胶原蛋白维C粉对小鼠免疫调节作用的影响

张明磊 , 刘佳阳 , 程颐

长沙卫生职业学院 湖南长沙 410100

【摘要】 目的 探讨胶原蛋白维C粉对小鼠免疫功能的调节作用。方法 昆明种小鼠160只，随机分为四组，每组再随机分为对照组和0.2g/kg、0.4g/kg和1.2g/kg·BW 三个剂量组，剂量组小鼠灌胃给以胶原蛋白，持续30天，测定迟发型变态反应、ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化功能、单核-巨噬细胞碳廓清能力、抗体生成和溶血素水平、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力以及NK细胞活性。结果 各组小鼠的体重、脏器/体重比值差异无统计学意义( P＞0.05) ，单核－巨噬细胞吞噬功能试验结果阴性，NK细胞活性试验结果阴性；体液免疫试验结果阳性，细胞免疫试验结果阳性。结论 胶原蛋白可通过调节体液免疫和细胞免疫功能增强小鼠免疫力。

【关键词】胶原蛋白、免疫、巨噬细胞、NK、小鼠

胶原蛋白是从动物的皮、骨、鳞等中提取的一种营养性产品，是天然生物质的降解产物，氨基酸种类丰富，蛋白质含量高且不含脂肪具有较高的消化吸收性。它能对人体补充胶原蛋白，具有恢复、修复细胞功能，增进细胞活力，从而表

现出抗衰、维持皮肤锁水保湿的作用，还可预防骨质疏松、增加免疫细胞数量及免疫细胞的免疫能力，从而增加机体的免疫能力等功效【1-2】。大量的研究发现许多疾病的发生均与脂质过氧化及免疫功能低下有关，抗氧化营养素如维生素C、维生素E等有清除体内自由基的抗氧化作用，对免疫功能的调节也有报道；补充抗氧化维生素可以纠正和提高机体的免疫反应。

因此本实验拟通过观察胶原蛋白维C粉对小鼠免疫的影响，初步对其进行免疫作用做基础评价。

一、材料与方法

1．实验动物：雌性昆明种小鼠160只，体重18～22g，SPF级。

2.受试物：胶原蛋白维C粉（100g胶原蛋白中加入15g维生素C），灌胃小鼠。

3．剂量设计与分组：随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四组，每组40只。其中Ⅰ组用于小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验；Ⅱ组用于NK细胞活性测定及淋巴细胞转化实验；Ⅲ组用于抗体生成细胞实验、血清溶血素测定和迟发性变态反应实验；Ⅳ组用于小鼠碳廓清实验。每组设对照组(蒸馏水)和0.1、0.2和0.6 g/kg·BW经口灌胃，连续30天，每周称体重一次，根据体重调整灌胃体积。

4．实验方法: 按照《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)中“增强免疫力功能实验”有关方法进行。

二 结果

1.小鼠体重、脾脏/体重、胸腺/体重比值:试验第0、15和30天，实验期间动物体重正常增长，各组动物体重的差异无统计学意义（P＞0.05)。各剂量组小鼠脾脏/体重比值、胸腺/体重比值与对照组比较，无显著性差异（P＞0.05)。

2.小鼠细胞免疫功能: 连续灌胃30天后，中，高剂量组小鼠的足趾肿胀度显著高于对照组(表1，P＜0.05)；三个剂量组小鼠的淋巴细胞增殖能力与对照组相比，无显著性差异(表1，P＞0.05)。

表1对小鼠细胞免疫的影响

组别	动物数（只）	足趾肿胀度（mm）	淋巴细胞增殖能力（OD差值）
对照组	10	0.35±0.10	0.077±0.031
0.1 g/kg	10	0.50±0.16	0.094±0.042
0.2 g/kg	10	0.62±0.12*	0.098±0.067
0.6 g/kg	10	0.71±0.09**	0.102±0.075

注：*与阴性对照组比较，P＜0.05，**与阴性对照组比较，P＜0.01。

3.小鼠体液免疫功能: 中、高剂量组小鼠溶血空斑数，显著多于对照组(表2，P＜0.05)；各剂量组小鼠的血清溶血素与对照组相比，无显著性差异(表2，P＞0.05)。

表2.对小鼠体液免疫细胞的影响（ ）

组别	动物数（只）	溶血空斑数（×103/全脾）	HC50（×103全脾）
对照组	10	115.82±22.83	172.63±29.27
0.1 g/kg	10	140.56±19.41	182.49±38.35
0.2 g/kg	10	156.91±20.70*	187.94±36.43
0.6 g/kg	10	157.03±27.23*	190.24±40.58

注：*与对照组比较，P＜0.05。

4.小鼠单核－巨噬细胞吞噬功能: 三个剂量组小鼠的单核－巨噬细胞清除碳颗粒和吞噬鸡红细胞能力与对照组相比，无显著性差异(表3，P＞0.05)。

表3. 对小鼠单核-巨噬细胞功能的影响（ ）

组别	动物数（只）	碳廓清吞噬指数（a）	吞噬鸡红吞噬指数
对照组	10	6.12±1.56	0.34±0.13
0.1 g/kg	10	6.56±1.84	0.37±0.20
0.2 g/kg	10	6.46±2.03	0.39±0.18
0.6 g/kg	10	6.97±1.73	0.40±0.24

5.小鼠NK细胞活性: 三个剂量组小鼠的NK细胞活性与对照组相比，无显著性差异(表4，P＞0.05)。

表4. 对小鼠NK细胞活性的影响（ ）

组别	动物数（只）	NK细胞活性
对照组	10	5.73±1.71
0.1 g/kg	10	6.30±1.79
0.2 g/kg	10	6.88±2.10
0.6 g/kg	10	7.14±2.06

三 讨论

本实验结果显示，中，高剂量组小鼠的足趾肿胀度、小鼠溶血空斑数显著高于对照组(P＜0.05)；三个剂量组小鼠的淋巴细胞增殖能力、抗体积数、单核－巨噬细胞清除碳颗粒和吞噬鸡红细胞能力、NK细胞活性与对照组相比，无显著性差异(P＞0.05)。 表明胶原蛋白维C粉可通过增强小鼠体液免疫和细胞免疫达到增强小鼠免疫力的作用。

引用文献：

【1】郑拯.胶原蛋白肽[J].明胶科学与技术.2009,29(4):195-201．

【2】杨康，孙文长．微生物内含肽在基因治疗中的应用[J].中国微生态学杂志，2010，22(9):859-860．