循环肿瘤细胞在头颈部肿瘤诊断中的临床作用

戴华卫

邵阳市中医医院头颈外科湖南邵阳422000

摘要：头颈部肿瘤患者死亡的关键原因为肿瘤转移以及重要器官功能丧失，所以需要采取有效方法来降低肿瘤转移以及复发的概率，进而保证治疗效果，改善预后。循环肿瘤细胞对头颈部肿瘤的转移以及预后具有较好的监测效果，可及时检测出现肿瘤转移或者复发患者血液中的肿瘤细胞。本文主要讲述循环肿瘤细胞在头颈部肿瘤诊断中的临床作用。

关键词：循环；肿瘤细胞；头颈部肿瘤；诊断；临床作用

头颈部肿瘤是普外科常见的疾病类型，具有较高的死亡率，主要包括颈部肿瘤、口腔颌面部肿瘤以及耳鼻喉科肿瘤，常见的肿瘤类型有甲状腺肿瘤、舌癌、颊癌、牙龈癌、喉癌以及副鼻窦癌等，对患者健康危害较大，甚至会威胁到生命安全，临床采用手术治疗以及放疗、化疗方案进行治疗，虽具有一定效果，但部分患者会出现远处转移以及局部复发现象，最终导致疾病无法治愈[1]。而通过检测循环肿瘤细胞有助于临床医师及时发现肿瘤的复发以及转移机制，可为头颈部肿瘤的治疗提供有价值的参考依据。

一、循环肿瘤细胞的概念及优势

循环肿瘤细胞是指进入人体外周血的肿瘤细胞，简称CTC，恶性肿瘤会随着血液传播至身体各个器官，临床将这一现象成为肿瘤转移，是导致肿瘤患者死亡的重要原因。原发肿瘤细胞的周围组织侵入肿瘤细胞会蔓延至淋巴管系统以及血液中，进而形成循环肿瘤细胞，然后转移至远端组织之后再渗出，对新的微环境进行适应之后，最终会形成转移灶，所以及早发现血液中的循环肿瘤细胞对疗效评价、预后判断以及个体化治疗均有重要的指导价值。由于肿瘤的转移以及复发与循环肿瘤细胞密切相关，所以可通过监测循环肿瘤细胞来降低复发风险，相对于肿瘤组织来说，血液样本对患者创伤性较小且更易获取，可反复采集进行研究，属于临床较为理想的标本来源，可提高循环肿瘤细胞监测的利用价值。另外，循环肿瘤细胞不但可预测预后、评估风险、监测疗效，还可将患者肿瘤的基本信息反映出来，指导临床医师进行个体化用药，保证治疗效果。此外，循环肿瘤细胞还具有一定优势，可将其作为预测肿瘤细胞远处转移的预测因素与潜在肿瘤细胞播散的早期证据，还可作为放化疗敏感性以及靶向治疗策略的关键，可作为肿瘤生物标记物，有助于监测疾病的复发情况以及进展情况，并在影像学的前提下监测肿瘤的治疗效应[2]。

二、循环肿瘤细胞的检测方法

（一）免疫磁珠法

免疫磁珠法是检测循环肿瘤细胞的有效方法，检测共同白细胞抗原CD45可做为抗体的阴性选择，而对抗肿瘤相关抗原进行检测则为抗体的阳性选择。将红血细胞按照裂解方法进行去除之后，其中的带磁CD45阳性染色可有效分离出白细胞，并且可将CK阳性白细胞进行排除。若含有高核质比、细胞核以及细胞角蛋白染色阳性对表皮生长因子受体检测结果为阳性时，就可鉴定出循环肿瘤细胞[3]。

（二）阳性选择

由于多数上皮细胞均存在上皮细胞黏附分子，而正常血细胞中不存在上皮细胞，所以可通过细胞角蛋白这种上皮标记物抗体使得分离出的细胞可视化。在头颈部肿瘤细胞中，CellSearch系统可识别出多数细胞内的CK标记，每取7.5ml外周血可检测出最少0个，最多2个循环肿瘤细胞，可见该系统仅可将循环肿瘤细胞中的小部分检测出来。

