平行筛查血液中核酸检测与酶免检测的临床应用效果分析

韩丹

哈尔滨市胸科医院 黑龙江 哈尔滨 150056

摘要：目的：研究核酸检测（NAT）与酶免检测（ELISA）应用于血液筛查中的临床应用价值。方法：2019年3月-2020年3月我院88份无偿献血者标本ELISA（HBsAg、抗HCV、抗HIV）检测结果和NAT（HBV DNA，HCV RNA，HIV-1 RNA）检测结果进行比较分析。结果：88份无偿献血者标本ELISA（HBsAg、抗HCV、抗HIV）反应性72份，合格率为90.00%；NAT（HBV DNA，HCV RNA，HIV-1 RNA）反应阳性3份，合格率为34.00%。结论：NAT与ELISA平行检测血液筛查模式不仅能防漏互补，同时也可以缩短血液检测窗口期，提升输血安全性，降低风险。

关键词：ELISA NAT血液筛查

Analysis of clinical application effect of parallel screening blood nucleic acid test and enzyme free test

Abstract: Objective: To study the clinical value of NUCLEic acid test (NAT) and enzyme free test (ELISA) in blood screening.Methods: The ELISA (HBsAg, anti-HCV, anti-HIV) test results and NAT (HBV DNA, HCV RNA, HIV-1 RNA) test results of 88 unpaid blood donors in our hospital from March 2019 to March 2020 were compared and analyzed.Results: ELISA (HBsAg, anti-HCV, anti-HIV) was 72 out of 88 donors, and the pass rate was 90.00%.NAT (HBV DNA, HCV RNA, HIV-1 RNA) was positive in 3 cases, with a qualified rate of 34.00%.Conclusion: NAT and ELISA can not only prevent leakage and complement each other, but also shorten the blood detection window, improve blood transfusion safety and reduce the risk.

Keywords: ELISA, NAT, blood screening

现阶段，在平行筛查血液中，核酸检测与酶免检测得到了广泛应用，能够在很大程度上提高血液筛查效果，对血液安全进行有效保障。本研究对这两种检测方式应用于平行筛查血液中的效果进行了探究，总结如下。

1材料与方法

1.1临床资料：

2018年3月-2020年3月我院采集的无偿献血者标本。献血者均符合国家《献血者健康检查要求》中的相关要求。采集每人份血液同时留取ELISA样管和NAT样管，其中NAT样管采样后4h内1600g离心20分，离心后2-8℃冰箱保存，72内完成检测。

1.2检测试剂：

ELISA试剂：HBsAg、抗HCV由上海科华、英科新创提供；抗HIV由北京万泰、珠海丽珠提供。NAT（HBV DNA，HCV RNA，HIV-1 RNA）由上海浩源生物科技有限公司提供［聚合酶链反应（PCR）-荧光法］所有试剂均在有效期内使用，并严格按试剂说明书操作。

1.3主要仪器：

深圳爱康Uranus AE100全自动酶免仪；上海浩源（台湾基亚）ChaTas BSS1200和美国应用生物系统公司ABI7500PCR扩增仪

1.4检测方法：

每人采集3管EDTA-K2抗凝血（2管NAT，1管ELISA）进行平行检测，检测均在72h内完成.检测前标本2-8℃冰箱保存。ELISA实验采取双试剂同时检测，同时具有反应性即判定为该项反应性；若单试剂反应性则同试剂双孔复检，复检≥1孔反应性则判定为反应性，否则非反应性。除ELISA双试剂反应性标本及ALT不合格标本外，其余标本继续进行NAT检测。NAT采用8人混检出现反应性再进行单检，单检反应性则为反应性。

2结果

项目	单试剂反应性	双试剂反应性	合计
HBsag	9（0.10）	24（0.27）	32（0.4）
抗HCV	10（0.11）	23（0.29）	33（0.41）
抗HIA	7（0.09）	1（0.11）	7（0.10）
合计	26（0.32）	48（0.60）	72（0.90）

项目	反应性标准	反应率
HBA dna	3	0.34
Hcv RNA	0	0
HIV-RNA	0	0
合计	3	0.34

3讨论

病毒抗原及抗体的蛋白结构易变异，造成ELISA漏检，而核酸检测（NAT）的敏感度高，病毒感染在数天后可检测出血液中的微量病毒，对缩短窗口期，减少输血后的病毒感染率具有积极作用，因此将核酸检测作为降低ELISA血清学漏检的解决办法。病毒感染人体到发病到死亡是个复杂的过程。一般情况，在人体产生抗体后长期存在于人体内，但在产生抗体浓度很低时，ELISA无法有效检测，这时的血液已经具有了感染性。病毒在体内复制是通过病毒DNA或RNA进行的。NAT就是通过将血液中微小的病毒核酸（DNA或RNA）通过PCR进行扩增，通过荧光信号进行识别的。虽然病毒在体内的发展过程中可能出现病毒的低浓度，早期检测仍然能够缩短“窗口期”。欧美国家和地区NAT血液筛查研究主要针对的是HCV／HIV；而在我国HBV成高流行趋势，献血筛查主要存在HBV漏检的情况，目前已有研究。从上述数据可以看出，NAT在ELISA无反应的标本中检出HBV DNA病毒，ELISA单试剂反应性标本中检出HBV DNA病毒。NAT方法在血液筛查中有效地检测出ELISA漏检的病毒早期感染标本，有报道抗HBc反应性，HBsAg非反应性的供血者可能导致受血者HBV感染，但由于在献血者中抗HBc反应性比例较高，血液筛查不适宜检测抗HBc，而核酸检测（NAT）可筛查出这部分血液。核酸检测（NAT）、酶免检测（ELISA）在检测原理、方法上存在不同差异，在血液筛查检测技术上形成互补，有效提高病毒感染血液“窗口期”的检出率，进一步降低输血传播病毒的风险。

现阶段，HBV疾病的发病率较高，已经发展成为一种流行趋势，通过输血感染HBV患者数量不断增加。在对献血者进行血液筛查的过程中，核酸检测又会出现各种各样的问题，并且这种检测方式具有较高的实验条件要求。如果忽略该技术的实验条件，或者不能够有效满足各种实验条件，便会在很大程度上提高检测结果假阴性或者假阳性发生率，这会给临床诊断带来诸多负面影响。综上所述，为了显著提高血液安全性，除了要进行酶免检测之外，还需要对其进行核酸检测。血站要联合实际情况开展血液平行筛查，最大程度上发挥出核酸检测和酶免检测的防漏互补的作用，进而对血液安全进行有效保障，防止疾病感染现象出现。

NAT与ELISA平行检测血液筛查模式不仅能防漏互补，同时也可以缩短血液检测窗口期，提升输血安全性，降低风险。

参考文献

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