茯苓提取物对酒精性肝损伤辅助功能作用研究

王乐 刘鹏

内江中医职业枝术院 四川内江 641099

［摘要］ 目的 对茯苓提取物对酒精性肝损伤辅助功能作用进行了研究。方法 采用昆明种小鼠建立酒精肝损伤模型，设3个剂量组12.5mg/(kg·BW)、25mg/(kg·BW)、75mg/(kg·BW),空白对照组和模型对照组每日灌胃无菌水。每日一次经口给予，连续灌胃32d后测各项指标。结果模型对照组与空白对照组比较，肝组织中MDA显著升高（P<0.01），GSH显著降低（P<0.01），TG显著升高（P<0.05），表明造模成功。与模型对照组（0g/kg·BW）比较，中、高剂量组小鼠肝组织中丙二醛含量显著降低 （P<0.05，P<0.01），TG含量显著降低 （P<0.05），高剂量组GSH 含量显著升高 （P<0.05）。高剂量组小鼠肝组织中脂肪变性平均分显著降低（P<0.05）。结论 在本实验条件下，茯苓提取物对小鼠乙醇致酒精性肝损伤具有辅助保护作用。

［关键词］ 茯苓;酒精性肝损伤；甘油三酯；丙二醛

茯苓多孔菌科真菌茯苓Poria cocos (Schw.)Wolf的干燥菌核，归心、肺、脾、肾经。利水渗湿，健脾，宁心。田洁^[1]等人研究茯苓女贞子复合胶囊对酒精性肝损伤保护作用。结果证实，将茯苓和女贞子这两种中药原料粉末按一定的比例混合制成的胶囊就具有对急性酒精性肝损伤的保护作用。严培兰^[2]等人采用四氯化碳引起的肝损伤动物模型，对灵芝茯苓提取物组方的保肝作用进行了研究。结果表明：与模型对照组比较，1.2 g/kg BW剂量组的小鼠血清谷丙转氨酶活力、血清谷草转氨酶活力、肝细胞坏死平均分和肝细胞病变各种类型总平均分均显著降低，受试物对小鼠体重增长无不良影响。本文探讨了茯苓提取物在 SD 小鼠酒精性肝损伤中对肝脏的保护作用。

1 材料与方法

1. 1. 样品 茯苓提取物每日服用量0.15g,茯苓经水沸腾提取（6倍量水提取2次，2h/次）、浓缩（真空度-0.06~-0.08mpa，温度60~80℃）等工艺加工制成，相当于茯苓药材2.25g。

   2. 1.2 动物 健康SPF级昆明种雄性小鼠共50只，体重18g〜22g 。

1.3 仪器与试剂

仪器 解剖器械、灌胃针、UV2600紫外可见分光光度计、冰冻切片机、

Motic 生物显微镜、BS223S 电子天平、T-1000电子天平、 BS2202S 电子天平

试剂 丙二醛( MDA) 和谷胱甘肽( GSH)测定试剂盒、双缩脲测定试剂盒、甘油三酯( TG) 测定试剂盒。

1.4 方法 取50只昆明种雄性小鼠随机平均分成5组。每组10只，设3个剂量组12.5mg/(kg·BW)、25mg/(kg·BW)、75mg/(kg·BW)， 连续灌胃32d后测各项指标。小鼠灌胃体积为10mL/kg·BW。同时设空白对照组（0g/kg·BW）和模型对照组（0g/kg·BW）,用无菌水代替受试物，每日灌胃体积与各受试物组相同。各剂量组均给予维持饲料。每周称重给予受试物结束时，将模型对照组和各剂量组一次性灌胃给予50%乙醇12mL/（kg·BW），空白对照组给予无菌水。各组动物隔夜禁食16h。处死动物立即称取肝重计算脏体比，并按试剂盒要求进行肝脏生化指标( MDA、GSH、TG) 检测和组织病理学检查，然后用 SPSS 11.0 对数据进行统计处理。

1.5 评定标准 在酒精性肝损伤模型成立的前提下，肝脏MDA、还原型GSH和TG三项检测指标结果阳性，或 肝脏MDA、还原型GSH和TG三项检测指标中任两项指标阳性和病理组织学检查结果阳性，可判定受试样品具有对酒精肝损伤有辅助保护作用。