（三）芯片技术

采用芯片技术也可检测出循环肿瘤细胞，微流体学为第一代循环细胞肿瘤芯片的基础，取与标准载玻片规格相同的硅片，并在其上覆盖显微位点8万个，在每个位点都存在循环肿瘤细胞的抗体，微流芯片上有血液流过时，覆盖的8万个显微位点就可将循环肿瘤细胞完全显现出来。但该种检测方式造价较高，并且显微位点附近血流的通畅性在一定程度上影响着抗体覆盖位点所接触的循环肿瘤细胞，由于循环肿瘤细胞检测的分离纯度较高，可将其作为分子生物学方面的检测标准。微涡字形芯片HB-chip为第二代循环细胞肿瘤芯片，可在最快的时间内将样品流体充分混合，其所拥有的小室流动槽可有效提高所捕获的循环肿瘤细胞数量。另外，在载玻片上安装微芯片可使得血样处理量不断增加，进而不断提高循环肿瘤细胞的捕获率。在鉴别过程中采用标准的病理检测法可有效提高对稀有循环肿瘤细胞进行捕获的能力，还可提升检测结果的准确性[4]。

（四）上皮免疫斑点法

采用此种方法所检测的循环肿瘤细胞均具有一定的活力与分泌功能，选取CD45板条种植细胞并孵育48h，细胞所分泌出的蛋白会与板条底部的抗体相结合，将细胞去除之后加入荧光抗体，板膜上会出现细胞分泌的蛋白点，将其使用仪器进行扫描就可得出检测结果。该种方法虽具有一定的效果，但由于循环细胞肿瘤所分泌出的特异性蛋白标志物较少，所以其在临床的使用受到一定限制。

三、循环肿瘤细胞与头颈部肿瘤的病理关系

（一）T分级

临床研究表明，T分级越高所检测出的循环肿瘤细胞的数量越多，若存在明显肿块，则每毫升血液中的循环肿瘤细胞数量较多，若无明显肿块，则每毫升血液中的循环肿瘤细胞较少。

（二）N分级

N分级作为肿瘤重要的预后因素可对淋巴结转移数量、转移大小与循环肿瘤细胞之间的相关性进行预测，对局部晚期病变患者进行检测发现，头颈部肿瘤患者外周血中的循环肿瘤细胞有较好的检出率，这与CT扫描并对颈部淋巴结状态进行评估有一定关系。

（三）总分期

根据检测结果可知，循环肿瘤细胞的水平与疾病分期之间具有相关性，较高的疾病分期所检测到的循环肿瘤细胞越高。通过相关研究表明循环肿瘤细胞的存在以及水平与临床病理特征之间具有较为强烈的相关性，所以可将循环肿瘤细胞最为精确评估患者个体风险的有效指标，表明循环肿瘤细胞具有较高的临床价值[5]。

四、结语

综上所述，由于分离技术以及检测技术存在差异，所以难以进行有效比较，采用半自动CellSearch系统进行检测可将其中不一致的地方进行排除，但循环肿瘤细胞的半衰期较短，在24h以下，所以在进行比较时需要将血液收集以及储存时间作为需要考虑的重要因素。临床在研究前列腺癌的过程中对循环肿瘤细胞的捕获所采取的方式有抗O-钙黏蛋白磁流体以及抗N-钙黏蛋白流体，该种方法更为有效，由于细胞中多数为细胞角蛋白阴性，所以循环肿瘤细胞因为上皮间质化的存在可具有更多间质化表型。此方法在检测过程中充分考虑到上皮间质化的影响，所以转移中起作用的循环肿瘤细胞的表型更具有间质化。为提高头颈部肿瘤的诊断价值，不但需要改进循环肿瘤细胞的检测方法，还应该对其在头颈部肿瘤中的临床价值以及意义进行评估，为临床提供有价值的参考依据，进而不断提高患者的生存率[6]。

参考文献：

[1]王丽菲，赵留芳，李晓江.循环肿瘤细胞在头颈部肿瘤诊断中的临床作用[J].国际耳鼻咽喉头颈外科杂志，2016，40（4）：220-225.

[2]朱瑾，胡丹，王琪，等.循环肿瘤细胞在头颈部肿瘤预警与预后判断中的作用[J].中国医学文摘耳鼻咽喉科学，2017，32（2）：96-101.

[3]吕洋，浦宁，许雪峰.循环肿瘤细胞在胰腺肿瘤中的检测和临床应用[J].中华消化外科杂志，2016，15（10）：1033-1036.

[4]安成，程实，王涛.循环肿瘤细胞生物物理特性的研究[J].检验医学与临床，2016，13（9）：1280-1283.

[5]吴君心，贺俊彦，杜开新，等.鼻咽癌患者外周血循环肿瘤细胞的检测及其与预后的相关性[J].现代肿瘤医学，2017，25（7）：1035-1039.

[6]蒋能，崔咏梅，李淑华，等.6种常见的循环肿瘤细胞的分离与富集技术[J].分子诊断与治疗杂志，2017，9（1）：1-5.