浙贝黄芩汤辅助化疗治疗恶性淋巴瘤增效机制研究

陈科

北京中医医院顺义医院 北京 101300

【摘要】目的：探索中医药治疗恶性淋巴瘤是否能通过调节免疫起到增效作用。方法：共入组符合纳入标准的恶性淋巴瘤患者30例，入组前抽取患者外周血通过流式细胞仪检测免疫相关指标，根据中医辨证论治予以浙贝芩连汤治疗，同时予CHOP化疗治疗。12周后再次抽取患者外周血通过流式细胞仪检测各项指标情况，根据治疗前后比较，对比免疫功能变化情况。结果：入组患者共30例，初治患者7例，临床有效100%，复发/进展患者共23例，临床有效率59.1%，临床获益率达91%。浙贝芩连汤辅助治疗前后Treg细胞变化情况发现，治疗前Foxp3比例为6.33±0.98，治疗后Foxp3比例为3.87±0.71，治疗前后Foxp3比例比较，具有统计学意义（P<0.05）；CD16+CD56+治疗前后比例增高，并具有统计学意义（P<0.05）。结论：中医药在治疗恶性淋巴瘤可能通过调节免疫起到增效作用。

关键词：恶性淋巴瘤 浙贝黄芩汤 增效机制

恶性淋巴瘤（Malignant Lymphoma，淋巴瘤）是一类独立疾病的总称，是原发于淋巴结或结外部位淋巴组织和器官的免疫细胞肿瘤^[1]。其治疗以西医为主，包括化疗、造血干细胞移植、放疗、手术等手段，对消除缩小病灶，控制病情发展有其优势，但中医药作为辅助措施，起协同作用，在围化疗或放疗期间应用中医药可起到补虚复元，增效解毒，促进康复的目的^[2-3]。本研究通过监测调节性T细胞的变化，探索中医药治疗恶性淋巴瘤是否能通过调节免疫以增效。

一．临床资料

1、研究背景及目的：

研究表明恶性淋巴瘤可能由于免疫紊乱引起的免疫逃逸，进而导致肿瘤细胞能够在体内继续增殖^[4-5]。调节性T细胞在维持机体免疫功能稳定,调控免疫反应方面发挥重要作用。FOXP3介导了调节性T细胞的活性，具有和调节性T细胞相同的免疫抑制功能，对于人体免疫稳态的动态调节起着决定性作用^[6]。本研究通过观察中药治疗前后患者调节性T细胞变化情况，是否存在调节机体免疫功能，进而起到增效作用。并且观察中药干预前后疗效与Foxp3是否存在相关性。

2、研究方法：

根据纳入标准共入组30例患者，入院治疗前抽取患者外周血通过流式细胞仪检测各项指标情况，根据中医辨证论治予以浙贝芩连汤治疗，同时予CHOP化疗治疗。12周后再次抽取患者外周血通过流式细胞仪检测各项指标情况，根据治疗前后比较，探索免疫功能变化情况。

2.1 观察指标：

淋巴细胞亚群：CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD4+CD25+、CD3+CD4+CD25+Foxp3+、CD19+、CD16+、CD4/8Ratio；

2.2 诊断标准：

参考张之南主编的《血液病诊断及疗效标准》中关于恶性淋巴瘤的诊断。

2.3 疗效评价：

疗效评价标准采用采用2007年国际协调计划修订后含PET的指南。

2.4 纳入标准：

①符合恶性淋巴瘤诊断标准；②预计可在我科连续化疗4周期的患者；③预计生存期≥4个月。

2.5 排除标准：

具备下列条件之一者①精神异常，不能正确表述主观症状者；②有严重未控制的内科疾病，在检测淋巴细胞亚群前2周有急性感染者；③治疗依从性差，化疗治疗未满4周期者。

2.6 剔除标准：

①治疗过程中发现有不符合入选条件者；②发生严重不良事件或发生并发症或特殊生理变化不宜继续接受化疗者；③受试者在未完成全部治疗前不再接受用药或检测者；④研究者未执行临床研究方案。

