微生物检验内容及检测技术分析

冯贞玉

哈尔滨市疾病预防控制中心黑龙江哈尔滨150010

摘要：目的：了解腹泻患者粪便主要致病菌的构成及药物敏感性，指导临床用药。方法：采用普通培养和抗生素药物敏感实验进行回顾性分析。结果：90例便培养52例阳性，阳性率57.7%，52株致病菌中大多数呈多重耐药。52例中沙门菌15例（28.8%），志贺菌34例（65.4%），真菌3例（5.8%）。耐2～4种抗生素的有25株（48.1%），而耐4种及4种以上抗生素的共有14株（26.9%）。47株致病菌（3例真菌除外）大多数菌株呈多重耐药，对环丙沙星的敏感率为93.6%，对庆大霉素敏感率89.4%，对头孢哌酮、舒巴坦的敏感率83.0%，对亚胺培南和美洛培南的敏感率均100%。耐药率最高的是氨苄西林为95.7%。真菌的敏感率均为100%。结论：临床医生应在药敏检测结果指导下用药，以减少肠道致病菌耐药率的上升。

关键词：腹泻；药物敏感实验；菌群失调

Abstract：Objective：Tounderstandthecompositionanddrugsensitivityofmainpathogensindiarrheapatients，andtoguideclinicalmedicine.

Methods：Retrospectiveanalysiswascarriedoutbyordinarycultureandantibioticsusceptibilitytest.Results：90caseswerepositivein52cases，thepositiveratewas57.7%，52casesweremostlyresistantto52pathogens.FiftycasesofSalmonella15cases（28.8%），Shigella34cases（65.4%），fungi3cases（5.8%）.Therewere25strains（48.1%）resistantto2to4antibiotics，and14strains（26.9%）wereresistantto4and4antibiotics.Mostofthestrainswereresistanttociprofloxacin（93.6%），andthesusceptibilitytogentamicinwas89.4%.ThesensitivitytocefoperazoneandsulbactamSensitivityrateof83.0%，thesensitivityofimipenemandmeropenemwere100%.Thehighestrateofresistancewasampicillinwas95.7%.Thesusceptibilityoffungiis100%.Conclusion：Cliniciansshouldbeusedundertheguidanceofdrugsensitivitytestresultstoreducetheincreaseofintestinalpathogenresistancerate.

Keywords：diarrhea；drugsusceptibilitytest；floraimbalance

前言：

肠道致病菌主要以志贺菌属和沙门菌属为主，近年来，由于抗生素的滥用，导致耐药菌株逐年增加，甚至出现了“超级细菌”，现对本院2015年至2017年腹泻患者的90例便培养分离的细菌分析如下。

1.资料与方法

1.1资料

2015年至2017年我院住院及门诊的腹泻患者便培养所分离的52株致病菌，在仪器与试剂选购方面，血平皿等培养所用平板购自安徽合肥天达微生物试剂有限公司，药敏纸片和微量生化管均购自浙江杭州微生物试剂有限公司，诊断血清购自宁波天润生物药业有限公司。药敏纸片分别为：丁胺卡那霉素、氨苄西林、舒巴坦、头孢唑林、头孢噻肟、头孢呋辛、庆大霉素、美洛培南、哌拉西林、他唑巴坦、头孢丙烯、氨苄西林、头孢克洛、头孢吡肟、头孢他啶、环丙沙星、亚胺培南（泰能）、哌拉西林、复方新诺明、头孢哌酮、舒巴坦。

1.2方法

药敏方法采用K-B纸片扩散法，用大肠埃希菌ATCC25922作为质控对照，药敏结果按照CLSI（前称NCCLS）2006年制定的规则和标准进行判断。

2．结果

90例便培养中52例阳性，阳性率为57.7%。52例中沙门菌15例（28.8%），志贺菌34例（65.4%），真菌3例（5.8%）。耐2～4种抗生素的有25株（48.1%），而耐4种及4种以上抗生素的共有14株（26.9%）。47株致病菌（3例真菌除外）大多数菌株呈多重耐药，对环丙沙星的敏感率为93.6%，对庆大霉素敏感率89.4%，对头孢哌酮、舒巴坦的敏感率83.0%，对亚胺培南和美洛培南的敏感率均为100%。耐药率最高的是氨苄西林为95.7%。真菌的敏感率均为100%。志贺菌中有一株为福氏志贺菌4c型。3例真菌均为白假丝酵母菌，其对抗真菌药物5-氟胞嘧啶、氟康唑、伏立康唑、二性霉素B、伊曲康唑均敏感。