2 结果

2.1 茯苓提取物对小鼠体重的影响

表1 茯苓提取物对小鼠体重的影响( x±s)

组别	动物数	给予受试物前	给予受试物后
	(只)	体重(g)	体重(g)
空白对照组	10	21.4士 0.6	29.4±1.0
模型对照组	10	21.4±0.4	29.1±1.4
低剂量组	10	21.4±0.3	29.0±1.2
中剂量组	10	21.4±0.3	28.7±0.8
高剂量组	10	21.4±0.4	28.8±0.9

由表1可见，试验前后小鼠的体重在各剂量组与模型对照组(0g/kg·BW)间比较、空白 对照组与模型对照组间比较，差异均无显著性(P>0.05)。即茯苓提取物对小鼠体重无不良影响。

2.2 茯苓提取物对小鼠肝脏 MDA、GSH、TG 含量的影响

表 2 茯苓提取物对小鼠肝匀浆中 MDA、GSH、TG 含量的影响( x±s)

组别	动物数（只）	MDA / nmol·mg-1	GSH /mg·g-1	TG /mmol·g-1
空白对照组	10	0.04±0.01	1.45±0.39	0.010±0.007
模型对照组	10	0.21±0.09	1.01±0.21	0.067±0.060
低剂量组	10	0.17±0.21	1.31±0.28	0.054±0.049
中剂量组	10	0.31±0.15*	1.31±0.25	0.040±0.028
高剂量组	10	0.10±0.04**	1.44±0.51*	0.022±0.015*

注^:* 表示与模型对照组比较 ^{P＜0. 05;} ＊＊表示与模型对照组比较 ^{P＜0. 01。}

由表2可见，经口给予小鼠不同剂量的茯苓提取物32d后，建立酒精肝损伤模型。模型对照组与空白对照组比较，肝组织中MDA显著升高（P<0.01），GSH显著降低（P<0.01），TG显著升高（P<0.05），表明造模成功。与模型对照组（0g/kg·BW）比较，中、高剂量组肝组织中丙二醛含量显著降低 （P<0.05，P<0.01），高剂量组肝组织中GSH 含量显著升高 （P<0.05），中、高剂量组肝组织中TG含量显著降低 （P<0.05）。

2.3 茯苓提取物对肝组织切片病理学影响

表3 茯苓提取物对肝组织切片病理学影响（I±SD）

组别	动物数	脂肪变性
	（只）	平均分
空白对照组	10	8±3
模型对照组	10	39±7##
低剂量组	10	38±10
中剂量组	10	33±9
高剂量组	10	27±12*

注^:##表示与空白对照组比较 ^{P＜0. 01;} ＊表示与模型对照组比较 ^{P＜0. 05。}

由表3可见，经口给予小鼠不同剂量的茯苓提取物32d后，建立酒精肝损伤模型。 模型对照组与空白对照组比较，肝组织脂肪变性平均分显著升高（P＜0.01），表明模型建立成功。与模型对照组（0g/kg·BW）比较，高剂量组肝组织中脂肪变性平均分显著降低（P<0.05）。

3 讨论

本研究通过建立酒精肝损伤模型，设3个剂量组12.5mg/(kg·BW)、25mg/(kg·BW)、75mg/(kg·BW),研究了茯苓提取物对酒精性肝损伤保护作用。结果显示模型对照组与空白对照组比较，肝组织中MDA显著升高（P<0.01）、GSH显著降低（P<0.01），TG显著升高（P<0.05），表明造模成功。与模型对照组（0g/kg·BW）比较，中、高剂量组小鼠肝组织中丙二醛含量显著降低 （P<0.05，P<0.01），TG含量显著降低 （P<0.05），高剂量组GSH 含量显著升高 （P<0.05）。高剂量组小鼠肝组织中脂肪变性平均分显著降低（P<0.05）。茯苓提取物对小鼠体重无不良影响，表明在本实验条件下，茯苓提取物对小鼠乙醇致酒精性肝损伤具有辅助保护作用。

参考文献

[1] 田洁,柯翔鸿,田辉等.茯苓女贞子复合胶囊对酒精性肝损伤保护作用的实验研究.公共卫生与预防医学.2012,23(4):106-108.

[2] 严培兰,蒋春强,王荣谈等.灵芝茯苓提取物组方对化学性肝损伤的保护作用.上海农业学报.2012,28(3):63-65.