ESR1和ESR2基因遗传变异与妇女产后抑郁症的关联性

陈志文

湘潭市第三人民医院妇产科湖南湘潭411102

摘要：目的：对ESR1和ESR2基因遗传变异和妇女产后抑郁症关联性进行探讨。方法：以我院从2015年1月到2016年1月期间在我院分娩，且产后出现抑郁症的90例产妇作为研究对象，收集产妇血液建立数据库，对ESR1、ESR2基因进行SNP搜寻，同时与产妇产后抑郁症表型进行分析，探寻关联性。结果：分别在ESR1基因第1外显子以及ESR2基因第6外显子上发现SNP，同时对两个SNP进行基因型判定，用R软件分析关联性，发现ESR1、ESR2与妇女产后抑郁症没有明显的关联性。结论：ESR1、ESR2基因遗传变异均不是妇女产后抑郁症的主要基因。

关键词：ESR1；ESR2；产后抑郁症；关联性

产后抑郁症是一种严重的产后不良反应，属于精神障碍疾病，常发于产后两周内，发病率各有不同。根据相关统计，全球妇女产后抑郁症发病率介于0.5%~60%之间，我国妇女产后抑郁症发病率在3.6%~16.5%之间。产妇在产后发生抑郁症，不仅会影响产妇健康，也会对新生儿哺乳营养等造成影响。现阶段，产后抑郁在临床中受到了更加的重视，而为了解决这一问题，必须从其诱因出发，探索造成妇女产后抑郁的真正原因。对于产妇产后抑郁的研究不断增多，但对产后抑郁尚无明确的诊断指标。雌激素是类固醇激素的一种，靶组织众多，包括骨骼、生殖系统、心血管等，一些研究还说明雌激素对消化系统、中枢神经系统也具有重要作用。ESR1、ESR2是雌激素受体的亚型，分别位于6号、14号染色体上。本次研究主要是为了分析ESR1、ESR2与产后抑郁症的关联性，现将具体情况报告如下：

1.资料与方法

1.1样本收集

对在我院生产且产后出现抑郁症的90例产妇进行采集血液样本，并建立产后抑郁症数据库。通过焦虑自评量表、贝氏量表以及抑郁症诊断标准以及产妇一般情况调查表，调查产妇产后抑郁情况以及有关因素。用专业的血液DNA提取剂盒提取血液样本中的DNA，除了进行浓度玩进行电泳，将合格的DNA样品浓度调至20ng/u1.4℃进行保存备用。

1.2方法

基于产妇焦虑自评量表、产后抑郁量表、一般情况调查表等，结合现骨干的诊断标准，对产妇产后抑郁症情况进行具体的判断。产后抑郁症通常在产后4周内发生。若在产后两周内出现五条及五条以上关于诊断标准中症状，则可以却认为抑郁症阳性，而不符合诊断标准，则评价为阴性。对本组90份DNA样本中，24份阳性以及66份阴性DNA样品进行具体的试验。

通过专业网站下载ESR1、ESR2基因序列，同时用在线引物设计软件Primer3.0设计两对引物对基因序列中的SNP进行搜寻。分别选择五个阳性以及五个阴性样品DNA作为模版，实施PCR扩增反应，采用40ng基因组DNA、25ul反应体系，设置PCR循环指标为30s、94℃，所有PCR反应均用专业的热循环仪实施，将PCR产物用电泳进行检验，并送往正规生化公司实施正向测序。利用DNAStar软件程序对所得DNA序列进行分析，进行SNP鉴别。

将90份样品实施PCR扩增，同时送往专业的生化公司测序，将所得的序列通过DNAStar软件中的相关程序进行查看，根据样品中多态位点处显示碱基信号峰对基因型进行具体的判断。

1.3统计学意义

用R软件中fishertest程序，在基因型数据的基础上，对ESR1、ESR2基因上两个突变位点进行分别单点分析，对不同基因型和产后抑郁表现型之间关联性P值进行计算分析。

2.结果

搜寻结果：本次实验中，ESR1共设计了4个针对性的基因外显子引物，而针对ESR2共设计了5个引物。分别利用5个阳性、5个阴性样品实施PCR扩增，将两个基因片段均扩增到单一的条带。根据SNP搜寻的结果，ESR1基因发现SNP位置位于第1外显子上，为rs2077647，而ESR2基因中发现SNP位置在第6外显子，为rs1256049。两个位置上的突变都没有引发氨基酸变化，在其他设计的引物扩增片段中，都没有搜索到SNP位点。

基因型判定：基因型的判定主要是依靠样品中多态位点处显示的碱基信号峰，对ESR1、ESR2基因SNP基因频率以及基因型频率进行分别计算，根据计算结果，发现SNPrs2077647AA基因型频率较高，而产后抑郁阳性个体CC基因型频率明显比阴性个体数量要多；在ESR2基因中SNPrs1256049CT基因型频率较高，而CC基因型频率产后抑郁阴性个体明显比产后抑郁阳性个体较多。

通过R软件实施单点分析，结果显示，ESR1基因RS2077647、ESR2基因rs1256049均与产后抑郁症不具有显著的关联性，P＜0.05

3.讨论

在本次试验中，选择ESR1基因上SNP共包括5个，分别是rs2982694、rs138891155、rs3020434、rs2077647、rs2234693，共设计5个引物实施搜寻；而针对ESR2基因上SNP共包括五个，分别为rs139785869、rs1256063、rs146380568、rs11471356、rs1256049，同样设计5个引物实施搜寻。搜寻的结果显示，在ESR1基因上搜寻到的SNP为rs2077647，而ESR2上搜寻到的SNP为rs1256049，在其余序列上均为搜寻到SNP，这在一定程度上可能与不同人群中SNP分布频率不同有关。

另外，根据R软件统计分析的结果表明，ESR1、ESR2基因型SNP与妇女产后抑郁症均无明显的关联性。一方面，是由于两个基因外显子上SNP都没有导致氨基酸变化，尚未对雌激素受体α、β与雌激素结合过程造成影响，或者是搜寻到的SNP过少，无法引起产后抑郁QTN。另一方面，产后抑郁症成因较为复杂，和家庭环境、产妇性格、分娩方式等都具有密切的联系。

本次研究还存在一定的局限性，血液样品够少，对实验结果准确性造成影响。

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