一例鸡安卡拉病与细菌混合感染的诊治

杨雪贞

天柱县动物疫病预防控制中心 贵州省黔东南州 556600

摘要：为确诊贵州省天柱县某养鸡场的发病原因，通过流行病学调查、临床解剖症状观察、细菌分离培养、药物敏感试验、相关病毒核酸检测进行诊断。结果:病鸡精神沉郁，羽毛蓬松，拉黄绿色稀便，个别出现突然死亡；剖检可见心包积液，肺水肿，肝、肾肿大，输尿管上尿酸盐沉积；组织样品中分离到革兰氏阴性短小杆菌，且对硫酸安普霉素敏感；相关病毒核酸检测出安卡拉病毒为阳性，其他病毒检测为阴性。结论:该病例诊断为鸡安卡拉病毒与细菌混合感染。通过对鸡群隔离、环境消毒、紧急接种卵黄抗体并配合药物治疗，病情得到有效控制。

关键词：鸡；安卡拉病；细菌病；混合感染；诊治

1. 引言

鸡安卡拉病毒属于禽腺病毒Ⅰ群C种4型（FAdV-4），主要引起心包积液和肝炎，又称为心包积水-肝炎综合征^[1]。最早发现于巴基斯坦卡拉奇Angara地区，1997年我国首次报道有该病发生，2011年逐渐在河南、北京、吉林、山东等地蔓延，2016年以来贵州省也有多个禽养殖场出现该病。该病没有明显的季节性流行，常年发生。主要感染3-6周龄肉鸡，可经母源垂直传播也可以通过环境水平传播，一般死亡率在20%-80%。病鸡和带毒鸡是主要的传染源，康复鸡群可反复发病，终身带毒^[2]。近年来，该病的流行对禽养殖业带来重大经济损失。

2. 流行病学调查

2020年5月，贵州省天柱县某鸡场有红瑶15000羽，公母混养，75日龄。大雨后，发现不明原因死鸡逐渐增多。鸡群整体状态没有明显异常，采食量也未见变化，少数有呼吸道症状，甩鼻、呼吸加快、有啰音。个别精神沉郁，羽毛蓬乱，拉黄绿色稀便。

养殖户反应，鸡群受惊后，个别看起来很健康的鸡扭脖踢腿，几分钟内死亡。使用阿莫西林、硫酸粘菌素、氟苯尼考粉等药物治疗。用药第一天，死亡数急剧增加；第二天，死亡数较未用药少；第三天、第四天，未见治疗效果。鸡群已免疫接种传染性法氏囊、新城疫、传染性支气管炎、禽流感、鸡传染性喉气管炎等疫苗。

3. 临床解剖症状

挑选刚死亡和将要死亡的病鸡解剖观察病理变化。剖检可见心包内积有大量淡黄色液体，划开包膜，有的呈胶冻样。肝肿大，边缘钝圆，质地变脆，色泽偏黄，表面有出血点。肾脏肿胀，成大理石纹样，输尿管上尿酸盐沉积。个别肺脏出现水肿，腹腔肠系膜上有豆腐渣样干酪物，腺胃肿大，腺胃乳头点状出血且有黄色浓稠液体流出。其他脏器未见明显临床症状。

4. 实验室检测

4.1细菌分离培养

在无菌条件下，采集刚病死鸡的心脏、肝脏和脾脏组织接种于鲜血琼脂培养基，37℃培养24 h，挑取单个菌落再次进行纯培养并观察菌落形态、革兰染色镜检。

结果显示组织样品中均分离到细菌，菌落湿滑圆润，镜检观察为革兰氏阴性短小杆菌，初步鉴定为肠杆菌科细菌（如图1所示）。

图 1 细菌分离培养结果

4.2药敏试验

参考有关文献^[3]，用纸片琼脂扩散法对分离细菌进行药物敏感试验。分离到的细菌100 µL均匀涂布于营养琼脂培养基，将药敏片贴在培养基上，相邻药敏片间隔50mm,37 ℃恒温倒置培养20h。游标卡尺测量抑菌圈直径，抑菌效果判定结果（参照杭州微生物试剂有限公司提供的标准）见表1。

表1 分离细菌药敏试验结果（毫米）

药物名称	抑菌圈大小（直径 mm）	药物名称	抑菌圈大小（直径 mm）
福米特（20%替米考星）	17	硫酸安普霉素	20
联庆（10%硫酸粘霉素）	0	支安（80%延胡索酸泰沙菌素）	0
力奇（10%盐酸多西环素）	7	喘速康（10%盐酸大观霉素+5% 盐酸林可霉素）	15
阿莫西林	0	磺胺甲氧嘧啶	0
新呼畅（50%酒石酸泰乐菌素）	15	泰利达	10