3．讨论

志贺菌是肠道常见传染性致病菌，其次是沙门菌，真菌为条件致病菌。47株致病菌（3例真菌除外）对环丙沙星的敏感率为93.6%（敏感率最大）。说明环丙沙星对沙门菌和志贺菌具有较好的抗菌活性，因其具有毒性低、副作用小等特点，可作为治疗肠道感染的首选药物，对庆大霉素敏感率89.4%，所以其次考虑庆大霉素，但氨基糖甙类抗生素具有致耳聋的副作用，庆大霉素主要作用于前庭，其次作用于耳蜗，应慎重考虑。由于妥布霉素、庆大霉素等氨基糖甙类抗生素临床较少应用，故耐药性也相对较小。沙门菌和志贺菌均对亚胺培南和美洛培南敏感（耐药率为0%），但其价格昂贵，易引起双重感染，所以不考虑将其作为首选药物。两种致病菌对三代头孢菌素头孢噻肟的耐药率分别为15.2%、17.0%，可根据药敏结果作选择性用药，但由于其广泛使用会引起产超广谱β内酰胺酶、Ampc酶等一系列多重耐药菌的产生，也应慎重选择。氨苄西林因价格便宜，应用范围广，也导致了耐药率非常高。综上分析，应依次选择喹诺酮类、氨基糖甙类、复合酶抑制剂类，但临床上也不能单从经济考虑，而考虑氨苄西林等常用药物，还应结合药敏结果来选择。培养结果中有3例白色念珠菌是由于长期应用抗生素引起的肠道菌群失调。目前大多数学者认为菌群失调所致腹泻原因主要是由于抗生素、同位素、激素、放射线、免疫抑制剂以及肿瘤化疗药物的广泛应用和肠道手术，而抗生素引起的最常见，称为抗生素相关性腹泻（AAD）。有专家指出采用多黏菌素E、妥布霉素和两性霉素B三联疗法，即可选择性抑制G－肠杆菌及念珠菌属，又能保存具有控制作用的厌氧菌数量（双歧杆菌），是选择性消化道去污染的常用方法，有利于肠源感染的防治。由于抗真菌药物对肝肾功能损害较大，且临床也较少应用抗真菌药物，因此真菌对其也非常敏感（敏感率100%）。耐药率较高可能由于本院地处城乡结合部，大部分患者经济条件差，用药也存在一定盲目性，甚至不经过医生直接到药店购买处方药，再加上药店为追求利益而违规售药，从而使不规范用药加剧，这些也应引起相关部门注意。这样做将最终导致病菌耐药率上升，进而出现多重耐药菌株。此外据临床医生不完全统计，大约有13.9%的患者在留取粪便标本前均不同程度的应用抗生素，从而导致部分培养出的菌株耐药性较高，甚至会出现培养阴性的结果。因此，临床医生在进行抗生素治疗前，应尽快采集标本作细菌培养及药物敏感试验。另由于总分离菌株数较少，可能一些数据与其他学者研究结果有一定出入，需进一步研究。

参考文献：

［1］叶应妩，王毓三，申子瑜．全国临床检验操作规程［M］．3版.南京：东南大学出版社出版，2006：801．

［2］赵德军，张碧霞，张彤，等.112株甲型副伤寒沙门菌药敏分析[J].实用医学杂志，2006，18（22）：3977－3978．

［3］张宝善，才文彦，刘国礼，等．呋苄青霉素、庆大霉素及卡那霉素在人体胆汁中浓度的动态观察［J］.北京大学学报（医学版），1982，14（2）：94－97．