溶血标本对血清胆红素的影响

梁妙翎

梁妙翎(广西贵港市中西医结合骨科医院检验科广西贵港537105)

【摘要】目的探讨溶血标本对血清胆红素检验结果的影响。方法采用全自动生化分析仪（用钒酸盐氧化法）检测正常人不溶血和溶血血清中总胆红素和直接胆红素，并对结果进行统计分析。结果用钒酸盐氧化法检测总胆红素、直接胆红素，在Hb≤10g/L时，总胆红素无影响，直接胆红素有轻度负干扰；在Hb≤5g/L时，对直接胆红素无影响。结论经分析，当溶血Hb>10g/L时钒酸盐法检测胆红素结果差异显著，所以临床检验中如遇到溶血严重的标本检测胆红素时应重采集标本，如不能重采集标本的应在报告单上注明标本溶血。

【关键词】溶血标本血清胆红素钒酸盐氧化法

【中图分类号】R446.11【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）23-0149-02

1材料与方法

1.1材料

1.1.1标本来源：病房正常血清和2011年2月到5月31日4例溶血血清。

1.1.2主要仪器：深圳迈瑞公司BS400全自动生化分析仪，美国雅培公司红宝石RUBY血细胞分析仪。

1.1.3试剂来源：迈瑞BS400配套的钒盐酸氧化法总胆红素试剂盒、直接胆红素试剂盒。雅培红宝石RUBY血细胞分析仪配套的原装试剂。

1.1.4每天开机后用质控品进行室内质控，测定结果在允许范围内方可测定标本。

1.2方法

1.2.1统计结果分析，所有的数据采用X2检验进行统计学分析。

1.2.2测定原理：总胆红素在PH3.0附近，在钒酸盐和表面活性剂存在下，可以被氧化成胆绿素。与此同时，胆红素特有的黄色也随之消失。测定胆红素氧化前后吸光度的差，可以计算出样品中总胆红素的浓度。在PH3.0附近，当试剂中缺少表面活性剂时，钒酸只与血清中直接胆红素作用，氧化成胆绿素，此时，测定氧化前后的吸光度之差，可以计算出样品中直接胆红素的浓度。

1.2.3测定方法：用红宝石RUBY血细胞分析仪制备Hb100g/L血红蛋白液。（血红蛋白的制备：抽取4ml新鲜血液置于生理盐水试管中，用生理盐水反复洗涤数次后，加入蒸馏水反复摇匀，使红细胞完全溶解，离心沉淀后吸取上清液）。用对倍稀释法制作0，1/2，1/4，1/8，1/16，分别按1：9加入3个临床新鲜血清中，上机检测TBil,DBil.结果表1：

表1

标本项目01/21/41/81/16

1号血清TBil（umol/L）16.716.616.817.016.6

2号血清36.236.536.336.536.1

3号血清8.68.78.58.88.6

1号血清DBil（umol/L）5.53.75.05.15.4

2号血清12.69.111.111.311.4

3号血清3.11.73.02.93.2

结果分析：Hb≤10g/L时，TBiL无影响，DBiL有轻度负干扰；在Hb≤5时，对DBiL无影响。

2011年2月至5月31号，我科室检测到4例溶血严重的标本，经离心检测，Hb浓度分别为14g/L，15g/L，21g/L，27g/L。和临床沟通后重抽标本无溶血。分别检测出总胆红素，直接胆红素，如表2：

表2

血红蛋白浓度13g/L15g/L19g/L25g/L

TBiL（umol/L）28.547.844.753.4

DBiL（umol/L）9.726.5-8.616.1

重抽后标本无溶血

TBiL（umol/L）21.429.318.730.1

DBiL（umol/L）6.811.75.28.5

讨论

血清中的胆红素大部分来源于衰老红细胞被破坏后产生出来的血红蛋白衍化而成，在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做直接胆红素，未在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做间接胆红素，二者的和就是总胆红素[1]。当溶血Hb>10g/L时，红细胞破裂后，细胞中的血红蛋白、高浓度钾、各种酶类等等物质进入血清，血清中未结合胆红素增多，在有色的血红蛋白作用下，引起吸光度的变化，导致反应方向改变，有可能出现负值[2]，溶血前后的结果相差甚远，已经不能正确的反映出病人的真实病情了。钒酸盐法具有较强抗Hb能力[3]，在Hb≤10g/L时，总胆红素无影响，直接胆红素有轻度负干扰；在Hb≤5g/L时，对直接胆红素无影响。经分析，当溶血Hb>10g/L时钒酸盐法检测胆红素结果差异显著，所以临床检验中如遇到溶血

严重的标本检测胆红素时应重采集标本，如不能重采集标本的应在报告单上注明标本溶血。

参考文献

[1]生物化学第6版，人民卫生出版社，379-380.

[2]中华医学检验网.

[3]中华检验医学检验杂志2002，5（1）：25.五种不同血清胆红素的测定方法筛选和推荐改良JP法的实验报告.