酶联免疫反应加速仪在乙肝五项检测中的应用

(整期优先)网络出版时间:2012-09-19
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酶联免疫反应加速仪在乙肝五项检测中的应用

陈恒1王娜2

陈恒1王娜2

(1河南省舞钢市舞阳钢铁有限责任公司职工医院462500)

(2河南省舞钢市人民医院462500)

【摘要】目的探讨酶联免疫反应加速仪在乙肝五项检测中的应用效果。方法采用酶联免疫反应加速仪和常规方法同步检测卫生部临检中心乙肝五项质控品和随机临床标本240例。结果乙肝五项采用传统方法(37℃水育箱孵育)第一步需要反应60分钟,第二步需要反应30分钟,而采用酶联免疫反应加速仪孵育第一步反应25分钟,第二步反应12分钟就可达到常规孵育同样的效果,特异性二者100%相符。结论酶联免疫反应加速仪应用于乙肝五项检测在保证结果准确性和特异性的前题下能够大副缩短检测时间,提高工作效率值得临床推广、应用。

【关键词】酶联免疫反应加速仪乙肝五项快速效果

【中图分类号】R197.39【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2012)09-0060-02

近期市场上推出了一种用于加快酶联免疫反应的医疗设备——酶联免疫反应加速仪。它利用高频电磁波加速生物分子振转,合理提供酶免反应所需能量,加速抗原抗体结合,从而达到缩短抗原抗体反应时间、提高检测灵敏度的效果。我们将他应用到乙肝五项酶联免疫反应检测中,并与传统方法做了对比,结果如下:

1材料与方法

1.1.试剂乙肝五项酶联免疫反应试剂盒由上海科华生物技术有限公司生产。

1.2.样本卫生部临检中心质控品HbsAg4IU/ml,HbsAb30Miu/ml;正常人血清(阴性样本);240例样本血清均来自我院2011年门诊和住院患者样本。其中男性160例,女性8例,年龄20~50岁,平均年龄38岁。

1.3.仪器酶联免疫反应加速仪(上海复星长征医学科技有限公司)。全自动酶标仪(芬兰雷勃MK3)。

1.4.方法使用上海科华生物技术有限公司生产的乙肝五项试剂盒,分别采用传统方法和使用酶联免疫反应加速仪对待测样本进行检测,传统方法所有操作完全按《全国临床检验操作规程》[1]及试剂盒说明书进行,第一步反应时间为60分钟,第二步为30分钟;使用酶联免疫反应加速仪第一步反应为25分钟,第二步反应为12分钟,其他操作完全与传统方法相同。

2结果

2.1.线性试验

待测样本为卫生部临检中心提供的浓度为800ng/ml的HbsAg和浓度为80mIU/ml的HbsAb。使用阴性血清对2种质控品进行倍比稀释,使用两种方法对稀释液进行测试,重复5次,检测结果如下

表1两种方法对HbsAg线性结果的比较

从表1和表2检测结果可以看出酶联免疫反应加速仪对乙肝表面抗原和乙肝表面抗体的检测结果线性与常规方法检测结果线性高度吻合(r>0.99)。

2.2.临界值试验

使用阴性血清对卫生部临检中心提供的乙肝五项质控进行稀释至临界浓度,采用酶联免疫加速仪和常规方法进行测试,重复5次,检测结果如下:

表3两种方法对乙肝五项质控临界浓度的结果比较

从表3可以看出对于乙肝五项质控品临界浓度值的检测酶联免疫反应加速仪法比常规方法更灵敏。

2.3.临床标本对照试验

对240例来自我院的随机样本采用常规方法和酶联免疫反应加速仪方法进行乙肝五项检测,结果加速仪方法和常规方法对乙肝五项的阳性检出例数完全相符,且酶联免疫反应加速仪检测速度更快。检测结果见表4

表4两种方法临床标本结果对照表

3讨论

酶联免疫反应中抗原抗体的特异性结合是基于抗原决定簇与抗体分子超变区分子间的结构互补性与亲和性,同时抗原表位与抗体高变区必须有足够的紧密接触时间,才能保证两者的完全结合[2]。

酶联免疫反应加速仪是利用免疫反应中抗原、抗体结合部分形成互补、凹腔内氨基酸侧键的位置要有利于产生各次级键同时有序施加的高频电磁波能促使离子迁移和偶极子转动引起免疫分子振动的原理,从而使酶联免疫反应时间由原来的几十分钟甚至数小时几乎减少到原来的一半时间完成,它加快了抗原、抗体的结合反应过程,保证了温育批间测定的一致性,提高了检测灵敏度,广泛应用于加速酶联免疫反应[3]。

蒋永清[4]、吴佳玲[5]、李跃进[6]等对酶联免疫反应加速仪应用于不同的酶联免疫反应所取得的效果进行了报道。

本文通过采用酶联免疫加速仪与常规方法同步检测乙肝表面抗原、乙肝表面抗体高值血清线性试验,乙肝五项临界值实验及临床随机样本对照试验也证实了酶联免疫加速仪在缩短反应时间的同时也保证了酶联免疫反应结果的线性、灵敏度和准确性。大大提升了临床酶联免疫实验的工作效率,是一款值得临床广泛推广应用的临床检测辅助设备。

参考文献

[1]叶应妩,王毓三,主编.全国临床检验操作规程[M].第二版,南京:东南大学出版社,1997.

[2]王兰兰主编.临床免疫学和免疫学检验[M].第二版,北京人民卫生出版社,2003:14.

[3]矍良,李云,滕仪,等.NY/MMJ型酶联免疫反应加速仪在高原地区的临床应用[J].现代检验医学杂志,2007,(3):52-53.

[4]蒋永清,张晓梅,等.应用酶联免疫反应加速仪测定乙肝三对的检测结果分析与评价[J].江西医学检验,2007,25(2):147-148.

[5]吴佳玲,汤宏顺.酶联免疫反应加速法与常规方法定量检测肿瘤标志物CEA的比较[J].实验与检验医学,2010,28(2):143-144.

[6]李跃进.酶联免疫反应加速仪在检测丙肝抗体中的应用[J].中南医学科学杂志,2011,39(5):579-581.