2.7 统计学方法：

釆用 SPSS17.0 统计软件进行分析。

二、研究结果：

1一般情况

1.1年龄分布情况

纳入总人数为30人，年龄范围在21-80岁，最小年龄21岁，最大年龄80，平均年龄为61.3 土3.16岁，以中老年为主。详见表1。

表1 年龄分布情况

年龄	例数	构成比%
20-39	5	16.7
40-59	5	16.7
60-80 合计	20 30	66.6 100

1.2性别资料比较表

表2 性别资料比较

性别	例数	构成比%
男	16	53.3
女	14	46.7

1.3 初治患者及复发/进展患者情况

统计入组病例显示，初治患者占总人数的23%（7例），复发/进展患者占总人数的77%（23例）。

表3 初治患者及复发/进展患者情况

类型	例数
初治	7
复发/进展	23

1.4初治患者与复发/进展患者疗效比较

入组患者共30例，初治患者7例，临床有效100%，复发/进展患者共23例，临床有效率59.1%，与国内外临床试验研究复发/进展患者有效率50%-70%相符；临床获益率达91%。

表4初治患者与复发/进展患者疗效比较

疗效	初治（例）	复发/进展（例）
CR	3	5
PR	4	8
SD	0	8
NR	0	2

2.淋巴细胞亚群分析

2.1治疗前后流式各指标变化情况

根据对比治疗前后流式各指标变化情况发现，CD16+CD56+治疗前后比例增高，并具有统计学意义（P<0.05），提示中药可能通过提高患者体内NKT细胞数量，达到免疫调节的作用；Foxp3治疗前后比例降低，并具有统计学意义（P<0.05）。

表5治疗前后流式各指标变化情况

指标	治疗前	治疗后	P值
CD3+	70.06±4.12	69.45±4.22	0.673
CD3+CD4+	33.29±2.99	33.47±2.28	0.943
CD3+CD8+	31.46±3.04	30.35±2.64	0.957
CD3+CD4+CD25+	8.01±1.77	9.16±1.83	0.389
CD4+CD25+Foxp3+	6.33±5.36	4.93±3.87	0.042
CD19+	14.80±5.18	13.82±4.46	0.922
CD16+CD56+ CD4/8Ratio	4.36±1.16 1.30±0.84	8.79±2.35 1.36±0.81	0.043 0.767

2.2Treg细胞比值及CD4/8Ratio治疗前后变化情况比较

CD3+CD4+CD25+Foxp3+占CD4+比例代表Treg细胞比值。经流式细胞仪检测，治疗前CD3+CD4+CD25+Foxp3+/CD4+比例为6.33±5.36%，经中医治疗及相应的化疗治疗后CD3+CD4+CD25+Foxp3+/CD4+比例为4.93±3.87%，治疗前后CD3+CD4+CD25+Foxp3+/CD4+比例比较，具有统计学意义（P<0.05）。而CD4/8Ratio治疗前后无明显差异。　

表6治疗前后Treg细胞比值及CD4/8Ratio变化情况

	治疗前（%）	治疗后（%）	P值
CD3+CD4+CD25+Foxp3+/CD4+	6.33±5.36	4.93±3.87	0.042
CD4/8Raio	1.30±0.84	1.36±0.81	0.767

2.3 CD4/8Ratio与流式其他指标相关性探索

根据表7发现，CD4/8Ratio与CD3+CD8+比例在治疗前后均具有相关性，且为负相关。

表7 CD4/8Ratio流式其他指标相关性

CD4/8Ratio	CD3+	CD3+CD4+	CD3+CD8+	CD3+CD4+CD25+	CD19+	CD16+CD56+
治疗前	r=-0.05 P=0.792	r=0.648** P=0.00	r=-0.683** P=0.00	r=-0.236 P=0.21	r=0.126 P=0.506	r=0.06 P=0.752
治疗后	r=-0.409* P=0.025	r=0.308 P=0.098	r=-0.779** P=0.000	r=0.413* P=0.023	r=0.14 P=0.461	r=0.06 P=0.753

