四川大学化学工程学院 成都 610207
摘要:本文以分两年在同一时季同一地区(福建漳州平和县南胜镇)采摘的不同体积大小(直径1.0-1.5cm;1.5-2.0cm;2.0-2.5cm;2.5-3.0cm)的蜜柚幼果进行检测分析,得出蜜柚幼果体积越小,所含柚皮苷越高的关系。这一研究结果对果农疏果时采摘高质量高价值的幼果具有重要的指导意义,并对按照幼果体积大小进行分类工业化生产得出不同收率的柚皮甙有重要的实用价值。
关键词: 蜜柚幼果 柚皮甙 高效液相色谱法 含量
一、蜜柚幼果与柚皮苷简介
蜜柚(Honey pomelo),又名香抛,系柚子优质品的一种。多见生长于南方,并以福建漳州平和所产柚子最为著名。蜜柚幼果(简称为柚果)为蜜柚在4-5月疏果时采摘或自落的果实,经晒干或低温干燥制得,主要含有柚皮甙、新橙皮甙、挥发油等成分1。
柚皮甙2,Naringin,异名:柚苷,柚皮苷,柑橘苷,异橙皮甙。分子式:C27H32O14
分子量:580.53。柚皮苷具有抗炎、抗病毒、抗癌、抗突变、抗过敏、抗溃疡、镇痛、降血压活性,能降血胆固醇、减少血栓的形成,改善局部微循环和营养供给,可用于生产防治心脑血管疾病。
二、实验方法与结果
工作对照品标定使用的法定对照品信息
法定对照品单位 | 中国食品药品检定研究院 |
含量 | 93.5% |
批号 | 110722-202116 |
1.2 仪器设备:
Agilent1260II高效液相色谱仪(VWD检测器);奥豪斯电子分析天平(十万分之一); 浙江永康太阳机电公司高速功能粉碎机(LDP-1000A型); 超声波清洗器;针筒式过滤器(有机系0.45um)等。
1.3 试药:
分别于2021年、2022年4月下旬,从中国蜜柚之乡的福建漳州平和县南胜镇采摘体积约2-5cm的鲜幼果约5000g,在600C-800C下烘干至水分15%以内,用3.0cm; 2.5cm;2.0cm;1.5cm;1.0cm直径的筛网过筛而得。(注:体积在2-5cm的鲜果为疏果和自然落果的集中段,太小体积的疏果和落果很少,收集意义不大,太大则不会疏掉或落下,而长大成蜜柚。此体积的鲜果烘干后的直径大小则集中在1.0cm-3.0cm左右)
2.1色谱条件
色谱柱 | 规格型号: C18;150mm×4.6mm×5µm |
柱温 | 50℃ |
流速 | 1.5ml/min |
流动相 | 流动相:乙腈:水(20:80),用磷酸调节PH=3.0 |
检测器及波长 | VWD/PDA检测器;检测波长为283nm |
进样量 | 10ul |
2.2供试品的前处理:
均匀混合后称取柚果200g粉碎至40目,经均匀混合后待用。
2.3 供试品溶液的制备
精密称取供试品200mg置具塞锥形瓶中,精密加入50ml甲醇,称定总重量,78℃回流1.5h,放冷至室温,再称定重量,用甲醇补足减失重量,摇匀,过滤至50ml容量瓶中,精密量取续滤液10ml至25ml容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,既得。
2.4对照品溶液的制备
称取柚皮苷对照品约20mg,置25ml量瓶中,用适量甲醇超声溶解,用甲醇稀释至刻度线,摇匀作为对照品溶液A,精密移取对照品溶液A10ml至100ml容量瓶中,用甲醇稀释至刻度线得到对照品溶液B。
2.5含量计算:按外标法计算
----------------为供试品的峰面积;
--------------------为工作对照品的标定含量%;
--------------------为工作对照品取样量(mg);
------------------为工作对照品的平均峰面积;
----------------------为供试品取样量(mg);
