构建共定位重组载体

欧阳聪

欧阳聪

中南民族大学生命科学学院430074

【摘要】组成生物体的蛋白质大多数是在细胞质中的核糖体上合成的，各种蛋白质合成之后要分别运送到细胞中的不同部位，以保证细胞生命活动的正常进行。有的蛋白质要通过内质网膜进入内质网腔内，成为分泌蛋白；有的蛋白质则需穿过各种细胞器的膜，进入细胞器内，构成细胞器蛋白[1]。在许多分泌蛋白的研究过程中，都需要利用共定位实验来证明分泌蛋白的分泌途径。最普遍的共定位研究方法就是免疫荧光共定位。

四、讨论

由实验结果可以看出，已经成功构建了载体pCMV-3tag-Plac9和其阴性对照组载体pCMV-3tag-TRX和阳性对照组载体pCMV-3tag-CSH。它们都带有绿色荧光，再通过免疫荧光可以使它们转染的细胞带有红色荧光[2]。这样，我们可以通过激光共聚焦显微镜看出荧光间的相互作用从而判断目的蛋白的分泌途径。

参考文献：

[1]NickelW.Themysteryofnonclassicalproteinsecretion.Acurrentviewoncargoproteinsandpotentialexportroutes[J].EuropeanJournalofBiochemistry，2003，270（10）：2109-2119.

[2]PaladeG.Intracellularaspectsoftheprocessofproteinsynthesis[J].Science，1975，189（4206）：347.