肝损伤动物模型最新进展

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（吐鲁番地区维吾尔医医院新疆吐鲁番838000）

【摘要】现将近几年来国内外对实验性肝损伤动物模型的模型造模方法、造模机制等有关方面研究情况作一综述。

【关键词】肝损伤造模方法

【中图分类号】R318【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）12-0007-02

肝脏是人体具有消化、解毒、排泄功能的重要器官，是人体最大的实质性腺体。肝脏结构和功能复杂，易受多种病原体、毒物及免疫病理累及。肝脏疾病是严重危害人类健康的常见的疾病之一。若肝损伤医治不当会引发多种并发症，如感染、肝创面胆漏、继发性出血等，甚至导致肝纤维化、肝硬化及肝癌等。对各种肝脏疾病发病机制的深入探讨与治疗药物的筛选，很大程度上依赖于和人类肝病病理机制相似的实验动物模型的建立与应用。对肝损伤实验动物模型的深入研究为探讨肝脏疾病的病因，生理病理，治疗和保肝药物的筛选提供有利条件。目前化学性、免疫性肝损伤方法是主要的模型方法。化学性肝损伤模型指的是通过化学药物造成肝损伤，目前研究常用的化学性肝毒物质有四氯化碳（CCl4）、D-氨基半乳糖（D-galactosanine，D-gal）和对乙酰氨基酚（acetaminophen，PAPA）等。免疫性肝损伤指的是通过免疫机制造成的肝损伤，常用卡介苗（BCG）加脂多糖（LPS）诱导法、刀豆蛋白-A诱导法和基酚（acetaminophen，PAPA）等[1,2]。

在我国卫生部颁布的《中药药理实验指导原则》和《保健食品功能学评价程序和检验方法》中明确指定应用CCl4、D-GalN肝损伤动物模型进行保肝降酶新药的药理实验[3]。

CCl4多用于急性肝损伤模型的建立应用，有着技术易于掌握、可靠性强、实验条件要求低、重复性好等优点。是最早研究最广泛的亲肝性毒物，可模拟病毒性肝炎。CCl4诱导的急性肝损伤有明显的肝细胞坏死和炎症反应，是可逆的。CCl4进入体内经肝微粒体细胞色素P450代谢生成自由基（CCl302?和Cl?）及一系列氧活性物，破坏肝细胞正常的代谢过程，导致生物膜、蛋白质和DNA等发生脂质过氧化反应，细胞膜结构完整性和稳定性被破坏，膜通透性改变，离子内流增加，线粒体能量生成障碍等，最终导致肝细胞坏死[4]。CCl4的二级肝损伤是通过诱导激活枯否细胞释放细胞因子如肿瘤坏死因子诱发炎症过程。CCl4的代谢产物与细胞成分如蛋白发生共价结合，在脂质过氧化反应、炎症介质和共价结合的共同作用下，肝损伤加剧[5]。

D-氨基半乳糖（D-gal）动物模型也是目前应用广泛的经典肝损伤模型之一，可诱发急性和慢性肝损伤。是一种选择性损害肝脏的肝细胞磷酸尿嘧啶核苷酸干扰剂。D-gal经肝脏代谢与尿苷酸结合成二磷酸尿苷半乳糖（UDP-gal），当结合速度大于生物合成速度时，尿苷酸被耗竭导致依赖其生物合成的核酸等物质合成受到限制，出现代谢障碍，肝细胞正常结构和功能被破坏，出现肝损伤；此外还可引起肝细胞内外离子比例失调[6]。

卡介苗加脂多糖(BCG/LPS)诱发小鼠免疫性肝损伤模型也是目前常用的经典模型之一，其损伤机制和病理学改变类似于人类乙型肝炎。卡介苗（BCG）具有抗原性，为牛型结核杆菌的减毒菌株。脂多糖（LPS）是革兰氏阴性菌的细胞壁上的有毒成分。BCG大量聚集于肝脏首先激活T淋巴细胞和对肝内枯否细胞和巨噬细胞致敏；之后再用低剂量LPS注射，LPS通过激活处于致敏状态的巨噬细胞释放大量细胞因子如一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子（TNF）、白细胞介素、白三烯等造成肝细胞损害[7-8]。

综上所述,近几年来国内外有关肝损伤模型的研究取得了较大进展,发病机制涉及细胞器损伤、细胞结构的改变、脂质过氧化、酶活性的改变、离子平衡破坏等以及一系列生理生化反应激活过程。各种机制之间不是独立存在的,相互之间有着密切的联系,每个肝细胞的损伤不单独是某种机制在起作用,而是多种机制综合导致的结果[9]。肝损伤机制比较复杂,其中仍有许多不明之处,尚待深入研究。

参考文献

[1]WeiHS,LiDG,LuHM,et,al.EffectsofAT1receptorantagonist,losartan,onrathepaticfibrosisinducedbyCCl4[J].worldJGastroenterol2000;August6（4）：540-545.

[2]中华人民共和国卫生部药政局.新药(西药)临床前研究指导原则汇编[M].1993.7.

[3]徐淑云.现代药理试验方法（下册）[M].北京:北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，2001，1397.

[4]SanmugapriyaE，VenkataramanS.StudiesonhepatoprotectiveandantioxidantactionsofStrychnospotatorumLinn.seedsonCCl4-inducedacutehepaticinjuryinexperimentalrats[J].JEthnopharmacol，2006，105（1-2）:154-160.

[5]赵敏,黄俊明,杨杏芬,等.四氯化碳肝损伤和酒精性肝损伤模型的比较[J].中国公共卫生,2004,20(11):1343O1345.

[6]刘立昌，张磊.愈肝片对D-氨基半乳糖小鼠急性肝损伤的保护作用[J].广州中医药大学学报，2003，20（1）:57-62.

[7]杨天健,魏怀玲.16种药物对卡介苗加脂多糖引起小鼠免疫性肝损伤的作用.中国药理学报,1997,18(2):185

[8]WangGS,LiuGT.Roleofnitricoxideinimmunologicalliverdamageinmice.BiochemPharmacol,1995,49:1277

[9]彭飞,林丽等.肝损伤机制的研究.科技资讯[J]，2012，33:237-237.