快速检测方法在食品微生物检测中的应用

(整期优先)网络出版时间:2019-12-05
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快速检测方法在食品微生物检测中的应用

罗莹雪

成都市温江区疾病预防控制中心 611130

随着我国人均收入水平提高,居民生活质量得到巨大改善,人们对于食物安全卫生状况的关注度越来越高,对于食品微生物检验提出更高要求。快速检测方法作为目前食品微生物重要检测方法之一,得到大力推广与使用。病原微生物是影响食品安全的主要因素,科学、准确、快速的检测对确保食品质量至关重要。既往采用的食品微生物检测方法,检测灵敏性欠缺、检测周期长、培养要求高、程序复杂,且最终获取检验结果存在较大误差率,对食品防控工作造成不利影响。

近年来,随着科学技术发展,微生物检测方法、技术等得到更新换代,在食品微生物检验中快速检测方法因其准确性高、检测速度快等优点,被大力推广。该类型检验方法技术含量高,极大弥补传统检测方法存在的不足,为食品安全防控工作提供有力支持。现代食品微生物快速检验方法可包括:分子生物学检验、免疫学检测法等。

分子生物技术的应用:①自动检测技术:随着科学技术的发展与进步,自动检测技术作为一种基于生物检测的技术被应用于临床中,是由美国某保健系统公司研发,可直接提纯、分离出食品中微生物群,进而实现微生物分类。相比于其他检测技术,该方法存在明显优势;在原自动检测技术基础上,美国麦道公司推出二代检测系统,即免疫诊断检测系统,将乳胶凝聚、酶联免疫、固相吸附等技术优势集于一身,极大提高了对食品微生物的检验速度。②PRC技术:在进行食品安全检验中,因食品微生物种类繁多,一般需要多种技术支持,不同技术检测微生物存在差异。如PRC技术对于双歧杆菌、乳酸菌等食品中微生物检测效果良好,特别针对水体中大肠杆菌群、啤酒中淀粉酵母等准确测定。但该技术同样存在不足,在食品微生物检测工作中,主要应用于鉴定核苷酸序列已知微生物;该方法检测具有灵敏度高、操作简单等优点。

免疫学快速检测方法的应用:①免疫层析快速检测方法,通过将食品样品溶液滴入准备好的特定膜一端,溶液根据特定膜毛细管蠕动现象,移动向另一端,出现层析现象,进行鉴定。该方法由特定膜上抗体、固定抗原与被折出物质进行结合形成固相化,并分离出不相关物质,实验结果判定则借助标志物显色反应鉴别。该技术多选用胶体金免疫层析技术,其具有效果佳、能耗低、使用方便、操作简单、科学含量高等优点,多用于鉴别食物中大肠杆菌、沙门氏菌、霍乱弧菌、黄金葡萄球菌、布氏杆菌等。②免疫磁珠快速检测法,该方法主要利用连接抗体的磁珠,对培养液中的微生物进行跟踪与捕捉,并在选择性平板上将发现目标微生物种植,再行鉴别观察。同时,对微生物菌种群可借助于荧光标记抗体或酶标计进行鉴别,深入检测则依托聚合酶链式反应进行。该方法主要用于检验动物饲料、食品中大肠杆菌,特别是对于沙门氏菌、大肠杆菌0111、0157检测效果显著。③免疫酶快速检测法,作为一种快速检测方法,其主要利用酶标计抗体,促使其抗体、抗原与抗原结合物发生反应,最终出现特殊组合,进行检验。对于抗原、抗体存在的数量、情况等依托于酶反应出现的浓度与有色反应情况鉴别。在食品微生物检验中该方法主要采用免疫酶沉淀技术、固相免疫酶测定技术、免疫酶定位技术等。④荧光抗体快速检测方法,该方法在食品微生物检验中,主要利用荧光物质对抗血清抗体进行标注,使其形成抗抗体,食品样品观察借助于荧光显微镜进行,通过对样品中的荧光标记抗抗体、荧光标记抗体、微生物菌种等物质形态的对比,对食品中微生物类别进行最终判断。该方法多用于检测食品中沙门菌、葡萄球菌肠毒素、增李斯特氏菌的检测。

目前,对于食品微生物快速检测方法除免疫快速检测法、分子生物技术外,对微生物的检测还可利用即用型纸片法测定,该测试制片可对微生物数量、状态、类型等准确、便捷的进行测定。对于快速检测方法的应用,关系到食品安全问题,本文主要对分子生物学检验、免疫学检测法进行分析,期望为食品快速检测方法选择提供依据,能促进食品安全管理,提高食品卫生管理质量。