枇杷多糖的提取工艺研究

王倩 1，王静 2，顾莹莹 3，袁子吉 4，

安徽新华学院药学院 安徽省合肥市 230000

摘要：目的：研究枇杷多糖的最佳提取工艺，为后面枇杷多糖的研发提供理论依据。方法：通过研究料液比、提取温度、提取时间对枇杷多糖提取率的影响。结果表明：料液比1∶20，提取温度90℃，提取时间3h，枇杷多糖的最大提取率为4.46mg/g。

关键词：枇杷多糖；提取工艺；正交试验

Study on Extraction Technology of Polysaccharides from Loquat

Abstract：[Objective] Study on the optimal extraction process of polysaccharides from pupa provides theoretical basis for the development of pupa. [Method] the efforts of ratio of solid-liquid ratio，extraction temperature and extraction time on the extraction rate of loquat polysaccharide were studied.[Results] material-liquid ratio 1:20，extraction temperature 100℃，extraction time 3 h,the maximum extraction rate of polysaccharide was 4.46mg/g.

Key Words: LoquatPolysaccharide；Extraction process；Orthogonal test

枇杷颇具药用价值，是一种不常见的药食同源水果品种^。其保健功效尤其显著，主要体现在清肺平喘、止咳化痰等相关方面^。多糖因具有调节机体免疫系统作用^、预防肿瘤^、消炎作用^、抗凝血^、抑制机体氧化速度^、降低血液粘稠度防治糖尿病^等的功能而成为天然药物的研究重点。枇杷中也含有多糖类化合物^，所以枇杷具有的相关延缓人体衰老、辅助降压降脂、抗突变等功能，可能与其所含的丰富的多糖化合物有关^。因此对枇杷多糖提取工艺的研究可以为今后进行枇杷药理作用的研究奠定一定的理论基础。

1材料与方法

1.1实验材料

原料与试剂：蜀峰湾公园内枇杷树上枇杷；葡萄糖粉末、浓硫酸、5%的苯酚试剂、95%乙醇溶液、无水乙醇、蒸馏水。

实验设备：鼓风干燥箱，DF-101Z集热式加热搅拌器，SHZ-D循环水式真空泵，离心机，电子天平,U-T6紫外可见分光光度计，迄谱仪器，回流装置。

1.2实验方法

1.2.1枇杷多糖提取

新鲜枇杷洗净处理后，将其切成小块状，在95℃的鼓风干燥箱内，干燥8h，将烘干的枇杷切块研磨成粉，过80目筛，制成枇杷细粉。枇杷粉末按比例加水混合→回流提取→浓缩滤液→冰浴→离心→干燥→得枇杷粗多糖。

1.2.2标准曲线建立

主要采用紫外分光光度法测定多糖含量。准确称取10mg葡萄糖，先添加少量水使其溶解在250ml的容量瓶中，继续添加蒸馏水至液面刚好到250ml处^。准备8支比色管，向其加入葡萄糖试剂0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml、1.4ml、1.6ml、1.8ml并做好标记，添加蒸馏水至2ml，再分别添加等量的5%的苯酚试剂1ml，随后立即添加5ml的浓硫酸，摇晃均匀放置沸腾的水浴锅中显色15min。空白对照组为蒸馏水2毫升，相同条件同等操作。在最大吸收波长490nm处测其吸光度。得到葡萄糖标准曲线为 y=35.968x+0.042，R²=0.9946，表明葡萄糖溶液浓度和吸光度之间线性关系良好。

1.2.3单因素实验与参数优化

称取10g枇杷粉末5份，分别在研究温度、提取时间和液料比等参数对多糖提取率的影响。根据实验结果，在其他条件相同的情况下，先后改变提取温度、提取时间和液料比，比较各因素对枇杷多糖提取率的影响。

鉴于单因素实验的结果，分别选取三个影响因素的三个可能存在最适条件的较优水平，按L9（33）设计正交试验，优化枇杷多糖的提取工艺。

2结果与分析

2.1单因素实验

2.1.1提取温度对枇杷多糖提取率的影响

由图1可以看出，当提取温度升高到90℃时，多糖提取率明显增加，后面温度继续升高，多糖提取率会下降。结果表明，在温度90℃时，多糖提取率最高。因此，选择提取温度为90℃。

图1提取温度的影响

2.1.2提取时间对枇杷多糖提取率的影响

由图2可以看出，随着提取时间变化，枇杷多糖提取率出现先增后降。结果表明，提取时间在3h时，枇杷多糖的提取率最高。因此选择提取时间为3h。

图2提取时间的影响

2.1.3液料比对枇杷多糖提取率的影响

由图3可以看出，随着液料比的变化，枇杷多糖提取率先升高后降低，结果表明，液料比在1：20时多糖提取率最高。因此选择液料比为1:20。

图3 液料比的影响

2.2正交试验设计

根据2.1单因素实验结果，分别选取三个影响因素的三个可能存在最适条件的较优水平，按L9（33）设计正交试验，试验结果如表1所示。

表1正交试验因素水平表

水平	A料液比	B时间/h	C温度/℃
1	1:15	2.5	80
2	1:20	3	90
3	1:25	3.5	100

表2正交试验方案与结果分析

试验号r	A	B	C	提取率/(mg/g)
1	1	1	1	1.77
2	1	2	2	2.39
3	1	3	3	2.14
4	2	1	2	2.53
5	2	2	3	4.46
6	2	3	1	3.07
7	3	1	3	2.58
8	3	2	1	3.26
9	3	3	2	3.19
K1	6.30	6.88	8.10
K2	10.06	10.11	8.11
K3	9.03	8.40	9.18
R	1.25	1.08	0.36

由表2结果分析，料液比对应的R值最大，说明料液比对枇杷多糖提取率的影响最大，其次是提取时间和提取温度。最优组合是A₂B₂C₃，枇杷多糖的提取率最高，应将料液比设置为1：20，提取时间设置为3h，提取温度设置为90℃。

3结论

在提取温度90℃，提取时间3h，液料比1：20下进行枇杷多糖的提取，，结果枇杷多糖的提取率为4.46mg/g。为枇杷多糖提取及应用提供理论依据。

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【1】通信作者，薛志红（1974-），安徽阜阳人，安徽新华学院药学院教师，副主任药师

项目名称：安徽省大学生创新创业训练计划项目；项目编号：AH202012216110