由表1中数据可见，分离细菌对硫酸安普霉素敏感，对替米考星、泰乐菌素、喘速康（10%盐酸大观霉素+5%盐酸林可霉素）中敏，对硫酸粘菌素、延胡索酸泰沙菌素、阿莫西林、磺胺甲氧嘧啶等不敏感。

4.3相关病毒核酸检测

无菌操作，分别采集2只病死鸡的心包积液、肝脏、肺脏、脾脏和气管组织，加入适量的 PBS，剪碎、研磨、混匀，离心取上清。用核酸提取仪及核酸抽提试剂盒（杭州博日）提取病毒核酸（DNA/RNA）。

参照相关文献^[4、5]中描述的方法对腺病毒（FAdV-4 366bp）、鸡传染性喉气管炎病毒（ILTV）进行 PCR 检测，结果显示：病死鸡样品中仅有1只检出腺病毒（FAdV-4 366bp）目的条带，其余病毒核酸检测均为阴性，说明病鸡存在 FAdV-4 感染（如图2、3所示）。

按照试剂盒（青岛立见）使用说明书，用荧光 RT-PCR检测新城疫病毒（NDV）、禽流感（AIV）病毒，检测显示新城疫病毒、禽流感病毒为阴性。

图 2 M: 2000bp 分子质量标准；-: 阴性对照；

+: 阳性对照；1-2: 送检样品

图 3 M: 2000bp 分子质量标准；-: 阴性对照；

+: 阳性对照；1-2: 送检样品

5. 诊断

根据流行病学调查、临床症状、病理变化和实验室检测，诊断该鸡场病例为鸡安卡拉病毒与细菌性疾病的混合感染。

6. 治疗

该鸡场采用的治疗方案如下：（1）对鸡群紧急隔离、环境消毒、淘汰病残弱鸡，加强鸡群生物安全防控。（2）紧急注射卵黄抗体，为鸡群提供被动免疫。（3）使用硫酸安普霉素、替米考星、泰乐菌素等限时饮水，治疗鸡群感染的细菌病。（4）大青叶、牛磺酸、多种维生素配合拌料饲喂，增强机体抗病毒能力。（5）肝胆颗粒、黄芪多糖、葡萄糖兑水一天一次保肝护肾，增强鸡群抵抗力。

连续用药2天后，死亡数开始下降，5天后停药，死亡数3只。停药后病死鸡逐渐减少，病情得到有效控制。

7. 讨论

（1）安卡拉病发病症状不够典型，临床上易忽略或误诊。该病还易与球虫病、鸡传染性喉气管炎、传染性法氏囊病等混合感染，或者继发大肠杆菌、禽霍乱等细菌性疾病。混合感染时，相应内脏器官均会出现病变，且极易出现误诊情况，错过最佳治疗时机。

（2）禽腺病毒血清型众多，我国当前市场上还没有正式用于预防该病毒病的疫苗，也没有针对该病治疗的特效药。大量文献提出注射高免卵黄抗体效果明显，也有报道复发率较高^[6]。实际生产中应结合临床症状综合用药，以抗病毒、保肝护肾、强心利尿、控制继发感染为治疗原则^[7]。

（3）临床上治愈鸡安卡拉病的案例很多，但死亡率大，成本偏高。鸡群一旦发现感染FAdV，应及时确诊并隔离治疗发病个体，防止疫情扩散蔓延；而对于发病中晚期的鸡群，建议直接淘汰。除良种繁育场外，对于商品养殖场来说，该病的治疗意义不大，最主要的防控措施是前期疾病预防和科学的管理措施。

参考文献：

[1]李梅1，杨鹏1，岳筠2，宋春1，成虹松1，陈静1，尹德晶1，张双翔2，程振涛1，李凤龙3.鸡毒支原体与鸡安卡拉病毒混合感染病例的实验室诊断[J].贵州畜牧兽医.2021,45(3)：36-38.

[2]卢永娟.鸡安卡拉病毒与球虫混合感染病例的诊治[J].中兽医学杂志.2021,(3)：74-75.

[3]马光强1，刘丽娟1，文明1,2，程振涛1,2，周碧君1,2，岳筠3，李毅3.一株猪丹毒杆菌的分离与鉴定[J].黑龙江畜牧兽医.2017,(1)：186-190，297.

[4]汪忠荣1，杨通莲2，杨秀江3，陈正林3.一例瑶鸡安卡拉病的诊治[J].贵州畜牧兽医.2020,44(6)：53-55.

[5]王秀东1，刘昊1，李波2.鸡传染性喉气管炎的防治[J].兽医导刊.2021,(3)：33.

[6]李军霞1，吴立佳1，于迎芝1，郑红军2.鸡安卡拉病的流行病学调查与诊疗分析[J].中国畜牧业.2021,(2)：80-81.

[7]费强，王春蕾，苏晓轶.近期吕梁地区鸡安卡拉病的发病特点及防控措施[J].家禽科学.2021,(11)：12-14.