EDTA依赖假性血小板减少的检测方法探析

陈宗云叶晓艺

陈宗云叶晓艺

（福建医科大学附属闽东医院检验科福建宁德355000）

【摘要】目的:探讨临床检验工作中EDTA导致血小板假性减少(PTCP)现象的存在，用正确的方法复查，避免误诊的发生。方法:用SysmexXE－2100型全自动血液分析仪，EDTA抗凝血检测计数血小板，结果异常偏低，再用枸橼酸钠抗凝血检测计数血小板，并作末梢血,EDTA及枸橼酸钠抗凝血涂片染色进行显微镜镜检。结果:EDTA抗凝血用XE－2100型全自动血液分析仪检测计数血小板异常偏低，而枸橼酸钠抗凝血检测计数血小板正常，EDTA抗凝血涂片显微镜镜检可见血小板凝聚，末梢血,及枸橼酸钠抗凝血涂片染色显微镜镜检血小板正常。结论:对于EDTA抗凝血检测计数血小板异常偏低的标本，怀疑EDTA抗凝剂所致的血小板聚集现象所致的血小板假性减低可能时，应加做枸橼酸钠抗凝血检测计数血小板，并作末梢血,EDTA及枸橼酸钠抗凝血涂片染色进行显微镜镜检，以验证PTCP的存在，避免误差的发生。

【关键词】血小板减少；EDTA；枸橼酸钠；手工血小板镜检

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2015）16-0066-02

血常规在临床应用中非常重要，尤其是在出血性疾病，血栓性疾病和止血的诊断和治疗中，血小板计数是重要的依据，血小板的降低或升高，是疾病诊治过程中十分重要的理论基础。随着医疗水平的不断发展，在临床应用中全自动血液分析仪，极大提高了检验速度和检验质量[1]。乙二胺四乙酸盐(EDTA－K2EDTA－Na2EDTA－K3)是国际血液学标准化委员会(ICSH)于1993年建议用于血液常规分析的抗凝剂［2］，具有对血细胞形态影响小且阻止血液凝固的优点，目前，广泛应用于全自动血细胞分析仪血常规的检测。近几年来，EDTA依赖性血小板减少的病例不乏报道，并且已成为目前临床上假性血小板减少的主要原因之一，其发生率0.09%～0.21%[3-4]。这种假性低血小板计数会致使临床增加其他不必要的辅助检查，甚至引起临床误诊、误治。因此检验人员如何能排除干扰，保证检验结果的准确至关重要。

1.资料与方法

1.1一般资料

患者xx性别女，年龄19岁，因晚期妊娠入院。查体皮肤无淤点、无淤斑、双肺呼吸音清，心律正常，腹膨隆，脾、肝、全身浅表淋巴结未触及。入院(20133.6)血常规检查，红细胞3.48×1012/L、白细胞14.2×109/L、血小板30×109/L、血红蛋白82.0g/L，凝血象大致正常，未见临床出血征象。

1.2仪器与试剂

日本Sysmex公司XE-2100型全自动五分类血细胞分析仪及原装配套试剂，XE-2100原装质控(批号76881低值，76882中值，76883高值)。福州长庚医疗器械有限公司提供的EDTA－k2和枸橼酸钠(1：9)真空负压抗凝管;日本Olympus双目显微镜。

1.3方法

首次采集患者EDTA抗凝血一份进行血细胞分析后发现血小板异常偏低，观察和询问患者，未发现皮肤及黏膜的出血倾向,又查看了血小板直方图有血小板聚集现象，随后进行血涂片染色镜检，镜下可见血小板聚集成堆，在排除抽血或大体积的血小板等原因后，怀疑是PTCP。和患者进行沟通后又再次采集枸橼酸钠抗凝血一份，同时采集末梢血涂片,EDTA及枸橼酸钠抗凝血涂片染色进行显微镜镜检。

1.4结果

2.讨论

本文表1示首次EDTA抗凝血血常规检查中XE2100全自动分析仪测得的血小板值是30×109/L，血小板重度减低。观察和询问患者，未发现皮肤及黏膜的出血现象，又查看了血小板直方图有血小板聚集现象,怀疑是PTCP。再次用枸橼酸钠抗凝血机测得的血小板值是165×109/L，并作末梢血,EDTA及枸橼酸钠抗凝血涂片染色进行显微镜镜检，结果发现EDTA抗凝血涂片可见大量小板聚集，聚集的血小板数量不等、大小不一；而末梢血及枸橼酸钠抗凝血涂片染色镜检血小板数量和形态正常，考虑EDTA-PTCP。EDTA-PTCP首先于1969年被Gowland等报道［5］。EDTA-PTCP是一种体外现象，而非疾病，没有任何临床意义，这种现象可发生于健康人群及各种疾病的患者，与疾病的发生与好转没有直接关系，甚至有健康人长时间伴随这种现象[6]。EDTA-PTCP这种现象的发生是由于抗血小板抗体在EDTA存在时导致血小板聚集。这种抗血小板抗体可以是IgG、IgM或IgA，其直接针对隐藏的抗原决定簇［7］，EDTA可诱导其构象发生改变，从而与血浆中可能存在的抗血小板抗体结合而发生聚集.血常规检测中，EDTA是常用的抗凝剂，易引起EDTA-PTCP给患者及临床诊治工作带来很大困扰。本文通过对此例患者进行检验方法的分析认为，在检验工作中，对于血小板严重或显著降低却又没有任何出血症状的患者，应先观察血小板直方图，看是或有血小板凝集并做血片染色观察血小板分布情况，如果在片尾和周边发现血小板聚集成堆现象，在排除抽血或大体积的血小板等原因后，可以初步怀疑为ＥＤＴＡ引起的假性血小板减少，然后更换枸橼酸盐作为抗凝剂检测（部分文献报道EDTA－依赖性假性血小板减少症枸橼酸盐抗凝未能纠正）立即上机检测，并同时作末梢血,EDTA及枸橼酸钠抗凝血涂片染色进行显微镜镜检，从而确定ＥＤＴＡ引起的假性血小板减少的存在，为临床准确报告血小板计数结果，避免误诊的发生。

【参考文献】

[1]涂传清,吴建曾,赵锦,徐波.EDTA依赖性假性血小板减少症1例[J].临床血液学杂志,2006,19(4):56-57.

[2]CohenAM，CycowitzZ，MittelmanM，etal．TheincideneofEDTA－dependentpseudothrombocytopeniainautomaticbloodanalyzers．Haematologia，2000，30(2):117．

[3]KurataY,HavashiS,IouzakiK,etal.Fourcasesofpseudothrombocytopeniaduetoplateletcoldagglutinins[J].RinshoKetsueki,2006,47(8):781-786.

[4]邝妙欢,陆霄云,钟义富,等.假性血小板减少的相关因素[J].中山大学学报(医学科学版),2009,30(8):121-124.

[5]GOWLANDE，KAYHE，SPILLMANJC，etal．AgglutinationofplateletsbyaserumfactorinthepresenceofEDTA［J］．JClinPathol，1969，22(4):460-464．

[6]BIZZAＲON．EDTA-dependentpseudothrombocytopenia:aclinicalandepidemiologicalstudyof112cases，with10-yearfollowup［J］．AmJHematol，1995，50(2):103-109．

[7]BＲAZZAＲON，GOIDSCHMEDINGＲ，VOVDEMBOMEAE．PlateletsatellitismisFcgammaＲⅢ(CD16)receptor-mediated［J］．AmJClinPathol，1995，103(6):740．