鸭脚木叶中药材的质量标准研究

廖耀辉邓倩雯

廖耀辉邓倩雯（广州王老吉药业股份有限公司广东广州510450）

【摘要】目的对鸭脚木叶中药材进行质量标准研究，采用显微鉴别和高效液相法测定含量。方法使用中药材粉末显微鉴定方法，寻找鸭脚木叶在显微镜下的最常见的特征性细胞；采用高效液相法测定鸭脚木叶中槲皮素和异鼠李素进行含量测定。结果显微鉴定：具有一定的特征性；含量测定方法槲皮素在1.2752～81.6104g；异鼠李素在1.35～180.0g范围内线性关系良好，槲皮素的回收率为99.58%，异鼠李素的回收率为98.41%。结论定性、定量方法简便、准确，该研究为鸭脚木叶药材质量性评价提供一定的依据。

【关键词】鸭脚木叶槲皮素异鼠李素质量标准

鸭脚木叶为五加科植物鹅掌柴Scheffleraoctophylla(Lour.)Harms的干燥带叶茎枝。全年可采收。《中华本草》记载：具有祛风除湿；解毒；活血。主治风热感冒；咽喉肿痛；斑疹发热；风疹瘙痒；风湿疼痛；湿疹；下肢溃疡；烧伤；跌打肿痛；骨折；刀伤出血等功能[1]。《广西壮族自治区壮药质量标准（第二卷）》2011年版曾收载鸭脚木皮质量标准[2]。鸭脚木叶同时也是我公司成方制剂甘露茶和快应茶的主要成份之一，并以药材粉末入药。本文初步对鸭脚木叶的药材进行显微鉴别和黄酮类成分槲皮素和异鼠李素进行含量测定，作为制定鸭脚木叶的质量标准提供基础研究资料。

1.仪器、试药与药品

OLYMPUSBX-41系统生物显微镜；摄像放大倍数：10×40；数码成像装置：MC30；Agilent1100高效液相色谱仪；电子天秤：Sartorius-CPA225D，十万分之一；乙腈（色谱纯）；水：为超纯水；其余试剂均为分析纯；槲皮素（批号：100081-200406）、异鼠李素（批号：110861-200406）均购于中国药品生物制品检定所产品，供含量测定用；鸭脚木叶药材：分别采购自于广东阳春、广西两地。

2.方法与结果

2.1中药才粉末显微鉴别

将供试品磨成细粉，制片，放置显微镜下观察，并进行显微特征描述：①气孔：直轴式或不定式，存在于表皮细胞中，直径21～35μm，副卫细胞4～6个；②导管：梯纹、螺纹或网纹导管；③星状毛：较少，体部6～12个细胞，作辐射状排列成上下两轮，有的表面光滑，有的有纵向或不规则网状纹理；④石细胞：很少，单个散在，近无色或淡黄色，呈类圆形，卵圆形、类方形、长条形，直径25～92μm，长至176μm，壁厚至20μm[3]。结果见图1

图1鸭脚木叶中药材粉末显微特征图

1、气孔2、导管3、星状毛4、石细胞

2.2药材含量测定

2.2.1色谱条件及系统适应性试验：色谱柱：Diamonsil（钻石）-C18（4.6mm×250mm，5μm），流动相；乙腈—0.2%磷酸(20∶80)，检测波长为370nm，流速：1ml/min；柱温35℃。理论板数以槲皮素计算应不低于1500。槲皮素与相邻峰之间的分离度均＞1.5[4]。对照品和样品溶液色谱图见图1。

图1：从上至下对照品溶液与鸭脚木皮供试品溶液色谱图

2.2.2检测波长的确定：采用Agilent高效液相色谱仪，DAD检测器，对槲皮素对照品溶液、异鼠李素对照品，在200～400nm波长范围内进行光谱扫描，结果表明在370nm处均有最大的吸收，故选定检测波长为370nm。见图2～3。

图3：槲皮素对照品光谱图图4：异鼠李素对照品光谱图

2.2.3溶液配制

2.2.3.1对照品溶液的配制：取槲皮素和异鼠李素对照品适量，精密称定，加80%甲醇制成每1ml各含槲皮素20μg和异鼠李素6μg的混合溶液。

2.2.3.2供试品溶液的配制：取本品粉末约2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加80%甲醇25ml，称定重量，在80℃水中超声提取40min，取出，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.4线性关系考察：①取槲皮素对照品，分别为每ml各含1.2752μg，2.5503μg，5.1006μg，10.2013μg，20.4026μg，40.8052μg，81.6104μg，进样量为10μl。以对照品量（μg）为横坐标（x），峰面积为纵坐标（y），绘制标准曲线；槲皮素的线性方程：Y=38.262x－0.733，R2=0.9996。结果表明槲皮素在1.2752～81.6104μg范围内呈良好的线性关系。②取异鼠李素对照品，分别为每ml各含1.35μg，2.70μg，5.40μg，13.50μg，27.00μg，54.00μg，180.00μg，进样量为10μl。以对照品量（μg）为横坐标（x），峰面积为纵坐标（y），绘制标准曲线；异鼠李素的线性方程：Y=35283x+28.493，R2=0.9999。结果表明异鼠李素在1.35～180.00μg范围内呈良好的线性关系。

2.2.5重复性试验：精密称取同一批号样品，按供试品溶液制备方法平行制备6份，并测定，计算。槲皮素和异鼠李素含量的RSD为1.74%和1.33%。

2.2.6稳定性试验：取同一供试品溶液，在0、3、9、12、24h分别进样，测定峰面积值，结果槲皮素和异鼠李素含量的RSD为0.98%和1.25%。说明制备的供试品溶液至少在24h内稳定。

2.2.7加样回收率试验：精密称取已知含量的鸭脚木叶样品适量，共取6份，置25ml容量瓶中，分别精密加入一定量的槲皮素和异鼠李素对照品溶液，按2.2.1和2.2.3项下方法测定，计算回收率，结果见表1。

2.2.8样品测定：样品测定：分别吸取对照品溶液和供试品溶液，按上述色谱条件测定，以干燥品计算，取平均值，结果见表3。

表3样品测定结果

3.讨论

由于鸭脚木叶的药用部位为干燥带叶茎枝。总结以上实验：①显微下观察：叶中有星状毛细胞存在，而茎枝中主要是单个散在的石细胞存在。②叶中黄酮类成分含量最高，而茎枝中几乎不含量黄酮类成分。因此制定鸭脚木叶药材的质量标准，从源头上对药品进行质量控制，显得尤其重要。本文初步建立鸭脚木叶的显微鉴别和含量测定方法，为该药材制定质量标准提供合理的依据。

参考文献

[1]国家中医药管理局.《中华本草》[S].上海科学技术出版社1999.P5063～5064.

[2]广西壮族自治区食品药品监督管理局.《广西壮族自治区壮药质量标准（第二卷）2011年版》[S].广西科学技术出版社.2011.12.P232.

[3]陆海琳,王进声,苏晗,朱意麟,郭敏,蔡毅.《中国民族民间医药杂志》[J].2007.87.P240～242.

[4]国家药典委员会.中国药典（.2010年版.）一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：附录ⅥD.