不同产地或商品地夏天无总生物碱的含量测定

胡佳何涛陆军

胡佳何涛陆军（辽宁省锦州市食品药品检验所辽宁锦州121000）

【摘要】目的比较不同产地或商品地夏天无药材的总生物碱含量。方法紫外-可见分光光度法。结果通过测定不同产地或商品地夏天无中生物碱，发现总碱含量在1.5%-2.8%之间。结论为夏天无药材的质量质量控制提供依据。

【关键词】夏天无总生物碱含量测定

夏天无又名伏地延胡索、无柄紫堇、一粒金丹，系罂粟科植物伏生紫堇（corydalisdecumbens(Thunb.)Pers.的干燥块茎。具活血通络行气止痛之功效。近年来，以夏天无有效成分为主的制剂有夏天无片，夏天无注射液，风湿灵，夏天无眼药水等，在防治脑梗死，周围神经损害性瘫痪，腰椎间盘突出症，坐骨神经痛，关节腰腿等疼痛及中小学生假性近视有较好疗效。

1.仪器与试药

UV-4802型紫外可见分光光度计；METTLERAB135-S十万分之一电子天平（瑞士）；原阿片碱对照品（110853－200201）由中国药品生物制品检定所提供；市售夏天无药材。

2.方法与结果

2.1对照品溶液的制备

精密称取原阿片碱7.06mg，加1%硫酸溶液2ml溶解置200ml量瓶中，加水稀释至刻度，作为对照品溶液。

2.2供试品溶液制备

取夏天无药材0.1g，粉碎成细粉，精密称定，精密吸取氯仿-甲醇-氨水（5:1:0.1）混合液25ml，称重，超声30分钟，称重，补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取滤液10ml，挥干溶剂，残渣用1%H2SO4溶解置10ml量瓶中，用1%H2SO4稀释至刻度，作为供试品溶液。

2.3溴甲酚紫试液的制备

称取溴甲酚紫0.2g，加15ml蒸馏水及0.1mol/LNaOH3.2ml，溶解加水至250ml,即得。

2.4磷酸缓冲液的制备

称取磷酸二氢钠38.0g与磷酸氢二钠5.04g，加水使成1000ml，即得。

2.5测定波长的选择

采用UV-4802型紫外可见分光光度计进行扫描，对照品溶液、供试品溶液与酸性染料反应后，均在410nm有最大吸收，且无干扰。故选用410nm为测定波长。

2.6线性关系的考察

精密量取对照品溶液1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml、3.5ml、4.0ml、4.5ml，分别置分液漏斗中，补加蒸馏水使成相同体积，各加溴甲酚紫试液及缓冲液各2ml，再各精密加入氯仿10ml，振摇提取2分钟，静置分层，分取澄清的氯仿液，置比色皿中，于410nm波长处分别测定吸收度。计算回归方程为：Y=0.0454X-0.0605，r=0.9997，表明原阿片碱在5.295—15.89ug/ml范围内线性关系良好。

2.7精密度试验

精密吸取2#供试品溶液1ml，于410nm波长处重复测定吸收度5次。吸收度分别为0.306、0.309、0.309、0.310、0.307，均值为0.308，RSD为0.5%，表明仪器精密度良好。

2.8稳定性试验

精密吸取2#供试品溶液1ml，分别在0，15，30，60，120分钟于410nm波长处测定吸收度，60分钟内吸收度均值为0.312，RSD为0.7%，120分钟时吸收度偏高，与60分钟内的均值比较，RSD超过3.0%，结果表明供试品溶液显色后在1h内稳定。

2.9重复性试验

对同一样品进行5次测定，结果分别为0.1595、0.1526、0.1560、0.1518、0.1560，均值为0.1552g/g，RSD为2.0%。表明本含量测定方法具有良好的重复性。

2.10回收率试验

精密称取已知含量的样品约0.05g（2#，总碱含量1.58%），精密加入原阿片碱对照品溶液20ml（0.0353mg/ml），照供试品溶液制备方法制备，精密吸取供试品溶液1ml，置分液漏斗中，加溴甲酚紫试液及缓冲液各2ml，补加蒸馏水2ml，再精密加入氯仿10ml，振摇提取2分钟，静置分层，分取氯仿液，置比色皿中，于410nm波长处测定吸收度，计算含量，并以下式计算回收率。结果见表1。

表1原阿片碱回收率测定结果

2.11样品的测定

取样品，照供试品制备方法制备，精密吸取供试品溶液1ml,按上述含量测定方法分别测定，结果见表2。

表2夏天无中总生物碱的含量测定

3.讨论

3.1在实验过程中，加入氯仿振摇提取时，要避免剧烈振摇，防止乳化现象产生，对生物碱的测定产生影响。

3.212个不同产地或商品地夏天无的总生物碱含量在1.5%—2.8%之间，其中10个样品的总生物碱含量在2%以上，只有两个样品的含量低于2%。为夏天无药材的质量控制提供理论依据。