2.6样品含量测定:
分别取2021、2022年四种体积大小的试药样品,混合均匀后,按上述供试品的前处理方法处理后,分别抽取三个样品共二十四个样品,按照上述方法制备溶液,同法测定,计算样品中柚皮甙的含量。
3.1. 表一:
采摘时间 | 体积(直径)/cm | 柚皮甙含量/% | 平均含量/% | |
2021年4月 | 1.0-1.5 | -1 | 38.81 | 39.74 |
-2 | 39.71 | |||
-3 | 40.70 | |||
1.5-2.0 | -1 | 35.82 | 35.79 | |
-2 | 35.18 | |||
-3 | 36.36 | |||
2.0-2.5 | -1 | 32.95 | 32.51 | |
-2 | 31.02 | |||
-3 | 33.56 | |||
2.5-3.0 | -1 | 25.71 | 26.50 | |
-2 | 28.77 | |||
-3 | 25.02 | |||
2022年4月 | 1.0-1.5 | -1 | 40.60 | 39.59 |
-2 | 38.49 | |||
-3 | 39.69 | |||
1.5-2.0 | -1 | 34.88 | 34.83 | |
-2 | 35.61 | |||
-3 | 34.01 | |||
2.0-2.5 | -1 | 31.26 | 31.49 | |
-2 | 31.02 | |||
-3 | 32.20 | |||
2.5-3.0 | -1 | 26.78 | 26.25 | |
-2 | 25.98 | |||
-3 | 25.99 |
3.2.图一:
柚皮甙对照品高效液相图谱
柚皮甙供试品高效液相图谱
3.3结论:
从表一可见:同体积规格大小的柚果在同组数据差距较小,说明检测较为准确,数据可采信;同体积规格大小的柚果在2021年和2022年的数据差距较小,说明年度影响柚皮甙含量的因素较小;不同体积规格大小的柚果对柚皮甙的含量影响较大:1.0-1.5cm体积的柚皮甙含量最高,集中在39%左右的含量;1.5-2.0cm的柚皮甙含量其次,集中在35%左右;2.0-2.5cm的柚皮甙含量较差,集中在32%左右;2.5-3.0cm的柚皮甙含量最差,集中在26%左右。规格间的差距在10%以上,最大体积规格和最小体积规格的柚果之间柚皮甙含量的差距高达50%。
三、讨论
根据以上梯度实验的结果可以得出结论:柚果体积越小,柚皮苷含量越高,其提取收率也就越高,经济价值也越大。到目前为止,对不同种类的柚果、不同产地的柚果中的柚皮苷含量,以及从柚果中提取柚皮甙的工艺研究有较多文献报导,但对最大柚果产地的漳州蜜柚幼果的体积大小对柚皮甙含量多少的影响却鲜有相关研究报导。另一方面,据了解果农对疏果和落地果的收集,和加工工厂采购也没有进行规格质量的区分,带来很大的经济损失。所以,这一研究结果对果农疏果时和收集落地果时,采收高质量高价值的柚果具有重要的指导意义,并对按照柚果体积大小进行分类工业化生产得出不同收率的柚皮甙有重要的实用价值。
但对随着柚果体积变大,其中的柚皮甙含量会随之降低的原因分析,还需深入研究。
参考文献
[1]中药活性成分分析手册(现代中医药文库)ISBN7-5077-2.上册P397.
[2]https://baike.so.com/doc/835487-883580.html 360百科 柚皮甙
[3]庞瑞、杨中林 不同产地不同品种柚皮中柚皮甙总黄酮和柚皮甙的含量比较.[ ].药学与临床研究,2007,15(3)207
[4] 曾森.桑叶多糖提纯工艺及质量控制研究.[J].时珍国医国药.2011.
[5] 杨爽 苏智先 柚类果皮中柚皮甙含量的测定分析 绵阳师范学院 May.,2007.Vol26N5