治疗前CD4/8Ratio比例与CD3+CD8+比例相关系数：kendall相关系数=-0.5.48^**、P=0.000<0.05，Speraman相关系数r=-0.683^**、P=0<0.05。

治疗后CD4/8Ratio比例与CD3+CD8+比例相关系数：kendall相关系数=-0.633^**、P=0.000<0.05，Speraman相关系数r=-0.779^**、P=0.000。

2.4 Foxp3比例与流式其他指标相关性探索

根据表8发现，CD3+CD4+CD25+Foxp3+/CD4+与CD3+CD4+CD25比例在治疗前后均具有相关性，且为正相关。

表8Foxp3与流式其他指标相关性

Foxp3	CD3+	CD3+CD4+	CD3+CD8+	CD3+CD4+CD25+	CD19+	CD16+CD56+	CD4/8Ratio
治疗前	r=-0.197 P=0.296	r=-0.25 P=0.183	r=-0.151 P=0.427	r=0.459* P=0.011	r=0.028 P=0.833	r=-0.022 P=0.908	r=-0.17 P=0.370
治疗后	r=-0.136 P=0.474	r=0.181 P=0.339	r=-0.189 P=0.316	r=0.566** P=0.001	r=0.074 P=0.697	r=0.11 P=0.564	r=0.329 P=0.075

治疗前Foxp3比例与CD3+CD4+CD25+比例相关系数：kendall相关系数=0.343^**、P=0.008 <0.05，Speraman相关系数=-r=0.459^* P=0.011<0.05；

治疗后Foxp3比例与CD3+CD4+CD25+比例相关系数：kendall相关系数=0.387^**、P=0.003 <0.05，Speraman相关系数r=0.566^** P=0.001<0.05。

Foxp3与其他各指标治疗前后比较均无相关性（P>0.05）。

三 讨论

淋巴瘤是我国常见的十大恶性肿瘤之一。淋巴瘤占所有恶性肿瘤的3%-5%在我国。每年新发恶性肿瘤中淋巴瘤约占4%，其在肿瘤导致的死亡排名中居第十位^[7]。早在20世纪70年代初就有学者提出抑制性T细胞的概念，并有学者推测其可能在肿瘤发生发展中发挥着十分重要的作用。

本临床研究主要观察中医药治疗淋巴瘤前后患者体内调节性T细胞特别是Foxp3比例的变化情况。入组患者共30例，初治患者7例，临床有效100%，复发/进展患者共23例，临床有效率59.1%，与国内外临床试验研究复发/进展患者有效率50%-70%相符；临床获益率达91%。本研究通过观察浙贝芩连汤辅助治疗前后Treg细胞变化情况发现，治疗前Foxp3比例为6.33±0.98，治疗后Foxp3比例为3.87±0.71，治疗前后Foxp3比例比较，具有统计学意义（P<0.05）；CD16+CD56+治疗前后比例增高，并具有统计学意义（P<0.05），提示浙贝芩连汤辅助治疗可能通过提高患者体内NKT细胞数量，进一步提高免疫监控的作用。同时，中医药在治疗淋巴瘤方面可能是通过降低机体Foxp3表达及增高NKT细胞来调节机体免疫，改善淋巴瘤进展及预后。

中医药治疗淋巴瘤疗效确切，相关研究表明其通过调节机体免疫功能，达到改善临床症状及预后。本研究由于样本量少，采用研究方法证据级别低，下一步研究需要在研究方法设计方面进一步完善，通过多中心、随机双盲及对照治疗组多方面科学分析及结合相关基础实验，明确中医药在免疫调控方面的具体疗效及机制。

参考文献：

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