇匀静置 15 min。以空白试剂为参比溶液，测定490 nm波长处的吸光度。以芦丁浓度C（mg/ml）为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线，得到回归方程Y=0.0177X-0.0025，R2=0.999 8。表明在芦丁对照品溶液浓度在0.01 mg/ml ~0.06 mg/ml 浓度范围内，浓度与吸光度呈现良好线性关系。

2.3乙醇体积分数对总黄酮提取率的影响

称取半枝莲粗粉1.00 g，在60分钟的设定时间内，研究30%、45%、50%、65%、80%和95%的乙醇体积分数对于对总黄酮提取率的影响。结果发现，乙醇浓度为30%到65%的条件下呈逐渐增长走势，但持续升高至65%以上时，提取率反而开始下降。分析原因是由于乙醇浓度过低时，溶剂的极性太强，提取的黄酮类化合物不够多；而浓度过高时，溶剂的极性太强，提取的黄酮类化合物不够多，所以黄酮类化合物的提取率受到半枝莲和白花蛇舌草中脂溶性物质和糖类的逐渐浸出的影响。这意味着65%的乙醇更适合于提取总黄酮。

2.4 液料比对总黄酮提取率的影响

称取半枝莲粗粉1.00 g，在60分钟的设定时间内，研究5:1、15:1、25:1、35:1、45:1、55:1的不同液料比对总黄酮提取率的影响。结果发现，提取率会随着所加溶剂的量的改变而发生相应的变化。在液料比35:1 mL/g处会达到峰值，之后增加幅度不明显，故液料比确定为35:1为最佳。

2.5 提取时间对总黄酮提取率的影响

称取半枝莲粗粉1.00 g，在60分钟的设定时间内，研究20、35、50、65、80、95min不同超声时间对于对总黄酮提取率的影响。结果发现，提取时间为50min 时总黄酮含量最大而后趋于平稳递增趋势，说明一定时间后，提取率不会有显著增长，故选择50min提取时间。

2.6最优试验因素参数组合选择与验证试验

为了确定提取工艺参数的最佳条件，即称取半枝莲药材5.000g，加入65%乙醇175ml，提取时间50min。为了达到较低的试验误差，在相同条件下重复试验三次，取平均值，最后得到总黄酮提取率8.840%，这说明该实验具有较高的可行性。

3结论

在本次研究中，通过超声波提取法从半枝莲药材中提取总黄酮，以总黄酮提取率作为评价指标，通过单因素试验确定了最佳工艺参数：乙醇体积分数65%，液料比 35:1，提取时间50min。在验证性试验中测得的实际总黄酮提取率为8.84 %，这为半枝莲药材进步开发利用提供参考。

参考文献

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基金项目：2021年陕西省大学生创新创业训练计划项目（编号：S202113123029）

作者简介：董伊雪，女，陕西国际商贸学院医药学院药学2019级，E-mail:[e-mail]

*指导教师简介：侯敏娜（1981-）,女（汉），副教授，硕士，主要研究方向：中药药效物质基础研究，E-mail:[e-mail]