RP-HPLC法测定镇痫片红参的含量以三七皂感R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1总量计

栾雨

栾雨

(江苏省镇江市药品检验所212001)

【摘要】目的：RP-HPLC法测定镇痫片红参的含量以红参皂感R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1总量计。方法：采用十八烷基硅烷键合硅胶柱；流动相：乙腈：水梯度洗脱，检测波长为203nm；流速为1.0ml/min。结果：红参线性范围1～5mg，平均回收率为99.9%，RSD=0.4%(n=5)。结论：方法简便，结果准确。能有效控制复方红参胶囊的质量。

【关键词】红参HPLC三七皂苷R1人参皂苷Rg1人参皂苷Rb1

【中图分类号】R285【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）13-0178-02

【Abstract】Objective:TodeterminethecontentofIndirubinbyRP-HPLCinzhenxianpian.Methods:ThedeterminationwascarriedoutwithSymmetryC-18column.Themobilephase.consistedofCH3CN、H2O.Theflowratewas1ml/minandthedetectivewavelengthwasat203nm.Results:ThecontentofIndirubincanbedeterminedbyRP-HPLC.Thelinearconcentrationrangesofthesecompoundwere1～5g.Theaveragerecoverieswere99.8%respectively.Conclution:Themethodissimpleandaccurateandcanbeusedtocontrolthequalityofzhenxianpian

【KeyWords】HPLCzhenqianpianIndirubin

镇痫片是秉承中医理论并结合现代医学的研制方法创新研究的一种中成药。本文通过RP-HPLC。

1.仪器与试药

1.1仪器

SK250LH超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司)；BP211D型电子天平(赛多利士)；waters2695高效液相色谱仪，ZOL-3KVADAD检测器(美国WATERS公司)。

1.2试药

三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1对照品（均为中国药品生物制品检定所)；乙腈为色谱纯；镇痫片（山西华康药业股份有限公司，批号：20120401，吉林天力泰药业有限公司20120524，黑龙江铁力红叶制药有限责任公司20130807）。

2实验方法

2.1色谱条件

色谱柱：SymmetryC-18柱（3.9mm×150mm，5um），流动相：乙腈为A，水为B。

流速：1.0mL/min，检测波长203nm，理论塔板数：分别为14320、13200、24500。

2.2对照品溶液制备：

精密称适量取人参皂苷Rg1、三七皂苷R1、人参皂苷Rb1对照品加甲醇稀释成0.4mg/ml、0.1mg/ml、0.4mg/ml的溶液。

2.3样品溶液的制备

取装量差异项下的内容物4.0g，精密称定，置锥形瓶中，精密加甲醇50mL，称定重量，放置过夜，置80℃水浴上加热回流2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

图3样品三种成分色图谱

图2三种对照品色谱图

三个峰依次为三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1

2.4标准曲制备的制备

取人参皂苷Rg1、三七皂苷R1、人参皂苷Rb1对照品加甲醇稀释成0.4mg/ml、0.1mg/ml、0.4mg/ml，分别进样1.0、2.0、3.0、4.0、5.0μl，以峰面积（y）为纵坐标，相应浓度（x）为横坐标进行线性回归。结果表明三种峰面积与浓度呈良好的线性关系。

2.5精密度测定

取人参皂苷Rg1、三七皂苷R1、人参皂苷Rb1对照品溶液，重复进样5次，记录峰面积，RSD分别为0.5%、1.0%、1.0%。

2.6重复性测定

按照拟订的含量测定方法，取同批号样品5份，分别制备样品供试液，在上述色谱条件下测定5次的RSD为1.06%。

2.7稳定性试验

在本试验条件下，样品溶液室温放置12h，每隔一段时间进样50μL记录峰面积。RSD均为0.3%。

2.8回收率试验

取人参皂苷Rg1、三七皂苷R1、人参皂苷Rb1对照品适量配制成0.4mg/ml、0.1mg/ml、0.4mg/ml，取1.0ml加入到样品中照样品测定法测定，测得结果:三种成分总量回收率平均值为99.9%,RSD为0.4%。

2.9样品测定

取样品溶液和对照品溶液，各进样50μL，读取峰面积值，按外标法计算含量，结果见表6，图3。

表6样品含量测定结果（n=3）

3.讨论

3.1实验过程中曾尝试水-乙腈梯度洗脱[1]及乙腈-水(21:79)[5]为流动相,经比较得知选用水-乙腈梯度洗脱，比例最佳，峰形及柱效较好。

3.2采用HPLC梯度洗脱测定的人参皂苷Rg1、三七皂苷R1、人参皂苷Rb1总含量与原HPLC等度法测定人参皂苷Rg1含量比较，提取方法简单、准确、重现性好，并且更全面反映红参的质量。

参考文献

[1]中华人民共和国卫生部药典委员会，中华人民共和国卫生部药品标准四册.1991，212