EB病毒核抗原1对鼻咽癌细胞miR-34a/Notch1轴及增殖、凋亡的影响

(整期优先)网络出版时间:2021-05-08
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摘要目的探讨EB病毒核抗原1(Epstein-Barr virus nuclear antigen1,EBNA1)对鼻咽癌细胞miR-34a/Notch1轴及增殖、凋亡的影响。方法体外培养人EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)阴性和阳性鼻咽癌细胞系CNE2、C666-1,CNE2细胞设置对照组、空转染组、EBNA1过表达组、miR-34a对照组和双转染组,进行不同的转染处理。实时荧光定量PCR法检测EBNA1、Notch1 mRNA及miR-34a表达;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分布;蛋白免疫印迹法检测Notch1、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)蛋白表达。结果与CNE2细胞相比,C666-1细胞中Notch1 mRNA表达水平升高(P<0.05),miR-34a表达水平降低(P<0.05);转染EBNA1后,CNE2细胞中EBNA1、Notch1 mRNA表达水平、细胞OD值、S、G2/M期CNE2细胞比例及Notch1、cyclin D1蛋白表达水平升高,miR-34a表达水平、细胞凋亡率、G0/G1期CNE2细胞比例降低(P<0.05);进一步转染miR-34a后,CNE2细胞中以上指标的变化均被逆转(P<0.05)。结论EBNA1可能通过降低miR-34a水平,上调Notch1表达,对鼻咽癌CNE2细胞发挥增殖促进、凋亡抑制作用。