刺五加分散片中紫丁香苷的含量测定

林凯1周玮2

林凯1周玮2

（1海南省药品审核认证管理中心海南海口570216)

(2海南省药品检验所海南海口570216）

【摘要】目的：建立刺五加分散片中紫丁香苷的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法测定刺五加分散片中紫丁香苷的含量，色谱柱为KromasilODSC18柱，流动相为甲醇—水（25:75），检测波长为265nm。结果：刺五加分散片中紫丁香苷的线性范围分别为在23.6～94.4μg•ml-1范围内线性良好，相关系数为0.9997，平均回收率为98.1%，RSD为1.0%。结论：本含量测定方法简单、快速、准确，可用于刺五加分散片的含量测定。

【关键词】刺五加分散片紫丁香苷高效液相色谱as法

【中图分类号】R927.2【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2012）10-0303-02

刺五加分散片系由刺五加浸膏为原料加工制成的口服固体制剂，具有益气健脾，补肾安神的功效，用于脾肾阳虚，体虚乏力，食欲不振，腰膝酸痛，失眠多梦等症的治疗。为了更好的控制刺五加分散片的质量，笔者采用高效液相色谱法测定其中紫丁香苷的含量。实验结果表明该方法简便准确，可以做为该制剂的主要控制指标。

1仪器与试药

岛津LC-10Avp高效液相色谱仪（日本岛津公司）；KQ250DB数控超声波仪(昆山超声仪器有限公司)；BP211D型电子天平（德国赛多利斯公司）

实验所用对照品紫丁香苷由中国药品生物制品检定所提供（批号：111574-200201）；样品由浙江维康药业有限公司生产（批号：20101101，20101102，20101103）；甲醇为色谱纯，水为蒸馏水，其余试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1紫丁香苷含量测定

2.1.1对照品溶液的制备精密称取紫丁香苷对照品5.0mg，置于25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取紫丁香苷溶液2.0ml，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得（每1ml含紫丁香苷40µg）。

2.1.2供试品溶液的制备取本品10片，精密称定，研细，取0.9g，精密称定，置50ml量瓶中，加入甲醇25ml，超声处理（250W，频率35kHz）10min，放冷，加水稀释至刻度，摇匀，静置30min，取上清液，经0.45µm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

2.1.3阴性试验按处方比例制备成缺刺五加的阴性样品，然后按供试品溶液的制备方法，制成阴性对照溶液。

2.1.4色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（250mm×4.5mm，5μm）；甲醇—水（25:75）为流动相；柱温为室温；检测波长为265nm；进样量为10µl。按上述条件获得的对照品、供试品、阴性样品色谱图见图1。

图1高效液相色谱图

A．对照品B.供试品C.阴性样品a.紫丁香苷

Fig1HPLC

A．referencesubstance；B.sample；C.negativesample；a.syringin

2.1.5线性关系考察

精密称取紫丁香苷对照品0.00590g，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得每1ml含紫丁香苷236µg的标准贮备液。精密吸取紫丁香苷标准贮备液1、1.5、2、3、4ml，分别置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得每1ml含紫丁香苷23.6、35.4、47.2、70.8、94.4µg的系列对照品溶液。以对照品溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线并进行回归计算，得回归方程为Y＝25000X＋44560，R＝0.9997，紫丁香苷在23.6～94.4μg•ml-1具有良好的线性关系。

2.1.6精密度实验

吸取刺五加分散片供试品溶液，在上述色谱条件下重复进样6次，测得平均峰面积为1208123，RSD=0.53%，结果表明精密度良好。

2.1.7稳定性试验

取刺五加分散片供试品溶液，在室温下放置，分别在0、2、4、8、12h进行测定，结果表明紫丁香苷峰面积的RSD分别为1.8%，供试品溶液在12h内稳定性良好。

2.1.8重复性试验

按测定方法对同一批供试品分别称取6份，精密称定，制备供试品溶液，在上述色谱条件下分析测定，平均含量为0.93mg•片-1，RSD=1.0%，结果表明重现性良好。

2.1.9回收率试验

取刺五加分散片供试品20片（批号20101101，含量0.93g/粒），研细混匀，取6份，每份0.4g，精密称定，分别加入0.836mg•ml-1的紫丁香苷对照品溶液1ml，制备供试品溶液，在上述色谱条件下进行分析测定，计算回收率，结果见表1。

表1回收率测定结果（n=6）

Tab1Resultofrecoverytest（n=6）

2.1.10测定结果

分别取3批供试品适量，每批1.2g，精密称定，制备供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10µl，注入液相色谱仪，计算紫丁香苷的含量，结果见表2。

表2样品含量测定结果

Tab2DeterminationofsyringininCiwujiadispersibletablets

批号紫丁香苷/（mg•粒-1）

201011010.93

201011020.87

201011030.91

3讨论

3.1在含量测定研究过程中，采用了甲醇—水（20:80）[1]，甲醇-1％o三氟乙酸(18：82)[2]，甲醇-水（1:3.5)[3]等流动相，由于甲醇—水（25:75）分离效果、峰形均为最佳，因此最终被采纳。

3.2在检测波长的选择中，紫丁香苷的最大吸收波长有223nm和265nm，由于223nm接近末端吸收，专属性较差，干扰较大，故采用265nm为测定波长进行考察，结果表明紫丁香苷在265nm下测定阴性无干扰，故采用该波长作为刺五加分散片的检测波长。

3.3对超声时间进行考察。对甲醇的超声时间分别考察了10，20，30min，发现超声10min能将紫丁香苷提取完全。故选择提取时间为10min。

3.4按文献方法使用甲醇做为对照品溶液和供试品溶液的溶剂，在研究中发现，紫丁香苷峰形很不对称，理论塔板数低。后改用水稀释溶剂后，发现峰形很对称，不拖尾，理论塔板数大大提高。

参考文献

[1]徐建富杜秀宝孔景临，等.RP—HPLC测定槲寄生中紫丁香苷的含量[J].中国中医药信息杂志,2005,12（2）:49～50.

[2]张清波刘丽娟.HPLC法测定刺五加中紫丁香苷的含量[J].黑龙江医药,2001,14（6）:428.